Repositório RCAAP

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Nos últimos 20 anos, a Convenção de Aarhus tem sido fundamental na apropriação da democracia ambiental e da sustentabilidade dentro da Região da Comissão Económica para a Europa das Nações Unidas (CEE-ONU) e além. O acesso efetivo à informação, a participação pública e o acesso à justiça são guias essenciais para promover um processo inclusivo e participativo para projetos ambientais e de planeamento espacial e devem ser resguardados pelos Estados Membros a fim de garantir que estes serviços sejam entregues para benefício geral dos cidadãos. O objetivo geral deste Relatório de Estágio foi avaliar a eficácia da aplicação da Convenção de Aarhus em Portugal e identificar os principais constrangimentos, desafios e oportunidades para melhoria da implementação da Convenção no país. Este trabalho fora elaborado através de pesquisa bibliográfica e documental e atividades desenvolvidas junto ao Conselho Nacional do Ambiente e do Desenvolvimento Sustentável. Em análise aos dois últimos Relatórios de Implementação Nacional enviados por Portugal e aos procedimentos e resultados de consulta pública de alguns instrumentos de políticas de ambiente e do ordenamento do território, verificou-se que a legislação nacional correspondente está pavimentada nos três pilares de Aarhus, porém a realidade é ainda de baixos níveis de participação em consultas públicas, de acesso inócuo à informação e infrutífero à justiça. Ainda, através de um inquérito conduzido pela Agência Portuguesa do Ambiente aos 308 municípios portugueses, constatou-se que cerca de metade dos (poucos) respondentes declaram conhecer a Convenção, revelando que este instrumento ainda não tem raízes profundas na “consciência” dos municípios portugueses e, por conseguinte, da sua população. É necessário encarar os cidadãos como agentes dos pleitos ambientais e abrir espaço à uma era de participação pública mais expressiva, através da simplificação da informação e da sondagem de novas técnicas e métodos de consulta popular, de forma a instaurar uma cultura global colaborativa em matéria ambiental, amparada pelas diretrizes de Aarhus.

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Introdução: A Drosophila melanogaster é amplamente utilizada em diversas áreas de investigação por ser um organismo pequeno, com ciclo de vida curto, muita descendência, de fácil manutenção dispondo de diversas ferramentas genéticas bem estabelecidas. Em particular, o desenvolvimento do oócito de Drosophila constitui um sistema clássico de estudo da gametogénese feminina. Atualmente, a evolução da tecnologia permite revisitar conceitos base com novas perspectivas. A mosca do vinagre fêmea tem dois grandes ovários interligados por um oviduto. Cada ovário é composto por vários ovaríolos, que são fileiras de câmaras ovarianas (egg chambers) em diferentes estádios de desenvolvimento. Enquanto na extremidade posterior do ovaríolo encontramos o ovo maduro, na ponta oposta do ovaríolo encontramos o germário, que contém células estaminais que se dividem para formar quistos de 16 células. Dessas células, apenas uma se diferencia em oócito, enquanto as 15 células restantes se diferenciam em células nutritivas (nurse cells) que suportam o desenvolvimento do oócito, fornecendo nutrientes e RNAs maternos através dos ring canals. Cada egg chamber é constituída por essas 16 células circundadas por uma única camada de células foliculares somáticas, que contribuem para formar a membrana vitelina e, posteriormente, o córion. A polaridade celular é uma característica importante para o desenvolvimento do oócito e é definida por uma assimetria estrutural e funcional da célula. No caso do oócito de Drosophila, a quebra da simetria inicial e o estabelecimento da polaridade dependem do transporte de mRNAs maternos das nurse cells para o oócito e sua subsequente localização assimétrica no oócito. A regulação da localização do mRNA dentro do oócito é crucial para a padronização embrionária. Os eixos embrionários de Drosophila são determinados pela localização de mRNAs específicos do oócito, como oskar (osk), bicoid (bcd), nanos (nos) e gurken (grk). Durante a oogénese e o desenvolvimento embrionário inicial, diferentes proteínas formam gradientes a partir de diferentes regiões do oócito e/ou embrião onde os mRNAs são traduzidos. A assimetria na localização de proteínas pode ser alcançada por mecanismos distintos, incluindo a eficiente localização subcelular de mRNAs seguida de tradução local, ou, se os mRNAs são pouco localizados, pela repressão traducional eficiente de mRNAs não localizados, o que restringe a tradução a um pequeno subconjunto de mRNAs localizados em regiões estritas do oócito. A localização subcelular de mRNAs depende de sequências “zipcode", tipicamente localizadas nas regiões 3' ou 5'UTR desses transcritos. Essas sequências são reconhecidas por proteínas específicas de ligação ao RNA que medeiam a interação com complexos de proteínas motoras para o transporte citoplasmático direto. Além disso, a proteção local da degradação do mRNA e/ou movimentos "aleatórios" do mRNA, que são ligeiramente enviesadas para determinada região do oócito, em conjunto com mecanismos de ancoragem, também garantem o enriquecimento do mRNA em regiões subcelulares específicas. Ainda assim, quando os mecanismos de transporte de RNA são ineficientes, a localização assimétrica de proteínas depende da regulação local da tradução. Por exemplo, ao contrário do mRNA bcd, que é eficientemente localizado no pólo anterior do oócito e cuja tradução resulta num gradiente anterior da proteína Bcd, os mRNAs osk e nos são apenas ligeiramente localizados no pólo posterior, exigindo repressão traducional eficiente de mRNAs não localizados para garantir um gradiente posterior destas duas proteínas. O enriquecimento de Osk no pólo posterior é necessário e suficiente para a tradução local de mRNAs do plasma germinal (pole plasm), o que é crítico não só para a padronização posterior, mas também para a segregação das células germinais (pole cells). A tradução local dos mRNAs de nos é assegurada pela repressão, dependente de Bcd, da tradução anterior, enquanto a regulação traducional dos mRNAs grk e osk envolve o complexo eIF4E-Cup-Bru. Durante a oogénese inicial, o mRNA grk está localizado no pólo posterior do oócito em desenvolvimento, contribuindo para a determinação do eixo antero-posterior, conferindo identidade posterior às células foliculares somáticas. Subsequentemente, e à medida que o núcleo do oócito migra para a região anterior, a localização perinuclear do mRNA grk e a sua tradução local, forma um gradiente dorsal cuja função é crítica para a identidade dorsal das células foliculares e para padronização dorsoventral do embrião. Questão biológica e objetivos: A nossa questão biológica é como os mRNAs se localizam dentro de uma célula, mais especificamente, dentro do oócito de Drosophila. Durante décadas, a localização geral do mRNA tem sido estudada principalmente recorrendo a hibridações in situ não-quantitativas. Embora essa abordagem tenha levado a importantes contributos para o nosso conhecimento científico, esta pode, no entanto, levar a interpretações incorretas. Por exemplo, hibridações in situ para bcd revelam um enriquecimento cortical anterior e hibridações in situ para de osk e nos revelam um enriquecimento cortical posterior no oócito. No entanto, abordagens por northern blot mostraram claramente que, enquanto o mRNA bcd é eficientemente localizado na região anterior do oócito, a maioria dos mRNAs nos e osk não está localizada posteriormente sendo que apenas uma pequena fração destes é enriquecida na região posterior. Para ultrapassar estas limitações, recentemente têm sido desenvolvidas novas metodologias de hibridação in situ com fluorescência quantitativa. No entanto, estas metodologias, embora excelentes na descrição da localização e cinética de mRNAs únicos dentro da célula, não fornecem uma perspectiva genome-wide do transcriptoma subcelular durante o desenvolvimento. Este projeto visa desenvolver uma nova abordagem de transcriptómica subcelular capaz de fazer uma análise genome-wide, quantitativa e imparcial da localização de mRNA. O nosso objetivo é usar esta metodologia para estudar a dinâmica subcelular do oócito de Drosophila em desenvolvimento. Abordagem Experimental: Utilizámos um conjunto de equipamento experimental desenvolvido pelo laboratório de Ivo Telley que permite uma colheita precisa de citoplasma de regiões distintas (anterior e posterior) de oócitos de Drosophila nos estádios 10 e 12. O oócito de D. melanogaster é um sistema ideal para este estudo, uma vez que é passível de micromanipulação, live-cell imaging e da adoção de diversas abordagens genéticas. A montagem experimental de micromanipulação é constituída por dois (ou mais) suportes de micropipetas que são controlados por controladores de precisão de coordenadas x, y, z e uma bomba de seringas de dois sentidos que é conectada a um dos suportes de micropipetas por um tubo de teflon. As micropipetas são produzidas no nosso laboratório, a partir de capilares de borossilicato estirado de modo a obter pontas com comprimento e largura ideais, evitando o dano das extremidades frequentemente observado em micropipetas pré-fabricadas. Resultados: A nossa abordagem de transcriptómica subcelular suporta estudos prévios mostrando que, apesar de bcd apresentar assimetrias significativas na localização subcelular de mRNAs, a abundancia dos mRNAs osk e nos não apresentam diferenças significativas entre as regiões anterior e posterior do oócito. Adicionalmente, esta análise transcriptómica detetou vários genes maternais localizados e mostrou que a região dorso-anterior do oócito possui um conjunto único de mRNAs localizados. Identificámos centenas de mRNAs localizados assimetricamente ao longo do eixo antero-posterior que, aparentemente, não apresentam enriquecimento cortical no oócito, o que explica o facto destes serem tipicamente classificados como mRNAs maternais não localizados por estudos prévios baseados em hibridação in situ não-quantitativa. Em conjunto, e pese embora a necessidade de mais estudos nesta temática, estes resultados sugerem fortemente que a nossa abordagem de transcriptómica subcelular é viável e pode fornecer dados confiáveis e reprodutíveis para estudar a localização de mRNA e a sua dinâmica. Conclusão: Este trabalho validou o uso de uma abordagem de transcriptómica subcelular para estudar a localização de RNAs e distinguiu uma nova classe potencial de mRNAs localizados, não identificada por trabalhos prévios de hibridação in situ não-quantitativa, e cuja localização provavelmente será importante para a gametogénese feminina de Drosophila.

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O nosso estudo centrou-se, sobretudo, na documentação existente nos arquivos daRegião Autónoma da Madeira, dos quais destaco o Arquivo Regional da Madeira e oArquivo da Diocese do Funchal, bem como nos arquivos nacionais da Torre do Tombo,Histórico Ultramarino e Biblioteca Nacional. Procuramos, a partir dos dados recolhidos,fundamentar a nossa investigação; aqueles documentos que nos pareceram de maior interesseforam transcritos e aparecem anexados no final do trabalho. Além disso, não ignoramos avasta bibliografia sobre a matéria.O século XVIII transformou o conceito de Estado. Foi, de facto, a partir desta data quese começou a formar a estrutura estadual que moldou e definiu o Estado que hoje todosconhecemos.A renovação das estruturas políticas e económicas, urgentes no país, levaram àascensão política de um homem, responsável pela condução de diversos cargos: o Marquêsde Pombal.Este foi, na realidade, um período importante e decisivo para a nossa história porque,além das obras que ainda perduram, enraizou conceitos, valores e perspectivas pelos quais ohomem actual se orienta.O tema escolhido suscitou o nosso interesse por haver um certo vazio de conhecimentodo alcance das suas medidas, durante esse lapso de tempo, na Região Autónoma da Madeira.Para finalizar, porque o conhecimento do passado é imprescindível para acompreensão do presente, pretendemos com o nosso trabalho mostrar um pouco da luz' doperíodo de Setecentos que, não obstante os séculos entretanto passados, continua ainda hojea revelar-se de profícuo interesse por nos consciencializar da pessoa/cidadão que somos.

Although mainstream object-oriented languages, like Java, are currently able to detect and prevent many programming errors by static type-checking, common usage-related errors are not captured and signaled to programmers. In general, no (formal) support is available in these languages for ensuring that an object is used according to the protocol which the programmer had in mind when describing the behavior of a class. The file reader protocol is a simple but clarifying example: first a file must be opened, then it can be read multiple times (though not beyond the end-of-file), and finally it must be closed. As client code is not checked for protocol conformance, trying to read the file without first opening it, or when it is closed, are simple disregards caught only by runtime exceptions, assuming the language is equipped with built-in support to handle errors and exceptional events. The MOOL programming language presented in this work is an attempt to formalize object usage and access. It consists in a simple class-based object-oriented language that includes standard primitives found in most object-oriented language formalisms. Additionally, the language offers constructs that can be attached at class definitions for specifying (1) the available methods based on an object state, and (2) how methods may be called in that state – by a single client, in which case we say that the object has a linear status, or without restrictions, in which case we say it has a shared one. We refer to this abstract view that defines an object state and status the class usage type. We formalize the language syntax, the operational semantics, and a type system that enforces by static typing that methods are called only when available, and by a single client if so specified in the class usage type. We illustrate the language capabilities by encoding in MOOL the protocols of two well-known examples: the file reader and the auction system. We have built a prototype compiler to implement our ideas, and its architecture is also described. Finally, we anticipate some of the related topics which we are interested in pursuing in future work.

Este trabalho tem como objetivo investigar a representação feminina nos meios de comunicação de massa, entender a verossimilhança desta representação e se a imagem representada corrobora para a construção de estereótipos difundidos principalmente nas produções cinematográficas. Além disso, pretende apresentar um parâmetro sobre as tribos urbanas para compreender especificamente uma delas: os nerds. A pesquisa tenta identificar quem são os nerds, sua relação com o feminino e o impacto da saga Star Wars nesse universo. Para este estudo, utilizaremos como metodologias tanto uma revisão bibliográfica referente aos temas tratados quanto uma análise de conteúdo sobre as protagonistas femininas da franquia de filmes Star Wars. O título desse trabalho faz referência a uma fala da personagem Rey no episódio VII da saga.

O presente estudo visa compreender o contributo do ensino de Matemática no desenvolvimento de competências de cidadania, segundo as perspectivas e as práticas de uma professora do 3º ciclo. Para tal foram formuladas três questões orientadoras: (i) Quais as suas concepções acerca da Educação para a Cidadania no ensino básico? (ii) Quais as dimensões da disciplina de Matemática que considera importantes na Educação para a Cidadania dos alunos no ensino básico? (iii) Que práticas pedagógicas são utilizadas pela professora que poderão contribuir para a Educação para a Cidadania dos jovens? Para responder a estas questões adoptou-se uma abordagem metodológica de natureza qualitativa-interpretativa, seguindo a modalidade de estudo de caso. Os instrumentos de recolha de dados incluíram a observação de aulas com registos áudio e vídeo, a realização de entrevistas à professora em estudo, reflexões sobre as aulas e a análise de diversos documentos, nomeadamente, relatórios escritos pelos alunos e textos escritos pela professora participante. Este estudo desenrolou-se num contexto de trabalho colaborativo. Com o desenvolvimento do presente projecto de investigação, a professora reconheceu que o conceito de Educação para a Cidadania inicialmente por si assumido rumou a uma assunção muito mais abrangente e mais rica. Tomou também consciência de que o desenvolvimento de competências de Cidadania está patente em várias dimensões da Matemática. Os aspectos da prática da professora que podem facilitar a emergência de um ensino orientado para o desenvolvimento de competências de cidadania relacionam-se com: (i) a interacção e a comunicação, (ii) o questionamento e a compreensão da realidade, (iii) o confronto de diferentes perspectivas face a um problema e a tomada de decisões e (iv) a reflexão. Uma vez que a investigação se centrava num projecto desenvolvido colaborativamente e na prática lectiva, o objecto do estudo foi igualmente significativo e importante para ambos os elementos da equipa, não só em aspectos pessoais, mas sobretudo, para o seu desenvolvimento profissional, na medida em que proporcionou: alteração de perspectivas, a possibilidade de reflexão crítica sobre a prática e aprofundamento do conhecimento didáctico.

A espermatogénese é um processo altamente especializado que engloba todas as etapas desde o início da diferenciação da célula germinal inicial até à individualização do espermatozoide. Devido à sua importância, este processo é altamente conservado entre espécies de organismos com reprodução sexuada. De um modo geral, a espermatogénese começa quando uma célula estaminal da linhagem germinativa inicia a sua diferenciação. Esta dá origem à espermatogónia que passa por uma fase de amplificação, que corresponde a várias rondas de divisão mitótica com citocinese incompleta, no fim das quais surgem os espermatócitos. Estes passam pelas duas divisões da meiose (ambas com citocinese incompleta, também) resultando nos espermatídios (células haplóides) que passam por uma fase de alongamento, seguida de individualização. Os espermatozoides resultantes deste processo são posteriormente encaminhados para fora do testículo, onde são armazenados até à cópula. Dada a natureza delicada deste processo, perturbações que alterem o seu normal decorrer podem ter repercussões significativas na fertilidade. Durante o processo de diferenciação, as células passam por diferentes modificações conformacionais até chegarem ao espermatozoide maduro. A par destas alterações, a cromatina no interior dos seus núcleos vai também passando por uma série de alterações ao longo das diferentes etapas. Existem diversas proteínas envolvidas ao nível nuclear nestas transformações e entre elas encontram-se as condensinas. As condensinas são complexos proteicos conservados, que são amplamente conhecidos pelo seu papel na condensação e segregação de cromossomas. Existem dois destes complexos identificados como Condensina I e Condensina II. Cada complexo é constituído por cinco subunidades das quais duas são partilhadas. Estas são ATPases e pertencem à família de moléculas responsáveis pela manutenção da estrutura dos cromossomas, sendo normalmente designadas por SMC2 e SMC4. As restantes três subunidades são específicas de cada um dos complexos: Cap-H, Cap-D2 e Cap-G constituem a condensina I; Cap-H2, Cap-D3 e Cap-G2 a condensina II. Ambos os complexos possuem funções diferentes, mas complementares. A condensina I atua ao nível da compactação lateral e a condensina II é responsável pela compactação axial. Estudos anteriores demonstram a relevância dos seus papeis nas divisões celulares, principalmente na mitose, a onde a condensina I é fundamental para o correto desenvolver do processo. No entanto, em Drosophila, foi demonstrado que é a condensina II o complexo essencial para a fidelidade meiótica e para a fertilidade masculina. Nas células da linha germinal, a condensina II localiza-se no interior do núcleo, onde na interfase é responsável pelas alterações na organização da cromatina. Na ausência deste complexo funcional a prófase I dos espermatócitos é afetada sendo que deixa de ocorrer a formação dos três territórios cromossómicos. Apesar desta alteração, ao nível da organização da cromatina, as células conseguem prosseguir com a meiose e realizar a posterior citodiferenciação. No entanto, estudos realizados anteriormente reportaram que apesar da conclusão da meiose nestes machos há um aumento significativo dos erros na segregação de cromossomas como, por exemplo, pontes entre cromossomas, não disjunção e atrasos na movimentação (“lagging”), aquando da migração até aos pólos opostos da célula, na anáfase I. Estes defeitos levam ao aumento significativo de alterações na carga cromossómica de cada célula-filha que, por sua vez, culminam no aumento de casos de aneuploidia nos espermatozoides destes machos. Adicionalmente, machos que possuem este complexo com a sua funcionalidade afetada são também reportados como sendo completamente estéreis. Curiosamente, dados de trabalhos anteriores sugerem a possibilidade de existirem funções não canónicas para este complexo proteico na espermatogénese, dado que a correção destes erros de segregação nos mutantes para a condensina II é insuficiente para recuperar a fertilidade masculina perdida. Baseando-nos nestas observações, propomos a hipótese de que a condensina II é também necessária para a regulação da expressão génica durante o desenvolvimento da célula germinal masculina. Com o intuito de testarmos a nossa hipótese, usamos duas linhas de mutantes de drosófila, uma para cada uma das subunidades específicas da condensina II (Cap-H2 e Cap-D3). Inicialmente, procedemos com um conjunto de análises com o propósito de confirmar que estas linhas de mutantes recapitulavam os fenótipos previamente descritos. Usando a análise citológica, confirmamos que os espermatócitos dos mutantes para as duas subunidades não-SMC do complexo de condensina II não formam os territórios cromossómicos observados na meiose, apesar de serem capazes de completar a meiose e iniciar a citodiferenciação pós-meiótica. Adicionalmente, observamos que a citodiferenciação é prematuramente interrompida nestes mutantes na última etapa da espermatogénese – a individualização. A individualização, como o nome indica consiste na separação dos espermatídios-irmãos através da quebra das pontes citoplasmáticas existentes entre eles e na formação de uma membrana individualizada. São os complexos de individualização que levam a cabo esta função. Estes consistem em cones de actina que se formam em torno do DNA destas células (o que será a futura “cabeça” do espermatozoide), e se movem sincronizadamente através do seu axonema individualizando-as à medida que avançam. A interrupção desta etapa, acaba por contribuir para a esterilidade masculina dado que há uma redução significativa no número de espermatozoides produzidos por estes machos. Para testarmos diretamente a condensina II para um potencial papel na expressão génica, realizamos uma análise da mesma recorrendo à técnica de RNAseq em testículos dos mutantes Cap-D3. Esta análise, por sua vez, revelou que a ausência de CAP-D3 afeta consideravelmente a expressão de 563 genes (239 sobre- e 324 sub-expressos). Foram selecionados para testes funcionais 36 genes, que tiveram a sua expressão mais significativamente reduzida. Usamos linhas RNAi cruzadas com um driver meiótico específico das células germinais (driver: bam-GAL4) e procedemos à realização de quatro rondas independentes de testes de fertilidade. Esta análise revelou que a remoção de um destes genes (Ogre) cuja expressão foi significativamente reduzida, recapitula a infertilidade e o fenótipo testicular observado nos mutantes para a condensina II. Ogre (de seu nome gânglio ótico reduzido) é um gene pertencente à família das inexinas, proteínas que estão envolvidas na formação de junções comunicantes. Na literatura existem referências a fenótipos resultantes da ausência deste gene, mas nenhum associado à fertilidade. Posteriormente, averiguamos se os machos, em que este gene se encontrava silenciado, apresentavam uma redução significa no número de espermatozoides como tinha sido anteriormente observado nas linhas mutantes. Após, percebermos que o mesmo era replicado por estes machos vimos ainda que em ambos os casos, o silenciar da expressão resulta em defeitos significativos na capacidade da célula construir e manter os complexos pós-meióticos de individualização de espermatozoides. Quando olhamos para os nossos dados como um todo, vemos que na ausência de condensina II tanto a organização da cromatina como a expressão génica são afetadas. Esta alteração leva à diminuição da capacidade de as células conseguirem formar complexos de individualização que, por sua vez, culmina na diminuição da produção de espermatozoides. O gene Ogre parece ter um papel importante neste processo, já que junções comunicantes são essenciais para assegurar uma comunicação celular adequada na espermatogénese. Os nossos dados mostram assim que, em Drosophila, a condensina II é também essencial para a regulação da expressão génica durante a espermatogénese. Mais especificamente, a transcrição mediada pela Condensina II é necessária para a correta diferenciação das células germinais pós-meióticas em espermatozoides, demonstrando assim, uma nova função para este complexo proteico na fertilidade masculina. Em suma, propomos que a diminuição da produção de espermatozoides em conjunto com a aneuploidia anteriormente documentada contribuem ativamente para a esterilidade observada nestes mutantes.

Este estudo questiona as razões pelas quais devemos considerar o interesse de terceiros na ação própria. Trata-se de uma defesa do altruísmo, enquanto condição racional do agir. A reflexão desenvolve-se no quadro do sistema filosófico de Thomas Nagel, tendo como foco original de análise The Possibility of Altruism. A presente tese procura demonstrar que as distinções levadas a cabo nesta obra de Nagel são chave de leitura para compreender a sua filosofia posterior, não devendo por isso ser menosprezadas. A orientação da nossa leitura visa o dinamismo da racionalidade prática como exercício existencial que clarifica e articula tensões a operar no agente. O sistema de razões resultante, sem desembocar num ponto de vista unificado, reconhece a dupla condição do agente como capaz de um ponto de vista subjetivo, existencialmente localizado, e de um ponto de vista objetivo, neutro quanto à posição que o agente ocupa no mundo.

Este estudo analisa o modo como os alunos percepcionam aulas de Química planeadas segundo as Orientações Curriculares e orientadas para a investigação. Especificamente, procura dar resposta aos seguintes aspectos: (i) potencialidades atribuídas às actividades de investigação, (ii) mudança de perspectiva relativamente ao ensino da Química, após o envolvimento em actividades de investigação, (iii) mudança de motivação e auto eficácia em aulas de Química. O enquadramento teórico centrou-se sobre finalidades e perspectivas de ensino, trabalho laboratorial, aprendizagem de ciência, motivação e auto eficácia. A metodologia tem um carácter qualitativo e descritivo. Envolveu duas turmas do 8º ano da escolaridade, numa escola da margem sul do Tejo e uma proposta didáctica, centrada em actividades de investigação, para leccionar Reacções Químicas. Utilizou-se como técnica de recolha de dados (i) a gravação áudio das conversas entre os alunos quando, em grupo, realizavam as actividades de investigação, (ii) os documentos escritos produzidos pelos alunos após a realização das actividades de investigação, (iii) três inventários por questionário, e (iv) a observação naturalista. Numa primeira fase procedeu-se à transcrição das aulas gravadas. Depois realizou-se análise de conteúdo sobre os documentos escritos por eles produzidos e sobre as transcrições da áudio gravação. Numa terceira fase realizou-se a análise estatística dos inventários por questionário. Os resultados obtidos indicam que as actividades de investigação usadas como estratégia de ensino nas aulas de Química, apresentam potencialidades importantes ao nível (i) da mobilização de competências; (ii) do envolvimento dos alunos; (iii) mudança da motivação intrínseca e extrínseca e da auto eficácia e (iv) aquisição de conhecimentos. Os resultados deste estudo apelam a um repensar da problemática da formação de professores, quer na formação inicial, quer na formação contínua de modo a proporcionar situações de aprendizagem mais em sintonia com um ensino para o desenvolvimento de competências e para o uso de actividades de investigação. Este estudo revestiu-se de grande importância para a professora na medida que contribuiu para o seu desenvolvimento profissional e para o reconhecimento da necessidade de uma reflexão sistemática sob a sua própria prática e da inclusão da componente investigativa na prática

Tuberculosis (TB) treatment relies primarily on 70-year-old drugs, and prophylaxis suffers from the lack of an effective vaccine. Among the 10 million people exhibiting disease symptoms yearly, 450,000 have multidrug or extensively drug-resistant (MDR or XDR) TB. A greater understanding of host and pathogen interactions will lead to new therapeutic interventions for TB eradication. One of the strategies will be to target the host for better immune bactericidal responses against the TB causative agent Mycobacterium tuberculosis (Mtb). Cathepsins are promising targets due to their manipulation of Mtb with consequences such as decreased proteolytic activity and improved pathogen survival in macrophages. We recently demonstrated that we could overcome this enzymatic blockade by manipulating protease inhibitors such as cystatins. Here, we investigate the role of cystatin F, an inhibitor that we showed previously to be strongly upregulated during Mtb infection. Our results indicate that the silencing of cystatin F using siRNA increase the proteolytic activity of cathepsins S, L, and B, significantly impacting pathogen intracellular killing in macrophages. Taken together, these indicate the targeting of cystatin F as a potential adjuvant therapy for TB, including MDR and XDR-TB.

Background Helicobacter pylori strains show a high level of genotypic diversity and express several genes that contribute to their pathogenicity and resistance. In Mozambique, there is lack of information regarding its resistance pattern to antibiotics. In this study, we aimed to investigate the prevalence of H. pylori and its genotypic resistance to clarithromycin, metronidazole, and fluoroquinolones in Mozambican dyspeptic patients. Since appropriate eradication should be based on the local resistance rate, our data will guide clinicians in choosing the best drugs for the effective treatment of H. pylori-infected patients. Methods This is a cross-sectional descriptive study conducted between June 2017 and June 2020, in which 171 dyspeptic patients were recruited, and through upper gastrointestinal endoscopy, gastric biopsies were collected from those patients. Polymerase chain reaction was performed for the detection of H. pylori and its resistance mechanisms to clarithromycin (23S rRNA), metronidazole (rdxA), and fluoroquinolones (gyrA); mutations conferring resistance to these antibiotics were investigated by sequencing 23S rRNA, rdxA, and gyrA genes. Results Of the 171 samples tested, H. pylori was detected in 56.1% (96/171). The clarithromycin resistance rate was 10.4% (the responsible mutations were A2142G and A2143G), the metronidazole resistance rate was 55.2% (4 types of mutations responsible for metronidazole resistance were identified which include, D59N, R90K, H97T, and A118T. However, in many cases, they appeared in combination, with D59N + R90K + A118T being the most frequent combination), and the fluoroquinolones resistance rate was 20% (the responsible mutations were N87I and D91G). Conclusion H. pylori infection remains common in dyspeptic Mozambican patients. High resistance to metronidazole and fluoroquinolones requires continuous monitoring of antibiotic resistance and adaptation of therapy to eradicate this infection.

Mycobacterium tuberculosis (Mtb), the causative agent of human tuberculosis (TB), is one of the most successfully adapted human pathogens. Human-to-human transmission occurs at high rates through aerosols containing bacteria, but the pathogen evolved prior to the establishment of crowded populations. Mtb has developed a particular strategy to ensure persistence in the host until an opportunity for transmission arises. It has refined its lifestyle to obviate the need for virulence factors such as capsules, flagella, pili, or toxins to circumvent mucosal barriers. Instead, the pathogen uses host macrophages, where it establishes intracellular niches for its migration into the lung parenchyma and other tissues and for the induction of long-lived latency in granulomas. Finally, at the end of the infection cycle, Mtb induces necrotic cell death in macrophages to escape to the extracellular milieu and instructs a strong inflammatory response that is required for the progression from latency to disease and transmission. Common to all these events is ESAT-6, one of the major virulence factors secreted by the pathogen. This narrative review highlights the recent advances in understanding the role of ESAT-6 in hijacking macrophage function to establish successful infection and transmission and its use as a target for the development of diagnostic tools and vaccines.

Numa segunda-feira, dia 5 do mês de Rayab do ano de 92 da Hégira (2 de maio de 711), Tariq ibn Zyad, wali (governador) do Magrebe, dava início a uma operação militar anfíbia, que, a partir de Ceuta, levou até à baía de Algeciras, mais precisamente até ao promontório renomeado Jabal al-Tariq, cerca de 12 000 homens. Esta operação terá terminado mais de um mês depois, a 16 de Chaban (12 de junho de 711), data da chegada dos últimos combatentes, e do próprio wali, consolidado já o domínio da zona de Algeciras. Este lapso temporal terá permitido o estado de alerta e alguma resposta, ainda que tímida, das tropas visigodas estacionadas na região. Em meados de junho de 711 um significativo contingente de guerreiros berberes, enquadrados por um número reduzido de árabes, devassava já as proximidades do seu acampamento de partida, em ações exploratórias para aquilo que estava por fazer: a (quase total) conquista da Hispânia Goda. Este é o ponto de partida de Ahmed Tahiri, um dos inúmeros investigadores que se ocuparam deste processo, que transformou para sempre a face da Península Ibérica: a conquista do Algarve, em meados do século XIII, e do reino de Granada, no final do século XV, em contextos político-militares, põem fim a muitos séculos de presença muçulmana, primeiro para o reino de Portugal, depois para Aragão e Castela; toda a história da Idade Média peninsular está embebida de aspetos islâmicos, que deixaram a sua impressão na língua, na arquitetura, na organização social, na agricultura.

Therapeutic liquid mixtures, as deep eutectic systems, are considered a sustainable strategy that can be useful for the modification and enhancement of the pharmacokinetics and pharmacodynamics of different active ingredients. In this study, we assessed the stability and antibacterial activity of therapeutic liquid formulations prepared with anti-tuberculosis drugs. Tuberculosis therapy presents various pitfalls related, for example, to the administration of prolonged regimens of multiple drugs, different severe adverse effects, low compliance of the patient to treatment and the development of drug resistance. During this study, it was possible to assess the physicochemical stability of the formulations for 6 months, by polarized optical microscopy, 1H NMR and FTIR-ATR. Furthermore, the mixtures present an antibacterial effect against a drug-susceptible Mycobacterium tuberculosis strain (H37Rv). This was particularly evident for the mixtures with ethambutol incorporated, making them interesting to pursue with further studies and evaluation of clinical applicability. Upon infection, it was also observed that a single and higher dose appears to be more effective than lower separate doses, which could allow the production of patient-friendly formulations.

A sardinha, Sardina pilchardus (Walbaum, 1792), é uma espécie do grupo de pequenos pelágicos com ampla distribuição geográfica no Atlântico Nordeste e no Mediterrâneo. Em Portugal, é um dos recursos pesqueiros mais importantes representando 40% do peso total do pescado desembarcado anualmente no continente. É capturada sobretudo na pescaria do cerco, e, para efeitos de gestão pesqueira, a sardinha distribuída nas águas atlânticas de Portugal e Espanha é considerada um stock único, designado stock Atlântico-Ibérico, cujo estado de exploração é avaliado anualmente pelo Conselho Internacional para a Exploração do Mar, CIEM/ ICES (e.g. ICES). Apesar do grande avanço realizado nas últimas décadas sobre o conhecimento de diversos aspectos biológicos e de dinâmica populacional do stock Atlântico-Ibérico de S. pilchardus, os processos de recrutamento continuam a ser pouco conhecidos. Um melhor conhecimento sobre os factores que afectam a sobrevivência da sardinha nas fases de pré-recrutamento é uma etapa essencial para entender a dinâmica populacional deste recurso e gerir a pescaria do cerco. O presente trabalho apresenta os resultados da análise do crescimento diário de juvenis de S.pilchardus da Costa Ocidental Norte Portuguesa, obtida pela contagem de anéis diários. O primeiro objectivo do estudo foi relacionar a idade dos juvenis, capturados entre Maio de 2004 e Janeiro de 2005, com características morfométricas dos indivíduos (peso e comprimento total) e dos otólitos (peso e diâmetro) e estimar a sua data de eclosão a partir da melhor relação obtida. Os resultados indicaram que 80% dos exemplares eclodiram entre Janeiro-Março, com idades compreendidas entre os 103 e os 275 dias. Verificou-se que o diâmetro e o peso dos otólitos têm uma melhor relação com a idade, explicando 81% e 87% da variabilidade total respectivamente. A relação linear entre o logaritmo da idade e o diâmetro dos otólitos (r2= 0,86) pode ser usada para predizer a idade dos juvenis com um erro de 5%. Estimou-se uma taxa de crescimento 0,06 cm dia-1. O segundo objectivo deste estudo foi verificar se os juvenis de sardinha, capturados em Outubro de 2008 e Abril de 2009 pertencem à mesma época de desova, e relacionar as datas de eclosão com os factores ambientais, nomeadamente a temperatura superficial do mar e a concentração de clorofila, a actividade reprodutiva, e a condição das fêmeas desovantes. Desta forma, procura-se o estabelecimento de uma “janela” ambiental em que a probabilidade de sobrevivência dos juvenis é maior. A distribuição das datas de eclosão mostrou que as sardinhas da primeira campanha eclodiram entre Outubro de 2007 e Maio de 2008, com dois picos em Janeiro e Março do mesmo ano, correspondentes às duas modas das distribuições de comprimentos. Esta distribuição não foi coincidente com os valores de actividade reprodutiva. A distribuição das datas de eclosão de Abril de 2009 apresenta um pico nos meses de Junho- Julho, correspondendo a uma moda na distribuição de comprimentos. Este pico encontra-se fora da principal época de desova, mas coincide com uma elevada condição das fêmeas, um período de temperaturas elevadas e a uma maior concentração de clorofila. As taxas de crescimento para esta campanha foram três vezes superiores, indicando que o aumento da temperatura superficial do mar durante os meses de Verão favorece o crescimento das fases larval e juvenil. Apesar das dificuldades inerentes à leitura de incrementos diários e à validação dos mesmos com as idades em juvenis, a coerência existente entre as relações comprimento dos indivíduos com a Idade, as datas de eclosão e taxas de crescimento encontradas no presente trabalho, com os dados de outros autores, conferem algum suporte aos resultados.

Background Qualitative research investigating pharmacists’ participation in Long-Term Care (LTC) within interdisciplinary teams is scarce. Aim To characterize how pharmacists’ participation in a national network of LTC is perceived by healthcare professionals and other key stakeholders. Method Individual, in-depth, semi-structured interviews of participants (nurses, physicians, pharmacists, and LTC researchers) enrolled purposively or through snowballing sampling techniques, with the final sample being comprised of fourteen participants. Data analysis followed a deductive coding approach framed by Role Theory and supplemented with an inductive coding for additional themes. Results Four Role Theory constructs were identified from the primary data—role identity, overqualification, ambiguity, underqualification. Clinical pharmacy services, logistics and educational activities were pointed out as representing the identity of pharmacists’ interventions. Despite the clear identification of LTC pharmacists’ interventions, pharmacist expertise on medicine optimization seemed to be underused (role overqualification), as a result of lack of time, lower proactivity in healthcare teams’ integration, and the absence of a legal framework targeted to LTC pharmacy practice (role ambiguity). Additional clinical training, including in the management of older people’s health conditions, nutrition, and palliative care were missing (role underqualification). Conclusion LTC pharmacists can provide essential services (e.g., clinical pharmacy, logistics, educational interventions), although additional training and a clearer legal framework are missing to better define pharmacists’ roles in LTC pharmacy practice.