Repositório RCAAP

A multiplicação viral eficiente resulta de uma complexa rede de interações vírus - célula hospedeira, que gera um ambiente intracelular propício a geração e disseminação da progênie viral. Interferir em vias de sinalização relacionadas à dinâmica do citoesqueleto é uma estratégia comum empregada pelos vírus para atingir esse propósito. O Orthopoxvirus Vaccinia (VACV), membro protótipo da família Poxviridae, interage de forma complexa com o citoesqueleto de actina e de microtúbulos de suas células hospedeiras durante seu ciclo de multiplicação viral, sendo esta manipulação essencial para garantir a eficiência da penetração, montagem, transporte e disseminação viral. Neste trabalho tivemos como objetivo investigar o papel desempenhado pela serina/treonina cinase PAK1 (p21-activated kinase 1) na infecção pelo VACV. Para isso, fibroblastos embrionários murinos (MEFs) derivados de camundongos selvagens (WT) ou nocautes (PAK1-/-) para PAK1, foram infectados com VACV por diferentes períodos de tempo. Verificou-se, através de ensaios de transferência de Western e microscopia de fluorescência, que PAK1 não está criticamente envolvida em etapas precoces do ciclo de multiplicação do VACV, sendo que a necessidade de PAK1 para a penetração do VACV por macropinocitose, previamente descrita (Science, 320:531, 2008), não interfere com a produção viral. Apesar disso, observamos que a ausência de PAK1 provoca uma grande redução no tamanho da placa viral, e que infecções a baixa MOI resultam em uma produção significativamente menor (~ 90%), tanto de IMVs, quanto de EEVs, indicando que a disseminação viral está sendo de alguma forma prejudicada. Marcação fluorescente do citoesqueleto de actina e microscopia eletrônica de varredura mostraram uma redução no número de caudas de actina induzidas pelo VACV em MEFs PAK1-/- sem haver, no entanto, alteração da quantidade de CEVs expostos na superfície celular. Além disso, experimentos de microscopia confocal revelaram que a ausência de PAK1 não impede o recrutamento do complexo ARP2/3 para os sítios de polimerização de actina subjacentes aos CEVs, e que em células WT, a forma ativa de PAK1 (P-PAK1 Thr 423) colocaliza com CEVs e caudas de actina. Assim, os resultados obtidos permitem concluir que PAK1 desempenha um papel na disseminação viral, sendo um constituinte celular importante para garantir a eficiência desse processo.

A pneumonia pneumocócica é uma importante causa de mortalidade no mundo. A resposta inflamatória contra as bactérias é necessária para controlar a infecção, mas a permanência e ativação excessiva dos neutrófilos nos pulmões podem resultar em dano tecidual significativo. Os inibidores de fosfodiesterase 4 (PDE4), tais como o rolipram, reduzem a inflamação de forma eficiente. O presente estudo analisou o impacto do tratamento com rolipram em um modelo murino de pneumonia pneumocócica. Camundongos Balb/C foram infectados por via intranasal com 103-106 CFU de Streptococcus pneumoniae e a cinética da inflamação desencadeada foi avaliada. Camundongos infectados com 104-105 CFU foram então tratados com o rolipram em um esquema profilático ou terapêutico, em combinação ou não com o antibiótico ceftriaxona. Foram realizadas contagens das células inflamatórias e bactérias recuperadas e ensaios ex vivo de fagocitose. O tratamento com rolipram durante a infecção por S. pneumoniae levou à diminuição do recrutamento de neutrófilos nos pulmões e vias respiratórias e reduziu a lesão pulmonar. A administração profilática de ROL também diminuiu os níveis das citocinas nas vias aéreas. Apesar da modulação da inflamação por ROL melhorar a pneumonia, a carga bacteriana nos pulmões não foi reduzida. Por outro lado, a antibióticoterapia reduziu o número de bactérias sem diminuir a infiltração de neutrófilos, os níveis das citocinas e a lesão pulmonar. O tratamento combinado de rolipram e ceftriaxona foi mais eficiente na redução da inflamação, aumentando a expressão da proteína pró-resolutiva anexina A1, e reduzindo o número de bactérias através do aumento da fagocitose. Ainda, camundongos deficientes em anexina A1 são mais susceptíveis à infecção pneumocócica. Estes dados mostram que os efeitos imunomoduladores dos inibidores de PDE4 são úteis durante pneumonia pneumocócica grave e sugerem o seu potencial como terapia adjuvante nesta infecção.

O sucesso das infecções por Acinetobacter baumannii pode ser atribuído a diversos fatores de virulência, como sua habilidade em formar biofilmes, aderir, colonizar e invadir células epiteliais humanas; seu repertório de mecanismos de resistência a antimicrobianos e sua habilidade em adquirir material genético de outros micro-organismos, promovendo sua sobrevivência, sob pressão seletiva de antimicrobianos. Buscou-se avaliar, por parâmetros fenotípicos e genotípicos, a presença de fatores de virulência em amostras de Acinetobacter baumannii recuperadas de pacientes atendidos no Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) e investigar a associação desses fatores com alguns desfechos clínicos. Foram avaliadas 62 amostras clínicas de A.baumannii provenientes de 37 pacientes. As amostras foram submetidas a testes de susceptibilidade aos antimicrobianos e verificação da expressão de metalobetalactamases pelo método ETest®. A reação em cadeia da polimerase foi realizada para detecção dos seguintes genes: blaOXA23, blaOXA24, blaOXA51, blaOXA58, blaOXA143, blaVIM-1, csuE, ompA e do elemento de inserção ISAba1. Foram realizados ensaios fenotípicos de formação de biofilme em microplacas de poliestireno e de indução de apoptose em células A549. A diversidade genética entre as amostras foi avaliada por ERIC-PCR. Por fim, realizou-se a caracterização clínico-epidemiológica dos pacientes e a associação entre a presença de genes de virulência e alguns desfechos clínicos. Identificaram-se altos índices de resistência aos antimicrobianos entre as amostras de A. baumannii avaliadas, exceto à polimixina B. Os genes blaOXA23 e blaOXA51 foram encontrados simultaneamente na quase totalidade das amostras de A. baumannii estudadas; já os genes blaOXA24, blaOXA58 e blaOXA143 não foram identificados em nenhuma amostra. blaVIM-1 foi detectado na maioria das amostras de A.baumannii avaliadas, assim como ISAba1upstream a blaOXA51. Foram encontrados 03 grupos clonais distintos entre as amostras avaliadas. A ausência de csuE e ompA não alteraram a capacidade de formação de biofilme em microplacas de poliestireno pelas amostras analisadas. A indução de apoptose em células A549 ocorreu independente da presença de ompA, mas amostras positivas para tal gene foram capazes de reduzir a contagem celular, quando comparadas às amostras ompA negativo testadas (p<0.05).Mais de 80% das células A549 inoculadas com A.baumannii apresentaram morte celular por apoptose em 03 horas de incubação. Cerca de 91% e 38,2% dos pacientes que apresentaram os genes csuE e ompA, respectivamente, desenvolveram doença infecciosa por A.baumannii. Quando os dois genes estiveram presentes, esta porcentagem foi de39,4%. Estes resultados reforçam a importância clínico-epidemiológica de A.baumannii no ambiente hospitalar e fornecem dados importantes sobre a epidemiologia molecular e expressão de genes de resistência e virulência por A.baumannii no cenário hospitalar brasileiro.

Os tricomas, estruturas responsáveis pela produção de uma variedade de metabólito secundários, têm sido implicados na resposta antiherbivoria em vegetais. O sulfeto de hidrogênio (H2S) é uma molécula gasosa que emergiu recentemente como importantesinalizador em vários processos do desenvolvimento e nas respostas de plantas a estresses. Este trabalho teve como objetivo investigar o efeito de um doador de H2S (Na2S) e o pH de sua solução na formação de tricomas em plantas de Solanum lycopersicum cv. Micro-Tom(MT) e o híbrido Get. Plantas com o primeiro par de folhas expandidas foram aspergidas com Na2S a 0, 50, 100 ou 200 M (pH 11,0) por um período de 15 dias. Paralelamente, estresse mecânico foi promovido nas folhas que foram aspergidas com H2S a 100 M (pH 6,4). O crescimento das plantas e o número de folhas produzidas não foram afetados pelo H2S exógeno. O número de tricomas na face adaxial de folhas novas tratadas com Na2S (pH 11,0) foi 30% menor que aquele de folhas novas de plantas controle, independentemente do genótipo estudado. Contudo, o uso de Na2S (pH 6,4) promoveu um acréscimo de 80 e 48% no número de tricomas da face adaxial de folhas de MT e de Get, respectivamente. Esse tratamento também estimulou o aumento da proporção de tricomas glandulares em ambos os genótipos. Sabe-se que o dano mecânico pode provocar estresse oxidativo, bem como induzir a formação de tricomas em folhas novas. Contudo esse danonão afetou o número de tricomas e nem o conteúdo de H2O2 em folhas novas após 21 dias de tratamento. O Na2S (pH 6,4) restabeleceu a atividade superóxido dismutase de plantas de MT danificadas aos níveis encontrados nas plantas controle. A aplicação da solução de pH 11,0 pode ter alterado o pH das folhas dos tomateiros e essa alteração pode ter culminado na inibição e/ou atraso da formação de tricomas em folhas novas. Dessa forma, o pH da solução de doador de H2S é crucial para observar os efeitos reais desse gás na planta. O gás sulfídrico sinaliza processos celulares que podem desencadear a indução daformação de tricomas em folhas jovens de tomateiros.

Os receptores ativados por protease (PAR) pertencem à família dos receptores acoplados à proteína G e são alvos de serino proteases, sendo classificados de 1 a 4, em função da ordem de descoberta. Tanto PAR2 quanto PAR4 são expressos em leucócitos, e estão envolvidos no recrutamento e ativação dessas células. Embora seja caracterizado o papel do PAR em modelos de inflamação e ativação celular, pouco se sabe sobre a participação desses receptores na função efetora de macrófagos como, por exemplo, a fagocitose e a secreção de mediadores inflamatórios. Diante disso, o nosso objetivo foi avaliar o papel de PAR2 e PAR4 sobre a fagocitose de partículas de zimosano e liberação de mediadores inflamatórios em macrófagos peritoneais in vitro. Para isso, os macrófagos foram obtidos de camundongos C57BL/6, os quais foram injetados previamente com solução de tioglicolato 6 % por via intraperitoneal. Após três dias, foi feito a coleta do lavado peritoneal e essas células foram pré-incubadas com LPS (10 g/mL) 30 minutos antes da incubação com o agonista de PAR2 (SLIGRL-NH2, 30 M) ou agonista de PAR4 (AYPGKF-NH2 30 M) em presença ou não dos seus respectivos antagonistas seletivos (PAR2: ENMD 1068; PAR4: TcY-NH2); seguida pela adição de zimosano (10 g/mL). A avaliação da fagocitose foi expressa através do Índice de Fagocitose (IF), definido como a razão entre o somatório do total de partículas fagocitadas em 100 células contadas sobre a porcentagem de macrófagos fagocíticos. O sobrenadante da cultura foi utilizado para a dosagem de óxido nítrico (NO), espécies reativas de oxigênio (ROS) e produção de citocinas (TNF- e IL-10). A incubação dos macrófagos com o agonista de PAR2 (30 M) foi capaz de aumentar o IF, fato não encontrado quando houve incubação concomitante com seu antagonista. Em contrapartida a incubação com o agonista de PAR4 reduziu o IF. Essa redução não foi observada, quando administrado junto ao seu antagonista. A co-incubação de agonista de PAR2 (30 M) com o agonista de PAR4 (30 M) não alterou o IF. A ativação in vitro de PAR2 ou PAR4 foi capaz de aumentar a produção de NO após 24 horas de incubação. Porém, após 48 horas de incubação, houve uma redução na produção desse mediador. A ativação do PAR2 (30 M) não alterou os níveis de ROS 24 e 48 após a incubação. Porém, na presença do agonista de PAR4 (30 M) houve um aumento na produção de ROS foi observado nos dois tempos analisados. A incubação dos macrófagos com agonista de PAR2 (30 M) ou agonista de PAR4 (30 M) não alterou a produção de TNF-, porém o agonista de PAR2 (30 M) aumentou a produção de IL-10 no tempo de 24 horas, enquanto o agonista de PAR4 (30 M) reduziu a produção dessa citocina após 4 horas de incubação. Em conclusão, os dados sugerem um papel regulador de PAR2 e PAR4 no fenômeno fagocítico dos macrófagos e na produção de mediadores pró ou anti-inflamatório essenciais para o controle da resposta efetora dessas células.

Pesquisas recentes da Escola de Ciência da Informação da UFMG empreendidas por estudiosos como Paula (2005; 2012), Araújo (2013) e Sá (2015) comprovaram ser possível captar e compreender a subjetividade presente nos processos decisórios por meio da abordagem clínica da informação. Essa abordagem estimula um olhar atento para as informações, captando as dimensões simbólico-afetivas que as perpassam, visando uma análise mais aprofundada dos comos e porquês dos fenômenos investigados. Por meio da sua utilização, a presente pesquisa visou investigar a possível participação constitutiva da subjetividade na tomada de decisão diante dos desafios da gestão de bibliotecas de uma universidade federal. Para tanto, utilizou como método de coleta de dados a entrevista em profundidade e, posteriormente, analisou o conteúdo por meio da investigação dos processos de simbolização das falas dos sujeitos reconstrução do real (das informações coletadas) a partir dos fragmentos (dimensões simbólico-afetivas) pelos quais ele se apresenta. Para auxiliar nessa investigação, foram utilizados dicionários de símbolos e foi realizado um exercício de amplificação dos significados neles encontrados, baseando-se nas falas de cada entrevistado e no contexto no qual cada um está inserido. Por meio da análise das entrevistas, percebeu-se que os desafios relatados pelos gestores são praticamente os mesmos atendimento ao usuário, recursos insuficientes e, sobretudo, gestão de pessoas ; o que muda é a maneira como cada um lida com essas contingências -, que parece interferir, por sua vez, nos processos decisórios. Observou-se que os dados sobre gênero e idade dos gestores pouco ou nada afetam a maneira como eles lidam com os processos decisórios relatados. Por outro lado, percebeu-se que as experiências que cada entrevistado teve tanto em família quanto profissionalmente até chegar ao cargo, os anseios, limitações, experiências e afetos desses sujeitos parecem interferir na maneira como os gestores tomam decisões, com maior ou menor flexibilidade no cumprimento das regras, com mais autoridade ou mais diplomacia, com maior ou menor distanciamento emocional dos desafios enfrentados. Observou-se também que as decisões são tomadas mais intuitivamente do que racionalmente não apenas nas situações de urgência criadas pelos gestores, mas também naquelas nas quais se observa a inexistência de regras pré-definidas ou de exigências para cumpri-las. Evidenciou-se, portanto, a presença da subjetividade na gestão de bibliotecas universitárias.

A alergia alimentar é uma resposta imunológica anormal frente aos antígenos ingeridos pela dieta e sua incidência tem aumentado em países desenvolvidos e em desenvolvimento. Sabe-se que a alergia alimentar ao leite é bastante frequente, principalmente em crianças, afetando cerca de 2,5% delas em seu primeiro ano de vida. Já existem descritos vários modelos para indução de alergia alimentar ao leite de vaca, focando em um dos seus maiores componentes imunogênicos: a proteína -lactoglobulina (BLG). Porém, esses modelos exigem um tempo longo de execução, implicam no uso de toxina colérica ou intensa manipulação dos animais. Nosso grupo desenvolveu um modelo alimentar de alergia à BLG utilizando um protocolo mais rápido e de simples execução. Camundongos BALB/c foram sensibilizados por via intraperitoneal com o antígeno adsorvido em hidróxido de alumínio em salina e, 14 dias depois, receberam a imunização secundária com antígeno em solução salina. Uma semana após essa imunização, os animais foram desafiados por via oral com solução contendo o antígeno em mamadeiras. Dois tempos experimentais foram testados para o desafio oral: 7 ou 14 dias. Observamos que os camundongos sensibilizados e desafiados oralmente exibiam níveis elevados de IgE específica para o antígeno em ambos os tempos experimentais, perda de peso e redução de tecido adiposo perigonadal. Entretanto, os camundongos não alérgicos mantiveram níveis basais de IgE específicas, mantendo também o peso corporal e do tecido adiposo dentro dos valores obtidos no grupo controle. A alergia alimentar gerou um fenômeno classicamente conhecido como aversão, durante o qual os animais rejeitam a ingestão do antígeno utilizado na sensibilização alérgica (alérgeno). No entanto, quando submetidos ao teste de preferência entre o consumo de solução contendo o antígeno ou outra sem a presença do mesmo, tanto animais não alérgicos quanto alérgicos optaram pela ingestão da solução contendo o alérgeno. Medimos também alguns parâmetros histológicos e demonstramos que houve aumento do infiltrado eosinofílico no jejuno proximal, o mesmo acontecendo com o número de linfócitos intra-epiteliais (IELs). Já a produção de muco não se alterou nesse modelo. Os níveis de IgA secretória estavam elevados nos camundongos alérgicos desafiados por 14 dias. Além disto, os níveis de IL-4 estavam aumentados nos linfonodos mesentéricos e jejuno proximal enquanto que os níveis IL-10 e em TGF- estavam reduzidos no jejuno proximal de animais alérgicos e desafiados. O modelo desenvolvido representa uma ferramenta útil e de fácil execução para estudos em um tipo de alergia alimentar de grande importância clínica.

Os banheiros químicos são uma solução largamente utilizada em escala global em diferentes ocasiões, tais como eventos festivos, frentes de trabalho móveis, feiras livres, dentre outras aplicações. Essas estruturas necessitam da adição de substâncias desodorizantes utilizadas para inibir a atividade microbiológica no meio e, consequentemente, disfarçar os maus odores gerados pelo metabolismo microbiano, tornando o ambiente propício ao uso. Os desodorizantes possuem, em sua composição, surfactantes, essências aromáticas e corantes; além de princípios ativos utilizados para inibir a atividade microbiológica, como o formaldeído, um composto carcinogênico. O presente estudo avaliou o cumprimento das normativas brasileiras e estaduais aplicáveis em Minas Gerais referentes ao uso de desodorizantes, manejo, transporte e destinação final de efluentes de banheiros químicos através de uma abordagem quali-quantitativa. Observou-se que, apesar da proibição do formaldeído na formulação de produtos saneantes, estabelecida pela ANVISA no Brasil, o produto Aqua Kem (Água Kem), apontado como líder de vendas no estado, possui tal composto em altas concentrações em sua formulação. Também foi observada a carência de legislações e normativas sobre a temática de manejo de efluentes de banheiros químicos em Minas Gerais, bem como a falta de cumprimento e fiscalização das regulamentações existentes. Este estudo também avaliou se as Fichas de Informações de Segurança de Produtos Químicos (FISPQ) dos produtos químicos comercializados em Minas Gerais possuem informações suficientes sobre os riscos à saúde humana e meio ambiente, baseando-se em informações obtidas junto a banco de dados de agências reguladoras e órgãos de pesquisa de renome internacional. Adicionalmente, foi verificado se tais documentos estavam disponíveis para consulta pública e observou-se que dos oito produtos diagnosticados como comercializados no estado, apenas quatro possuíam Ficha disponibilizada pela fabricante. Ao final da análise das FISPQs, concluiu-se que apenas o produto Porta Pak, da fabricante americana Walex, possuía informações satisfatórias em sua FISPQ. Por fim, este estudo avaliou a biodegradabilidade dos desodorizantes de banheiros químicos em condições anaeróbias. Para isso, testes de biodegradabilidade anaeróbia foram desenvolvidos em laboratório por meio do teste de Atividade Metanogênica Específica - AME, com auxílio do equipamento AMPTS II - Automatic Methane Potencial Test System II. O objetivo dos testes foi avaliar quais os efeitos gerados pela adição de diferentes concentrações e tipos de desodorizantes de banheiros químicos (Aqua Kem - Água Kem - e Aqua Kem Green) na biodegradabilidade de esgoto em condições anaeróbias, utilizando lodo anaeróbio advindo de reator UASB - Upflow Anaerobic Sludge Blanket. A partir dos dados obtidos em laboratório, observou-se que, desde que sejam tomados cuidados básicos para o recebimento de efluentes de banheiros químicos por parte de estações de tratamento de esgotos que possuem sistemas anaeróbios de tratamento, tais como despejo do material após 32 horas da adição de produtos desodorizantes, além de realizá-lo de maneira gradativa, como lançamento no sistema em um período de uma hora para um caminhão de 10 m³ que foi o cenário proposto por este trabalho, não acarretaria problemas operacionais à estação de tratamento.

Neste estudo, o Carbeto de Silício reforçado com fibras de Hi-Nicalon tipo S (SiC HNS) (proposto), foi estudado como revestimento de combustível nuclear de um reator PWR, bem como os tubos guias. Os resultados foram comparados com o revestimento Zircaloy (convencional). Do ponto de vista neutrônico o SiC HNS foi analisado no estado estacionário e durante a evolução do combustível. Do ponto de vista térmico, ele foi avaliado quanto à sua transferência de calor no núcleo do reator e em um recipiente de resfriamento após a irradiação. Para validar a metodologia utilizada, um elemento combustível do benchmark (ECB) foi simulado. Em seguida, o revestimento convencional do combustível foi substituído pelo SiC HNS. Os resultados obtidos mostraram a necessidade de uma avaliação térmica, uma vez que, para os cálculos neutrônicos era necessário o uso de uma temperatura média de trabalho para cada material simulado. Para avaliar a temperatura média de operação do combustível, do revestimento e do moderador, utilizou-se o código RELAP5. Um modelo simplificado do núcleo do reator da usina de Angra II foi usado no estudo termo-hidráulico que simulou separadamente, o comportamento dos revestimentos (Zircaloy e SiC HNS). Com os resultados obtidos usando o RELAP5, os revestimentos do ECB foram avaliados sob o aspecto neutrônico. Então, foram consideradas as condições normais de operação, no estado estacionário à Begin Of Life, a Cold Zero Power e a Hot Full Power. Foram analisados e comparados os impactos das varetas de veneno queimável e das variações das temperaturas, nos valores dos fatores de multiplicação e coeficiente de reatividade de temperatura com o uso dos revestimentos, Zircaloy e SiC HNS. Assim, o estudo foi estendido e a mesma metodologia foi aplicada ao núcleo do reator de Angra II, onde foram avaliadas as variações nas composições de boro e veneno queimável, além da razão de conversão (C) durante a evolução do combustível. As análises neutrônicas foram feitas usando o sistema de código SCALE 6.0 (Standardized Computer Analysis for Licensing Evaluation). Finalmente, uma vareta de combustível do ECB após a sua queima total, foi analisada via código computacional ANSYS, em termos da transferência de calor, do combustível para os revestimentos, Zircaloy e SiC HNS, e dos revestimentos para a água de refrigeração após a irradiação.

Nesta tese descreve-se o desenvolvimento de um sistema de cálculos neutrônicos e termohidráulicos acoplados que utiliza malhas finas não-estruturadas como domínio de solução e totalmente baseado em software livre. As contribuições propostas seguem em dois diferenteseixos: uma delas é o foco na utilização da forma de desenvolvimento de sistemas de computação abertos, um conceito amplamente utilizado em diversas áreas do conhecimento mas raramente explorado no campo de Engenharia Nuclear; a segunda é o uso de memória compartilhada do sistema operacional como uma área de armazenamento de dados de confiável e rápido acesso para acoplar o sistema de dinâmica dos fluidos computacional (CFD) OpenFOAM e o gratuito e flexível código de análise de reatores milonga. Este conceito foi aplicado na simulação do comportamento de um modelo simplificado de um combustível do reator TRIGA Mark 1 IPR-R1 em estado estacionário. As seções de choque macroscópicas utilizadas pelo modelo, um conjunto para dois grupos de energia, foram geradas utilizando o código WIMSD-5B. Os resultados mostram que esta inovadoraforma de acoplamento neutrônico e termo-hidráulico leva a resultados consistentes, encorajando o futuro desenvolvimento deste sistema e seu uso na simulação de sistemasnucleares complexos.

Alimentos naturalmente fermentados como a puba constituem uma fonte de micro-organismos produtores de compostos antimicrobianos. Diversos produtos de interesse industrial são produzidos por bactérias do gênero Bacillus e incluem enzimas, antibióticos, aminoácidos,inseticidas, biossurfactantes e bacteriocinas. Neste estudo, caracterizaram-se lipopeptídeos com ação antimicrobiana e biossurfactantes produzidos pelas linhagens Bacillus spp. C3 e P5, isoladas da matriz alimentar de Puba, tendo sido escolhido um micro-organismos destes, conforme maior atividade antimicrobiana, para o prosseguimento dos experimentos. A identificação das duas bactérias foi realizada por testes fenotípicos, quimiotaxonômicos e genotípicos indicando que pertencem ao gênero Bacillus e Bacillus spp. C3 à espécie B. cereus/B. thuringiensis e Bacillus sp. P5 à espécieBacillus subtilis/amyloliquefaciens. O espectro de atividade antimicrobiana foi realizado para ambas as linhagens de Bacillus spp. Para os testes de atividade antimicrobiana de Bacillus spp. P5 utilizaram-se micro-organismos (45) que incluiram bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, fungos filamentosos e uma levedura, em que foi observada atividade antimicrobiana frente à62% (28) dos micro-organismos testados, enquanto que Bacillus spp. C3apresentou apenas 15% de atividade antimicrobiana contra as espécies para que foi testado. Um aumento da atividade antimicrobiana foi detectadoquando Bacillus spp. P5 foi cultivado juntamente com células inativadas de outros micro-organismos mas não quando em contato com o sobrenadante destes, com maiores atividades para Corynebacterium fimi, Aspergillus fumigatus, Lactobacillus brevis E4-248, Lactobacillus fermentum E4-249 e Lactobacillus plantarum EPF-257. Estes resultados indicam que há interferência de fatores de indução - quorum sensing, especialmente quando os micro-organismos são provenientes da microbiota natural deste alimento fermentado, aumentando a produção da(s) substância(s) antimicrobiana(s) produzida por Bacillus spp. P5. O sobrenadante bruto de Bacillus sp. P5 apresentou ação bacteriostática contra Bacillus cereus ATCC 14579 e contra Listeria monocytogenes ATCC 6477. A caracterização da atividade biossurfactante foi detectada pela zona de beta hemólise ao redor da colônia, pelos testes de atividade emulsificante e pela medição da tensão superficial. Foi obervada atividade emulsificante do sobrenadante para todos os agentes hidrofóbicos testados (4), com 30 exceção do xileno, sendo este capaz de formar emulsão apenas quando testado o sobrenadante em meio Landy acrescido de glutamato.Também foi observada redução da tensão superficial do meio de cultura, sugerindo a produção de compostos tensoativos pela linhagem de Bacillus spp. P5. A técnica de PCR seguida de sequenciamento dos amplicons permitiu identificar genes relacionados à síntese das bacteriocinas subtilosina A e subtilina para Bacillus sp. C3, constituindo o primeiro registro da presença destes genes para a espécie Bacillus thuringiensis/B. cereus, a qual posssivelmente pertence Bacillus sp. C3 e de subtilosina A e dos lipopetídeos iturina A e surfactina para Bacillus sp. P5. Dentre as técnicas de purificação empregadas neste trabalho as que apresentaram melhores resultados foram a extração como butanol, seguidas por cromatografia de fase reversa em coluna C18 acoplada ao HPLC e espectrometria de massas MALDI-TOF para a pesquisa no sobrenadante da cultura. Para a pesquisa das substâncias diretamente na matriz alimentar substituiu-se a cromatografia de fase reversa através de coluna C18 e adaptou-se o método de extração com butanol com a utilização de coluna C4 (zip tip). O isolado Bacillus sp. P5 é capaz de co-produzir cinco (5) diferentes tipos de lipopeptídeos (surfactina, fengicina, iturina, micosubtilina e bacilomicina) e, portanto, apresenta diferentes atividade de biocontrole. Além disso, este trabalho demonstrou a elevada produção de diferentes isoformas de surfactina (de C13- C17), em meio de cultura, incluindo a isoforma C15, biologicamente a mais ativa e a isoforma C17, raramente descrita, bem como a detecção inédita de lipopeptídeos como fengicina e iturina diretamente na matriz alimentar de puba de mandioca. Este alimento é amplamente consumido por populações no norte e nordeste do Brasil e o conhecimento acerca destas substâncias poderia contribuir para o aumento da segurança alimentar e da vida de prateleira deste tipo de alimento.

O objeto de estudo desta pesquisa é compreender as práticas de leitura de literatura digital de leitores jovens de 15 a 17 anos, oriundos de estratos socioeconômicos diferenciados, identificando as formas de ler, analisando as relações existentes entre as leituras de literatura digital e impressa nessas práticas, assim como o papel das instâncias e dos mediadores na construção de práticas de leitura de literatura digital pelos sujeitos. O aporte teórico da pesquisa teve carátermultidisciplinar, baseando-se em estudos sobre a história do livro e da leitura, sobre a literatura juvenil e a sociologia da leitura e, especialmente, em trabalhos que discutem a multimodalidade e os gêneros digitais literários na sociedade contemporânea. A investigação adotou uma perspectiva quantitativa e qualitativa. Foi aplicado um questionário a 342 jovens de uma escola pública e de uma escolaparticular. Em seguida, foram selecionados 68 leitores jovens, por meio de categorias referentes às práticas de leitura, e aplicado um questionário semiaberto. Por fim, seis leitores jovens foram selecionados e suas práticas de leitura literária digital foram acompanhadas, por meio de entrevistas semiestruturadas, ao longo desete meses. Na tese, é traçado um perfil desses seis leitores jovens e são levantados dados sobre os gêneros literários mais lidos por eles. Os resultados mostram que a relação e a concomitância entre a leitura em suporte digital e impresso é explicada por vários aspectos que não se referem ao tipo de texto e nem aos gêneros digitais e digitalizados. Essas relações foram evidenciadas nas situações/espaços em que se lê em um ou em outro suporte, nas propriedades físicas dos objetos, na relação entre o corpo e o suporte, nos modos de acesso aos textos e às redes de sociabilidade literária na Internet que mesclam divulgação doimpresso e do digital e, especialmente, na relação simbólica que os leitores jovens estabelecem com a literatura impressa e aquela divulgada ou produzida em meios digitais. Em vários casos, os leitores jovens demonstram uma conexão com a obra que extrapola seu formato. Nossa tese é a de que a oscilação entre as práticas deleitura literária no suporte digital e impresso, pelo leitor jovem, dependerá do tipo de acesso à obra desejada, se por empréstimo, gratuidade pela internet e por aquisição e não pela sua preferência por um suporte ou outro.

O Ensaio de Alta Pressão Aplicada à Torção ou HPT (High-Pressure Torsion) é uma técnica SPD (Severe Plastic Deformation) onde obtém-se excelente refinamento de grãos em materiais policristalinos através da imposição de elevadas taxas de deformação. O ensaio HPT consiste na aplicação simultânea de esforços de compressão e de torção sobre uma pequena amostra metálica, em formato de disco, alojada entre duas matrizes. A granulação Ultrafina ou UFG alcançada pela técnica HPT condiciona a uma elevação do grau das propriedades mecânicas do material impraticáveis a quaisquer outras técnicas SPDs ou processos termomecânicos convencionais. Diante disso, este presente trabalho tem como objetivo o desenvolvimento de um protótipo virtual em plataforma CAD 3D de um equipamento HPT adaptado à uma máquina para ensaios de compressão com capacidade de 200T. Para o dimensionamento e seleção dos componentes elétricos e mecânicos que integram o equipamento HPT foram adotados métodos analíticos e Métodos por elementos finitos utilizando plataforma CAE. O escopo do projeto foi delineado conforme os principais parâmetros requeridos ao processamento do ensaio HPT (torque, pressão hidrostática, materiais e diâmetro das amostras) e ainda, pelas limitações de espaço interno da máquina de compressão. A unidade geradora de torção é constituída por um sistema de transmissão de trem de engrenagens composto de engrenagens cilíndricas de dentes retos. Visando o processamento de duas técnicas de ensaios distintos, utilizando um mesmo equipamento, foi inserido um sistema de movimentação por guias lineares no novo conjunto projetado para o ensaio HPT. Desse modo, o deslocamento longitudinal do conjunto facilita a montagem e a desmontagem do equipamento HPT.

A presente tese desenvolve-se em torno de um conjunto de três problemas: o conceito moderno de Constituição; os reflexos desse conceito na relação entre teoria constitucional brasileira e interpretação da história constitucional do Brasil; e a relação entre Brasil e Modernidade. Para lidar com esses três problemas, em primeiro lugar, o conceito moderno de Constituição é categorialmente reconstruído a partir da história da Constituição Brasileira de 1824. Esse processo de reconstrução desdobra-se em três momentos: a narrativa da situação objetiva em que Brasil e Portugal encontravam-se no contexto geral da crise do Antigo Regime; a narrativa das alterações que ocorriam, naquele momento histórico, no que diz respeito aos espaços públicos e à percepção da temporalidade vivida; e a narrativa das mudanças de fundo que desestruturaram as bases tradicionais do direito e da política. Em segundo lugar, é explorada criticamente a estrutura conceitual da tese da constitucionalização simbólica, de Marcelo Neves, como exemplo dos condicionamentos internos e recíprocos entre teoria constitucional brasileira e interpretação da história constitucional brasileira. Em terceiro lugar, é desenvolvido um conceito de Modernidade apto a fundamentar uma conclusão sobre a relação entre Brasil e Modernidade e, retroativamente, sobre o conceito moderno de Constituição. De um ponto de vista metodológico, a metodologia histórica é oferecida pela história econômica, pela história dos conceitos (Begriffsgeschichte) e pelo contextualismo de Cambridge. As principais fontes históricas utilizadas são: os anais da Assembleia Geral Constituinte e Legislativa do Império do Brasil de 1823; os escritos de Frei Joaquim do Amor Divino Caneca; e panfletos manuscritos e impressos publicados entre 1820 e 1823, além de outros documentos oficiais e fontes secundárias. Por fim, o suporte teórico é assegurado por um diálogo crítico entre Karl Marx e Jürgen Habermas.

A partir da perspectiva de uma Contra-História da Filosofia do Direito, que compreende o pensamento jurídico não apenas pelas grandes tradições filosóficas, é possível pensar uma justiça para além de fundamentos transcendentes como Liberdade, Igualdade ouDignidade Humana. Pode-se, assim, propor um questionamento da ideia de justiça a partir de filósofos como Friedrich Nietzsche [1844-1900]. A partir das reflexões próprias da filosofia nietzschiana, como o Perspectivismo e a Genealogia dos Valores, é possívelpensar uma crítica e compreensão não convencional sobre o direito e a justiça, qual seja, enquanto uma relação de poderes em constante embate na busca de um equilíbrio. Para isto faz-se necessária uma leitura da Vontade de Poder para se compreender a dinâmicaque há nas relações de poderes em todos os âmbitos da vida, especialmente no éticojurídico. Todavia, não basta simplesmente compreender a justiça enquanto relações de poderes. As reflexões de Nietzsche sobre a cultura ocidental e sua marcha para o chamado Niilismo demonstram como é possível identificar as manifestações deste movimento sobre as avaliações da existência enquanto oposições à própria vida. Oposições estas não só contra homens e instituições, mas contra valores por muitos considerados os mais importantes. Assim, seria possível pensar uma nova justiça que se afirma nas possibilidades do devir: sem culpa, má-consciência, ressentimento, mas acima de tudo enquanto oposta à vingança. A presente tese retoma questões centrais da filosofia do direito, mas numa perspectiva diferente e divergente ao legado da tradição filosófica ocidental até agora.

O presente trabalho visa discutir as interpretações que professores do Ensino Secundário Geral de três escolas públicas de Maputo, em Moçambique, produzem acerca da presença dos fenomenos da indisciplina e da violência escolar na escola. A pesquisa foi construída no âmbito da Linha de Pesquisa Psicologia, Psicanálise e Educação e da produção do Grupo de Estudos e Pesquisas de Psicologia Histórico-Cultural na Sala de Aula (GEPSA) da Faculdade de Educação da Universidade Federal de Minas Gerais, no Brasil. O estudo, de caráter qualitativo foi realizado com uma amostra de 152 professores de ambos os sexos, habilitados com o nível de bacharelado, licenciatura e mestrado e diferentes níveis de experiência de ensino. Para a recolha de dados quantitativos, foi aplicado um questionário, e, para a recolha de material qualitativo, foram realizadas 12 entrevistas semiestruturadas, quatro em cada escola. Os resultados do estudo revelaram que os principais atos de indisciplina escolar presentes nas escolas investigadas são: barulho, conversas entre alunos, risos, brincadeiras, provocações, pulos, falta de respeito, desprezo, xingamento e desobediência às regras de regulamento das escolas. A ocorrência de atos de violência física, verbal e psicológica ultrapassam aquelas regras de comportamento envolvendo agressões com armas brancas, ofensas morais e simbólicas, rotulações, xingamentos, ameaças, insultos. Os professores atribuem as causas da indisciplina e da violência escolar especialmente à violência que os alunos assistem na sociedade moçambicana, à falta de compreensão de atividades de aprendizagem, à falta de educação, à preguiça na resolução das tarefas escolares, à hiperatividade, aos roubos, ao consumo de drogas e bebidas alcoólicas, à falta de respeito, ao desprezo pelos professores, à perda de valores éticos e morais, à falta de acompanhamento familiar, às influências de novelas, ao cargo político dos pais dos alunos, às aulas desmotivantes, ao fraco domínio dos conteúdos e à não planificação de aulas por parte dos professores, à ausência de definição de regras de conduta na sala de aula, ao pouco espaço na sala de aula e mobiliário escolar, às turmas numerosas; à falta de material didático, ao regulamento interno da escola desajustado à realidade das escolas, à falta de orientação escolar. As características dos alunos que praticam a indisciplina e violência segundo a interpretação dos professores são alunos drogados e viciados, alcoólatras, de pais ricos e pobres, excluídos, com carência afetiva dos familiares próximos, com problemas de socialização na escola e vítima de violência doméstica. Para resolverem esses problemas, os professores recorrem à aplicação de castigos ou punições e, em pequeno número lançam mão de diálogo com os alunos. Os docentes dizem que os efeitos dos atos de indisciplina e violência escolar, sejam elas físicas ou simbólicas, prejudicam o processo de ensino e aprendizagem, afetam a própria atividade docente, provocam reações dos próprios estudantes, que organizam emboscadas, lançam pedras e agridem fisicamente aos professores ao sairem do edifício da escola. Os professores embora não diferenciam a indisciplina de violência, fazem uma gradação de gravidade dos atos entre um e outro fenômeno e, ainda entendem que a violência pode ser resultado da indisciplina.

Esta tese apresenta o estudo realizado sobre o desenvolvimento de uma metodologia para aplicação de ensaios de ultrassom em protótipos de paredes em taipa de pilão. A primeira e a segunda fase desta pesquisa foram realizadas com êxito, comprovando a existência de uma forte correlação entre resistência mecânica e velocidade ultrassônica em materiais terrosos. Buscando alcançar o objetivo proposto, esta pesquisa foi desenvolvida em cinco etapas. Na primeira etapa, foi realizado um estudo sobre a tecnologia construtiva da taipa de pilão. Na segunda, visitas técnicas às edificações mapeadas, erguidas com o emprego dessa tecnologia construtiva, no estado de Minas Gerais. Na terceira, a escolha do solo a ser trabalhado, levando-se em consideração o tipo de solo usado na segunda fase desse projeto de pesquisa. Na quarta, foram feitos ensaios geotécnicos, buscando compreender o comportamento do solo escolhido. Na quinta etapa, foram conduzidos os ensaios de ultrassom e resistência à compressão simples. Para esta pesquisa, foi construída uma miniparede, em taipa de pilão, com espessura similar às paredes existentes erguidas em edificações do período colonial brasileiro, onde foram realizados os ensaios de ultrassom. Nesses mesmos pontos foram retirados corpos de prova para ensaios de resistência à compressão simples. Posteriormente, os resultados gerados, de ambos os ensaios, foram analisados, buscando-se averiguar a existência da correlação entre os pares. Embora os resultados tenham demonstrado baixa correlação entre velocidade ultrassônica e resistência à compressão simples, quando realizados em protótipos de dimensões similares às das paredes em taipa de pilão existentes, seria prematuro afirmar a inadequabilidade do emprego do ultrassom como método não destrutivo para verificação de presença de trincas em paredes erguidas com emprego dessa técnica construtiva. Analisando os dados obtidos, foi verificado que o ultrassom, com o auxílio de amplificador, poderá gerar resultados válidos. Portanto, deseja-se que este trabalho contribua para o desenvolvimento dos estudos sobre o emprego de ensaios não destrutivos na avaliação de edificações construídas com material terroso, entre elas, a taipa de pilão.

Apresentam-se, em linhas gerais, a organização e os pontos relevantes de toda a pesquisa que gerou a presente tese de doutorado. Os resultados do trabalho são apresentados em etapas: a introdução aborda o objeto de pesquisa. A primeira parte apresenta as principais referências e as imagens que delinearam o contexto do meu percurso a partir da década de 80, em Belo Horizonte. Na segunda, apresentamseos depoimentos dos convidados a respeito do tema, registrados em vídeo. A terceira parte contém uma abordagem sobre o panorama da cidade de Belo Horizonte naqueles anos, contendo também um conjunto de imagens dos artistas mais envolvidos com a pintura e o desenho. A quarta parte apresenta um panorama sobre o clima dos anos 80 em São Paulo e Rio de Janeiro, com imagens, situações e comentários sobre as obras dos artistas desses anos. E, na quinta e última parte, segue-se um panorama internacional, com comentários sobre movimentos e obras de alguns artistas mais influentes, naquele momento. As entrevistas gravadas dão relevo ao cultivo de um vocabulário próprio, muitas vezes coloquial, traduzindo, em uma coreografia do múltiplo, as marcas de um período e de um grupo de artistas cuja ação prática era a condição fundamental para a aquisição de conhecimento.

A utilização de elementos autobiográficos nas criações teatrais performativas têm sido recorrente nas produções artísticas da atualidade. O corpo como instância que performa afetos e memórias permeia as discussões presentes na problemática autobiográfica. Buscou-se refletir, a partir do acontecimento teatral performativo de Domingo, entrevistas com a atriz Cida Falabella e revisão bibliográfica, como o corpo-poético performa tais elementos no processo criativo do ator. A autobiografia abrange noções sobre eu, memória, emoções e sentimentos a partir de propulsores como a auto-objetivação e sua inserção no espaço (auto) biográfico. O trânsito entre o eu-para-mim e o eu-outro, mediado pelo estado poético e corpo afetado, constitui-se performance do corpo em Domingo, de Cida Falabella. No espaço (auto) biográfico, a criação de corpos poéticos proporciona a invenção de imagens dissidentes daquelas vivenciadas pela sociedade espetacular, além de proporcionar novas análises micropolíticas dos corpos-sujeitos e suas respectivas ações.

A pesquisa desta dissertação propõe uma residência artística em três espaços prisionais femininos a partir das noções de convivialidade, performance e liminaridade. Partiu-se do princípio de que o teatro é [no] encontro com o outro no mundo e que a criação e o compartilhamento de cartas pode ser mote para um acontecimento teatral contemporâneo. Trabalhamos com a escrita de diários de bordo, tendo como referência metodológica a perspectiva etnográfica e a atitude fenomenológica. A experiência revelou a potência das artes da cena na proposição de encontros de intimidades junto às mulheres presas, na chave do teatro como convívio.