RCAAP Repository

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2012.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Sociais, Departamento de Sociologia, Programa de Pós-Graduação em Sociologia, 2012.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2012.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade Economia, Administração, Contabilidade e Ciência da Informação e Documentação, Departamento de Economia, 2012.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Letras, Departamento de Teoria Literária e Literaturas, Programa de Pós-Graduação em Literatura, 2012.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Relações Internacionais, 2012.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Educação Física, Programa de Pós-Graduação Stricto-Sensu em Educação Física, 2012.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Tecnologia, Departamento de Engenharia Elétrica, 2012.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2007.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Centro de Desenvolvimento Sustentável, 2012.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Educação Física, Programa de Pós-Graduação Stricto Sensu em Educação Física, 2012.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Geociências, 2012.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Psicologia, Departamento de Psicologia Clínica, Programa de Pós-Graduação em Psicologia Clínica e Cultura, 2012.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Geociências, Programa de Pós-Graduação em Geociências Aplicadas, 2012.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, Programa de Pós-Graduação em Fitopatologia, 2012.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade UnB Planaltina, Instituto de Química, Programa de Pós-Graduação em Ensino de Ciências, 2012.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2008.

Background Paracoccidioides brasiliensis is a thermodimorphic fungus, the causative agent of paracoccidioidomycosis (PCM). Serine proteases are widely distributed and this class of peptidase has been related to pathogenesis and nitrogen starvation in pathogenic fungi. Results A cDNA (Pbsp) encoding a secreted serine protease (PbSP), was isolated from a cDNA library constructed with RNAs of fungal yeast cells recovered from liver of infected mice. Recombinant PbSP was produced in Escherichia coli, and used to develop polyclonal antibodies that were able to detect a 66 kDa protein in the P. brasiliensis proteome. In vitro deglycosylation assays with endoglycosidase H demonstrated that PbSP is a N-glycosylated molecule. The Pbsp transcript and the protein were induced during nitrogen starvation. The Pbsp transcript was also induced in yeast cells infecting murine macrophages. Interactions of PbSP with P. brasiliensis proteins were evaluated by two-hybrid assay in the yeast Saccharomyces cerevisiae. PbSP interacts with a peptidyl prolyl cis-trans isomerase, calnexin, HSP70 and a cell wall protein PWP2. Conclusions A secreted subtilisin induced during nitrogen starvation was characterized indicating the possible role of this protein in the nitrogen acquisition. PbSP interactions with other P. brasiliensis proteins were reported. Proteins interacting with PbSP are related to folding process, protein trafficking and cytoskeleton reorganization.

Background Pathogens depend on peptidase activities to accomplish many physiological processes, including interaction with their hosts, highlighting parasitic peptidases as potential drug targets. In this study, a major leucyl aminopeptidolytic activity was identified in Trypanosoma cruzi, the aetiological agent of Chagas disease. Results The enzyme was isolated from epimastigote forms of the parasite by a two-step chromatographic procedure and associated with a single 330-kDa homohexameric protein as determined by sedimentation velocity and light scattering experiments. Peptide mass fingerprinting identified the enzyme as the predicted T. cruzi aminopeptidase EAN97960. Molecular and enzymatic analysis indicated that this leucyl aminopeptidase of T. cruzi (LAPTc) belongs to the peptidase family M17 or leucyl aminopeptidase family. LAPTc has a strong dependence on neutral pH, is mesophilic and retains its oligomeric form up to 80°C. Conversely, its recombinant form is thermophilic and requires alkaline pH. Conclusions LAPTc is a 330-kDa homohexameric metalloaminopeptidase expressed by all T. cruzi forms and mediates the major parasite leucyl aminopeptidolytic activity. Since biosynthetic pathways for essential amino acids, including leucine, are lacking in T. cruzi, LAPTc could have a function in nutritional supply.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, 2007.