Repositório RCAAP

A distrofia muscular dos cães Golden Retriever (GRMD), uma miopatia degenerativa causada pela ausência da distrofina, é geneticamente homóloga à distrofia muscular de Duchenne que acomete humanos, portanto, estes cães são considerados modelos experimentais para estudos em terapia celular. Seu sucesso depende da imunossupressão adequada. A ciclosporina A é indicada para tal e a monitorização de suas concentrações sangüíneas e efeitos adversos são essenciais para viabilizar a terapia. Foram estudados cães GRMD e normais da mesma raça, submetidos à terapia com CsA, associada, nos GRMD, ao transplante de células tronco. Foram avaliados os possíveis efeitos do fármaco sobre a função renal, sendo consideradas as manifestações clínicas, urinálise, testes de função glomerular, e concentrações séricas de uréia, creatinina, sódio e potássio. Como resultado houve aumento discreto na uréia sérica de ambos os grupos; cilindrúria e proteinúria e aumento da densidade urinária no grupo dos GRMD. Concluímos que a CsA pode causar lesão aguda de túbulos renais, principalmente em GRMDs; os mesmos também reagem de modo distinto com relação à homeostase de íons e função renal. Entretanto, diagnóstico precoce e tratamento podem prevenir o agravamento das lesões e desenvolvimento de insuficiência renal.

Neospora caninum is considered the main cause of bovine abortion worldwide. The correct laboratorial diagnose is very important to identify the infected animals and to apply control measure. The objetive of this study was to show the persistence period of colostral antibodies in calves. Eight newborn Holstein Friesan calves, males, were selected from N. caninum soronegative dams. Pre-colostral blood samples were collected of these calves and all of them were seronegative to N. caninum. They were fed with two liters of pooled colostrum from seropositive cows within two hours after birth. Blood samples were collected and tested weekly until the animals turned negative. Serum samples were tested for antibodies to N. caninum using indirect fluorescence antibody test at 1:50; 1: 100 and 1:200 dilutions. Antibodies were not detected from three out of eight calves and they were excluded from the study. The remaining 5 calves seroconverted in all dilutions at the fifth day after colostrums ingestion. At 1:50 dilution, one calf remained positive for 21 weeks, two for 20 weeks and one for 13 weeks. At 1:100, one calf was positive for 15 weeks and the remaining 4 calves for 13 weeks. At 1:200, each calf was positive for 1, 7, 12, 12 and 13 weeks, respectively. These results demonstrate that the colostral antibody to N. caninum may persist until 21 weeks after birth in calves and it's very important to exclud the calves at the first month of age in the seroprevalence studies to avoid the false-positive results.

O Parvovírus Canino (CPV) é um patógeno emergente em cães, isolado pela primeira vez em 1978, nos Estados Unidos. A amostra original de 1978 foi designada CPV tipo 2 (CPV-2). Entretanto, análises de isolados de CPV dos Estados Unidos, por enzimas de restrição e anticorpos monoclonais demonstraram que cerca de 1979, uma amostra variante, designada CPV tipo 2a (CPV-2a) tornou-se prevalente. Subseqüentemente, uma nova amostra antigênica, designada CPV tipo 2b (CPV-2b) também foi observada por análises de isolados de CPV de várias partes do mundo, embora a proporção fosse diferente entre os países. Nesse estudo, foi utilizado o teste de Inibição da Hemaglutinação (HI) com um painel de anticorpos monoclonais para a tipagem de 29 amostras fecais de parvovirus canino, coletadas de cães sintomáticos de 1980 a 1986 e de 1990 a 1995. Os resultados indicaram uma forte predominância do tipo antigênico 2a indicando que a epizootia de CPV no Brasil seguiu o mesmo padrão observados na Europa e países Asiáticos.

This study evaluated the phagocytosis of propidium iodide-labeled Staphylococcus aureus (PI-Sa) by circulating leukocytes obtained from five Enzootic Bovine Leukosis (EBL)-negative cows, five naturally EBL-infected, non-lymphocytotic cows, and five EBL-positive cows with persistent lymphocytosis (PL), analyzed by flow cytometry. Among cells obtained from EBL-infected cows, presenting PL, the percentage of leukocytes carrying out phagocytosis (7.20%), was smaller (p=0.047) than that verified among cells obtained from non-infected (12.90%), and from BLV-infected, non-lymphocytotic cows (14.70%). Furthermore, leukocytes obtained from EBL-infected cows, presenting PL, showed smaller phagocytosis intensity (characterized by the intensity of propidium iodide fluorescence) than leukocytes obtained from non-infected and from EBL-infected, non-lymphocytotic, cows (p<0.001). Therefore, results show a decreased phagocytic function among circulating leukocytes obtained from BLV-infected, lymphocytotic cows.

O tempo de incubação causa danos nas células espermáticas relacionados a necrose e/ou apoptose. O objetivo deste estudo foi avaliar as mudanças na membrana plasmática relacionadas a apoptose e necrose em espermatozóides bovinos durante 2 horas de incubação. Os espermatozóides foram incubados a 5% (v/v) CO2 em ar por 0, 30, 60, 90 e 120 minutes. Depois de cada periodo, as células espermáticas foram incubadas com as sondas fluorescentes Yo-pro e iodito de propideo (PI) para detectar mudanças na membrana plasmática relacionadas a apoptose e a necrose, respectivamente. Usando Yo-pro/PI assay, três subpopulações diferentes de células espermáticas são detectadas pelo citômetro de fluxo: a) células espermáticas em necrose (PI+ and Yo-pro-/+); b) células espermáticas em apoptose (Yo-pro+ and PI-) e c) células espermáticas vivas (Yo-pro- and PI-). A porcentagem de células vivas (membrana plasmática integra) significativamente diminui durante 2 horas de incubação, por outro lado, a porcentagem de espermatozóides em necrose e apoptose aumentaram durante a incubação. As mudanças na integridade da membrana plasmática foram correlacionadas com o tempo de incubação. Enquanto as células vivas foram correlacionadas negativamente com o aumento do tempo de incubação, necrose e apoptose foram correlacionadas positivamente. Também foi observado que necrose foi o principal dano causado pelo tempo de incubação nas células espermáticas. Conclui-se que o tempo de incubação causa alteração na integridade da membrana plasmática relacionadas a necrose e apoptose nas células espermáticas, sendo que necrose foi observada em maior quantidade em todos os tempos de incubação.

No presente estudo, avaliamos a susceptibilidade de cultura primária de fibroblastos de embrião de galinha à infecção por esporozoítas de P. gallinaceum, assim como o desenvolvimento de estágios do ciclo exoeritrocítico. Fibroblastos foram obtidos a partir da musculatura do peito de embriões de galinha e esporozoítas foram obtidos de glândulas salivares de Aedes fluviatilis experimentalmente infectados. Após períodos de 1h, 3h, 24h, 48h e 72h após a infecção, culturas de células foram fixadas e analisadas através de imunofluorescência indireta empregando-se anticorpos monoclonais contra a proteína circum-esporozoíta e microscopia eletrônica de transmissão. Proteína circum-esporozoíta foi detectada em todas as formas parasitárias. O percentual médio de fibroblastos com esporozoítas aderidos ou já penetrados não aumentou proporcionalmente com a concentração de parasitos no inóculo e independeu se o soro utilizado no cultivo celular era soro bovino fetal ou soro de galinha normal. Foi observado que, quando maior é o período de incubação, maior é a possibilidade dos esporozoítas aderirem e penetrarem nos fibroblastos. Esporozoítas foram observados penetrando em fibroblastos depois de 3h de incubação, quando 0,68% das células tinham parasitos aderidos. A diferenciação e o desenvolvimento das formas exoeritrocíticas foram observados após 24h de incubação, quando somente 0.04% dos fibroblastos achavam-se infectados. A cultura primária de fibroblastos de galinha parece ser um valioso modelo experimental para a investigação in vitro do ciclo exoeritrocítico do P. gallinaceum.

Fecal samples of captive souther brown howler monkeys were screened for the presence of Salmonella sp. and Shigella sp. The sensibility for antibiotics was also measured. This is the first report of asymptomatic infection by Salmonella sp. in this specie. Shigella sp. infection was not detected. Screening for this bacteria should be performed during translocation and reintroduction programs. We recommend periodic investigations to prevent occupational hazard on captivity.

Sera from 174 equidaes (15 mules and 161 equines) of Monte Negro municipality, Rondônia State were analyzed against viral and bacterial agents. The serum sample corresponded the total equid population in the municipality considering a confidence interval of 99%, expected prevalence of 50% and absolute desired of 10%. For the viral agents, sera were tested by the Agar Gel Immunodiffusion Test (Equine Infection Anemia - EIA), Inhibition Haemagglutination Test (Equine Influenza 1 and 2 EI1 and 2), and Virusneutralizating Tests (Equine Viral Arteritis EVA, Equine Herpesvirus 1 EHV1, Vesicular Stomatitis VS, Equine Encephalitis Eastern - EEE, Western - WEE and Venezuelan VEE). The diagnosis for brucellosis was made by Agglutination Tests and the Microscopic Agglutination Test was used for leptospirosis. The results showed positivity of 9.6% for EIA, 22.7% for HVE1, 19.9% for IE-1, 42.0% for IE-2, 21.0% for EEE, 11.3% for VEE, 3.4% for brucellosis, and 91.4% for leptospirosis. The most frequent serovars detected were Bratislava (10.5%), Icterohaemorrhagiae (8.7%), Autumnalis (8.7%) for equines and Patoc (26.6%) for mules. No one of the examined samples reacted to EVA, VS, or WEE.

Baccharis coridifolia is one of the most important poisonous plants to cattle in the South of Brazil. The plant provokes necrotic lesions in the lymphoid tissues and in the gastrointestinal tract of cattle. Experimental administration to mice produces most of the lesions seen in the lymphoid tissues of cattle. This study was conducted to search possible differences in the susceptibility of T and B lymphocyte subpopulations. Lymph nodes, spleen, thymus and gut-associated lymphoid tissue (GALT) of cattle and mice experimentally poisoned were evaluated. The results were evaluated based on cell populations affected or remaining in the organs. Immunostaining for B lymphocytes (anti-BLA-36) identified the germinal center of follicles of the lymph node, spleen and GALT in both species. Immunostaining for T lymphocyte (anti-CD3) identified the paracortical area of the germinal centers of the lymph nodes and GALT, the periarteriolar area of the spleen, and the whole thymus both in cattle and mice. Experimentally poisoned cattle and mice shows necrosis of the germinal center of secondary follicles of the lymph nodes, spleen and GALT, where necrotic cells were immunostained for B and less often for T lymphocyte. Necrotic cells in the paracortical region of the lymph node were less often and were immunostained. Necrotic lesions of the thymus were seen only in mice, with positively stained for T lymphocyte. The distribution of the lesions in the lymphoid tissues and the immunostaining in necrotic cells suggested that the active principles of the plant are cytotoxic to B and T cells.

Six Doberman Pinscher, between six and eight years of age, were presented to the Veterinary Hospital from Faculty of Veterinary Science of The University of Buenos Aires. Neurological examination revealed tetraparesis with inability to walk, decreased muscle tonus and myotatic reflexes in all dogs. Serum cholesterol levels, creatine kinase and alkaline phosphatase activities were mildly to markedly elevated, and tibial motor nerve conduction velocities were slow in all dogs. Basal measurements of free T4 and TSH were determined by radioimmunoassay. Although fT4 values were within normal range, in all dogs TSH values were elevated. Based on this results, hypothyroidism was diagnosed and a supplementation therapy was established with oral levothyroxine (T4). Two weeks after treatment has been started, all patients had an improvement in clinical signs, and within a month gait became normal, as well as muscular tonus and spinal reflexes.

Seis felinos com peso médio de 3,3±0,3 kg foram aleatoriamente submetidos a 6 tratamentos, com intervalo mínimo de 1 semana. Os animais receberam a administração intramuscular de solução fisiológica (controle), metadona (0,3 mg/kg), acepromazina (0,1 mg/kg), xilazina (1,0 mg/kg), acepromazina (0,05 mg/kg) + metadona (0,3 mg/kg) ou xilazina (0,5 mg/kg) + metadona (0,3 mg/kg). As freqüências cardíaca (FC) e respiratória (FR), a pressão arterial sistólica (PAS), a temperatura retal, o grau de sedação e o reflexo interdigital foram avaliados antes (basal) e após a administração dos tratamentos em intervalos específicos por 90 minutos. Nos animais tratados com xilazina ou xilazina/metadona, houve diminuição em FR, FC e na temperatura retal. Nos mesmos tratamentos, 1/6 e 2/6 animais não apresentaram reflexo interdigital em pelo menos um dos momentos avaliados. Nos animais que receberam a administração de 0,1 mg/kg de acepromazina, houve diminuição em PAS. Os escores de sedação foram mais elevados nos animais que receberam a administração de xilazina ou xilazina associada à metadona. A administração da metadona isolada ou associada à acepromazina resultou em sedação considerada insatisfatória e sinais de excitação em alguns animais. O uso da metadona isolado ou em associação à acepromazina foi considerado ineficaz quando se objetiva sedação moderada à intensa. A associação da metadona à xilazina produz sedação moderada à intensa, sendo esse efeito semelhante àquele observado após a administração da xilazina isoladamente em dose mais elevada.

Amitraz (AM) and romifidine (RMF), two alpha-2 adrenoceptor agonists, produce sedative effect and decrease spontaneous locomotor activity (SLA) of horses. The behavioral effects and sedation after intravenous injection of RMF (0.06mg/kg) or AM 0.1mg/kg (AM 0.1) or AM 0.4mg/kg (AM 0.4) were compared in horses. RMF caused head ptosis (HP) until 45 min. The lower AM dose induced HP from 45 to 60 minutes and from 120 to 150 minutes, and the higher dose induced HP until 180 minutes. Data concerning changes in SLA were not conclusive. RMF or AM 0.4 caused a greater sedation than AM 0.1 until 20 min. After 20 minutes, the sedation caused by AM 0.4 was greater than that of RMF or AM 0.1. Romifidine caused consistent sedation until 45 minutes. The amitraz emulsion produced a dose-dependent sedation until 180 minutes. Comparing to romifidine, the emulsion of amitraz induced a more substantial sedation. At dosages and dilution applied, amitraz is an effective sedative for horses.

The aim of this paper was verifying the effect of the Equex STM Paste and EDTA addition to a Tris-egg yolk extender, on the post-thaw goat sperm viability. Nine semen samples of two adult goats were collected by artificial vagina and cryopreserved. It was also objective of this study, to evaluate the utilization of a soybean lecithin based commercial extender (Bioexcell® - IMV, L'Aigle, French) for the goat semen freezing. They were formed five experimental groups: TRIS; TRIS+EDTA; TRIS+EQUEX; TRIS+EDTA+EQUEX e Bioexcell. After evaluation, the semen was diluted in the five extenders and packed in 0.25mL straws with 100 million of motile spermatozoa. The samples were cooled at 0,46°C/min to 5°C, submitted at 75min of equilibration time and frozen in liquid nitrogen vapour. The thawing was accomplished in 37ºC water bath for 50s. There were no differences (P>;0,05) on the means of post-thaw total and progressive sperm motility among the groups TRIS, TRIS+EQUEX and TRIS+EQUEX+EDTA. The Bioexcell group obtained the least (P<0,05) percentage of post-thawing total and progressive sperm motility. After the thermotolerance test, it was observed the greatest (P<0,05) rates of total and progressive sperm motility in the Equex STM groups (TRIS+EQUEX and TRIS+EQUEX+EDTA). Thus, it can be affirmed that the Equex addition promotes better maintenance rates in the pos-thaw sperm viability, when compared with the extenders that did not contain it.

O estudo dos linfomas caninos além de abordar a classificação morfológica e imunofenotípica necessita ser ampliado para que se tenha a avaliação da cinética celular. Esta verificação só pode ser feita com segurança quando são avaliados os parâmetros que indicam a taxa de proliferação celular. No homem, estes fatores têm influência no prognóstico e no tratamento dos limfomas. Os 40 linfomas utilizados neste trabalho foram classificados de acordo com a classificação de Kiel e a imunofenotipagem utilizou CD3 (linfócitos T) e CD79a (linfócitos B). A proliferação celular foi avaliada pelos métodos de contagem dos AgNORs e Ki-67 (MIB-1) De acordo com a classificação de Kiel os linfomas de alto grau foram os mais freqüentes, a imunofenotipagem mostrou a mesma freqüência de linfomas T e B. Quando avaliada a proliferação celular houve diferença significativa entre os linfomas de alto e baixo grau tanto pelo método do AgNOR como do KI-67.(MIB-1), porém não foram estatisticamente entre os imunofenótipos Entre as neoplasias de alto grau de malignidade a média de número de NORs por núcleo de célula neoplásica foi de 1,37 ± 0,32, e nos casos de baixo grau de 0,98 ± 0,36, de acordo com o KI-67 a média do percentual de células positivas foi de 43,19% ± 19,01, e 14,09% ± 11,74 nos casos de alto e baixo grau, respectivamente.

Vasos responsáveis pelo suprimento sangüíneo do estômago originam-se da artéria celíaca, primeiro ramo da aorta abdominal, localizada na região do hiato aórtico. Assim, dirigem-se à superfície do estômago as artérias gástricas esquerda e direita, as artérias gastroepilóicas esquerda e direita e as artérias gástricas curtas. Apesar de bem conhecidas as origens destes vasos, informações a respeito do comportamento dos mesmos ao atingirem a superfície do estômago ainda são escassas. O fluxo sangüíneo na parede do estômago exerce importante papel nos mecanismos de defesa da mucosa gástrica. Eqüinos em treinamento intensivo apresentam alta freqüência de ocorrência de lesões ulcerativas na mucosa do estômago, tornando as pesquisas sobre vascularização sangüínea deste órgão com grande significado prático na compreensão dos mecanismos relacionados à proteção da mucosa gástrica. O objetivo deste trabalho foi avaliar alguns aspectos relacionados à distribuição arterial na superfície do estômago de eqüinos adultos, sem raça definida e destinados a abate. Utilizaram-se estômagos oriundos de 15 machos e 15 fêmeas. A área superficial do estômago foi mensurada com software de análise de imagens e os dados correlacionados ao número de ramos avaliados. Observou-se reduzida participação da artéria gástrica esquerda na irrigação da curvatura menor do estômago. Estes achados justificam estudos relacionados à particularidades anatômicas da região da curvatura menor do estômago de eqüinos, em trabalhos futuros.

Avaliou-se a vascularização arterial do escroto em caprinos com vários graus de divisão escrotal. Foram utilizados 30 animais, distribuídos em três grupos: I - animais que apresentavam escroto único e aqueles com divisão até extremidade caudada dos testículos; II - animais com divisão escrotal até 50% do comprimento dos testículos; III - caprinos com divisão escrotal acima de 50% do comprimento testicular. Os caprinos foram sacrificados e, no Laboratório de Anatomia Animal da Universidade Federal do Piauí, realizadas as técnicas de repleção, corrosão ou dissecação, para estudo das artérias escrotais. A artéria escrotal origina-se freqüentemente (95%) da artéria pudenda externa, eventualmente (3,3%) da epigástrica caudal superficial, ou ainda origina-se como um ramo cranial da artéria epigástrica caudal superficial e um ramo caudal da artéria pudenda externa (1,7%). Na região dorsal do septo do escroto emite dois a três ramos primários, que fornecem os ramos secundários e terminais, os quais distribuem-se, indistintamente, nas faces cranial e caudal do escroto e, ocasionalmente, no septo do órgão. O número de ramos terminais não apresenta diferença em relação à configuração escrotal, porém a região correspondente à divisão escroto, conta com maior quantidade desses ramos nos animais que apresentam essa característica mais acentuada.

Espécies fúngicas do gênero Aspergillus são frequentemente associadas com alta mortalidade de aves marinhas em cativeiro. Tendo em vista que a aspergilose geralmente é adquirida pela inalação dos propágulos fúngicos presentes no ar, o estudo objetivou avaliar a qualidade do ar quanto às espécies de Aspergillus, das instalações internas de um centro de reabilitação de animais marinhos que frequentemente recebe pingüins, gaivotas, albatrozes e petréis acometidos por alguma moléstia. Oitenta e um dias de colheitas foram realizados distribuídos em um período de aproximadamente dois anos, através da exposição de placas de Petri contendo Agar Sabouraud dextrose acrescido de cloranfenicol no ambiente, as quais foram posteriormente incubadas a 25ºC. As colônias identificadas como pertencentes ao gênero Aspergillus, foram classificadas quanto à espécie através da avaliação macro e micro morfológica associada a uma chave de identificação. Foram obtidos 43 isolados classificados em sete espécies distintas, sendo A. fumigatus a predominante correspondendo a 27,9%, seguida de A. niger, A. flavus e outras quatro espécies de Aspergillus sp., demonstrando que as aves marinhas estão expostas a espécies fúngicas com potencial patogênico, o que enfatiza a necessidade de um controle microbiológico no ambiente onde são mantidos os animais em cativeiro.

This study has been designed to assess the microbiological quality of oyster Crassostrea rhizophorae and of the water used in farms located at the Pacoti River estuary, Ceará State, by means of the MPN of total coliforms (Ct) and thermtolerant coliforms (CT). The database consisted of 15 samples collected from June to November, 2006. The water was kept within the limits set up by the current legislation. MPN values were in the ranges of <1.8 18,000 Ct per 100 ml and <1.8 2,000 CT per 100 ml, for the water, and <1.8 3,500 Ct per gram and <1.8 2,800 CT per gram for the oyster itself. Twenty-five strains isolated from the cultivation water and identified as Escherichia coli were tested for susceptibility to a few antimicrobians and proved resistant to ampicillin, nitrofurantoin, tetracycline, sulfazotrin, nalidixic acid, ciprofloxacin and imipenem. From the oysters, four strains were identified as E. coli and proved resistant to tetracycline and imipenem. From the afore-mentioned results, it can be concluded that: Pacoti River waters have received a clean bill of health according to the national legislation; the majority of water-isolated E.coli strains (59.43%) were sensitive to the currently used antimicrobians, except for imipenem to which 80% of the identified E. coli strains proved resistant; sensitivity of the oyster-isolated E. coli strains was found to be high to most of the tested antimicrobians. In all, it is suggested that more clear management measures be made available so as to allow for microbiological quality evaluation of raw-consumed mollusks.

A leptospirose é uma infecção amplamente difundida pelo mundo, transmitida entre o homem e os animais que causa uma queda na produção de rebanhos bovinos, e oferece riscos relacionados à saúde pública sendo uma importante zoonose. Foram estudadas 27 propriedades de pecuária bovina leiteira em Botucatu-SP e limítrofes, com colheitas de amostras de sangue e rim de roedores, sangue e urina de bovinos e sangue dos trabalhadores. A sorologia foi realizada pela soroaglutinação microscópica (SAM). Foi tentado o isolamento de leptospiras por cultura da urina dos bovinos e dos rins dos roedores. Foi realizada a reação em cadeia pela polimerase (PCR) dos rins dos roedores. Para a SAM, 46/140 (32,85%) amostras de soro bovino e 8/34 (23,53%) humana foram positivas, respectivamente. Para as amostras humanas, o sorovar Bratislava (37,51%) apresentou maior ocorrência, enquanto que para os bovinos, os sorovares mais freqüentes foram Hardjo e Castellonis, com 26,08% cada. Todos os roedores foram negativos à sorologia. Nenhuma leptospira foi isolada, e as amostras de rim foram negativas à PCR. Nos bovinos, a água de açudes e as ordenhadas com má qualidade de higiene foram consideradas importantes riscos de infecção nas propriedades acometidas (p<0,05), onde outros problemas reprodutivos, exceto aborto, podem estar relacionados. Por outro lado, para o homem o sistema de drenagem foi o mais importante fator de risco nas propriedades estudadas. Assim, enfatiza-se a necessidade de melhora no manejo zoosanitário das propriedades, principalmente com relação ao suprimento de água.

The objective of the present study was to investigate the effect a prolonged and high of sodium fluoride intake on liver metabolism in ovine. The trial involved 12 Texel x Ile de France animals, which were divided into two equal groups. The control group was treated daily with iodized salt (5 g NaCl/animal + 0.2 ppm I/kg dry matter) and the experimental group, with received the same iodized salt added of sodium fluoride (4.7 mg F/kg body weight) for 150 days. Blood samples were collected on days 60, 90, 120 and 150 of the treatment. Besides, on same days and with samples collected also at time zero, animals were placed in metabolic cages for a 24-h collection of urine samples. After animals were euthanized, a liver sample was collected for histological analysis. Fluoride concentrations in the serum and urine were increased in the experimental group. No statistical differences were observed in total protein, albumin and total cholesterol serum concentrations, and in the activities of the enzymes gamma glutamyl transferase and aspartate aminotransferase. No changes were observed in the histological analysis of the liver. The administration of sodium fluoride in the dose used and during the period analyzed in the present study does not lead to hepatotoxicity.