Repositório RCAAP

Desde o fim do ano de 2019 que houve uma ameaça à saúde pública que alterou a rotina e a vida de todos nós. Houve o aparecimento do novo Coronavírus, o SARS-CoV-2, que dá origem à Covid-19 que levou a uma pandemia a nível mundial. Devido à sua fácil transmissão e mecanismo heterogéneo houve a necessidade de estudar o seu mecanismo e arranjar uma terapêutica eficaz. O vírus entra no organismo devido à presença de uma enzina, a Enzima de Conversão da Angiotensina 2, que permite a entrada do vírus que, após replicação pode levar a doença grave devido a uma tempestade de citocinas que provoca então a Síndrome Respiratória Aguda em doentes graves. De momento, existe várias terapêuticas aprovadas pela entidade reguladora em Portugal, o INFARMED. Em geral, a terapêutica aprovada são imunomodeladores de modo a contrariar a inflamação criada pela entrada do vírus, mas também se incluem alguns antivirais que se mostraram eficazes no combate à doença. Em doentes não graves, em que os sintomas variam entre febre, dores musculares, dor de cabeça, tosse, espirros, dores de garganta, entre outros, a terapêutica é o alívio dos sintomas presentes com Anti-Inflamatórios Não Esteroides e/ou Paracetamol. No entanto, houve alguma controvérsia no uso de Anti-Inflamatórios Não Esteroides por haver suposta evidência que este regulava positivamente a Enzima de Conversão da Angiotensina 2, o que poderia levar à mais fácil infeção ou por poderem piorar então os sintomas e levar a doença grave e ainda por haver evidência de efeitos cardiovasculares adversos dos AINEs que são considerados fatores de risco para Infeções Agudas do Trato Respiratório, incluindo a COVID-19. Esta monografia pretende rever então o mecanismo e as terapêuticas já aprovadas incluindo a imunização com vacinas. Serão discriminados os mecanismos dos anti-inflamatórios mais utilizados assim como a abordagem deles no tratamento da COVID-19, e perceber se existe então evidência negativa ou positiva no seu uso.

O cancro do pulmão engloba um subconjunto de doenças heterogéneas, responsáveis pela maioria das mortes relacionadas com o cancro em todo o mundo. É o segundo tipo de cancro mais comum e é a principal causa de morte, tanto em homens como em mulheres, causando 1 milhão de mortes por ano, por todo o mundo. Apresenta uma natureza extremamente heterogénea e normalmente é diagnosticada num estadio avançado, devido ao seu desenvolvimento silencioso. Como consequência da sua deteção tardia, a primeira linha de tratamento para a maioria dos doentes inoperáveis é a quimioterapia, terapia direcionada ou imunoterapia. Todavia, a taxa de sucesso é baixa e por norma estas terapêuticas encontram-se associadas a numerosos efeitos adversos. Foi comprovado por cientistas que os procedimentos baseados em nanotecnologia apresentam, como alternativa, uma taxa de eficácia superior, em relação à terapia convencional, apresentando menos efeitos colaterais. Várias nanosistemas têm sido estudados, incluindo lipossomas, dendrímeros, polímeros, micelas, nanopartículas inorgânicas, como nanopartículas de ouro ou nanotubos de carbono, e até mesmo sistemas de entrega de RNA interferentes pequeno (siRNA). A nanotecnologia, em particular as nanopartículas (NPs), continua a influenciar de forma determinante o diagnóstico e o tratamento de doentes com cancro. Este papel de relevo no controlo do cancro do pulmão é facilmente demonstrado pelas várias formulações clinicamente aprovadas e em muitos ensaios clínicos. Contudo, é importante maximizar o potencial das NPs em todas as vertentes, sendo para tal necessário conhecer de forma aprofundada o impacto destes transportadores nas células e órgãos alvo. É importante melhorar os perfis de biodisponibilidade e de biocompatibilidade, assim como os perfis de segurança, uma vez que estes nanossistemas possuem um notável potencial em vastas aplicações biomédicas, incluindo atividade antitumoral ou terapia genética.

A monitorização da qualidade das águas residuais e das águas naturais doces nos meios hídricos está prevista em muitas Licenças Ambientais e/ou Títulos de Utilização de Recursos Hídricos, sendo este controlo fundamental para assegurar a preservação do Meio Ambiente. Muitos dos parâmetros monitorizados nas águas são parâmetros físico‐químicos e a avaliação da conformidade segundo a legislação é afetada pela incerteza da colheita e da análise da amostra. Esta incerteza pode ser usada para determinar o risco das avaliações de conformidade estarem erradas; ou seja, o risco de uma decisão errada de conformidade ou não conformidade. Este trabalho tem como objetivo validar e avaliar a incerteza da colheita e análise de parâmetros físico‐químicos dos diversos tipos de águas e ponderar o impacto desta incerteza na avaliação da conformidade das águas considerando as incertezas expandidas alvo correspondentes aos parâmetros. Recorreu-se a abordagem supra-analítica e à diferença de amplitudes para o cálculo da incerteza da medição e da colheita, respetivamente.

A indústria dos cosméticos e cuidados pessoais contribui significativamente, social e economicamente, nas economias de todos os países do mundo. O mercado dos cosméticos tem vindo a aumentar nos últimos anos, sendo que a população consume cada vez mais estes produtos, tendo o total de vendas globais em 2020 sido de 430 mil milhões de euros. Além da importância económica, os cosméticos têm uma elevada importância social, sendo que a sua utilização traz benefícios funcionais e emocionais importantes, desempenhando um papel essencial em todas as fases da vida do consumidor. A rotulagem é um elemento essencial na embalagem dos produtos cosméticos, já que é através da leitura do rótulo que os consumidores consultam e assimilam a maior parte da informação necessária para a decisão de compra do produto e, posteriormente para o seu uso correto. É, por isso, importante que a rotulagem contenha essa informação de forma muito clara, inequívoca e verdadeira por forma a que seja compreensível por todos os consumidores que pretendem adquirir o produto. Mas o aconselhamento sobre o produto não tem de terminar na leitura da rotulagem, podendo ser complementado com informação disponibilizada de forma digital, através da construção de documentos que permitam aumentar a literacia dos consumidores sobre a rotulagem dos cosméticos. Assim, neste trabalho é feita a desconstrução da definição de produto cosmético e enquadramento legal dos mesmos, apresentando a legislação que os rege a nível europeu. Adicionalmente, é descrito com detalhe os elementos obrigatórios e não obrigatórios da rotulagem, das alegações dos produtos cosméticos e dos vários símbolos associados. Neste contexto, associado a esta monografia, foi desenvolvido um inquérito subordinado ao tema Rotulagem dos Produtos Cosméticos, com o objetivo de conhecer a opinião de profissionais da área da saúde e de alguns consumidores em geral, relativamente aos rótulos dos produtos cosméticos e avaliar a possível introdução de rótulos digitais nos mesmos. O mundo digital é cada vez mais impactante, portanto é de esperar que os rótulos digitais ganhem um novo impacto no futuro. Com a evolução da tecnologia, esperamos também o aparecimento de rótulos mais informativos, cativantes e sustentáveis, que permitam uma melhor experiência de compra ao utilizador. Neste sentido, com as novas alterações na rotulagem, surge uma nova era do marketing dos produtos cosméticos.

O presente relatório de estágio, intitulado “O Papel dos CFAE na Formação Contínua dos Professores: o caso do Centro de Formação da Associação de Escolas de Sintra”, insere-se no âmbito do estágio curricular do mestrado em Educação e Formação, na área de especialização em Organização e Gestão da Educação e da Formação do Instituto de Educação da Universidade de Lisboa. O estágio foi realizado no Centro de Formação de Associação de Escolas de Sintra (CFAES), entre os meses de Setembro de 2020 e Maio de 2021, com uma permanência mínima de dezasseis horas semanais. O estágio visou compreender o processo de gestão da oferta formativa no Centro de Formação da Associação de Escolas de Sintra. Para atingir o objetivo de estudo foi adotada abordagem qualitativa recorrendo-se às seguintes técnicas de recolha de dados: pesquisa documental, entrevista semidirecta, à observação participante, e por último, análise de conteúdo. As experiências adquiridas no estágio curricular permitiram conhecer a história e o funcionamento do CFAES, e por outro lado, desenvolver e aprimorar o conhecimento sobre as políticas e as práticas de formação contínua de professores em Portugal e sobre a Organização e a Gestão da Educação e da Formação. Os resultados da investigação permitem perceber que o Centro de Formação da Associação de Escolas de Sintra apresenta estrutura de funcionamento simples de acordo com a tipologia de Mintzberg (1995), tendo em conta a sua pequena dimensão e a sua estrutura orgânica. O seu modo de funcionamento e gestão da oferta formativa é coordenado pelo Diretor do centro e orientado nos valores próprios e na legislação do Regime Jurídico da Formação Contínua de professores em Portugal.

The climatic factors and their variability, both spatial and temporal, linked to precipita-tion decreasing and irregular distribution, due to climatic changes, have been gathering a higher weight in the definition of water management policies. These policies have important implications on agriculture. Using new technologies that allow a better use of water requires institutional changes in major areas. The first point is the need for base information with an adequate spatial and temporal resolution. The work we have done includes itself in the water efficient and sustained use, allowing the improvement of irrigation systems and it’s the result of a jointly effort of several teams based on an international project. The PLEIADES Project - Participatory multi-Level EO-assisted tools for Irrigation water management: and Agricultural Decision - Support, falls in the 6th Framework Programme, Priority 6 - Sustainable Development, Global Change and Ecosystems – CEC - Research Directorate-General-Integrating and Strengthening the European Research Area. The Portuguese working area was the Caia irrigation area, a subsystem of Guadiana basin, located in the southeast of Portugal, near the border with Spain. The system praised by PLEIADES stands mainly over FAO normative, about culture water needs and the calculation of cultural coefficient (Kc) in a simple way, directly from remote sensing data. For that we simply use radiometric pa-rameters derived from visible and infrared bands.

The study of phytoplankton dynamics is a fundamental tool in environmental assessment and monitoring, studies of trophic relationships and modeling ecosystems. The present study was a rare opportunity to study two different ecosystems, such as a polar zone, the Antarctic, and a temperate zone influenced by upwelling processes, the Portuguese coast. The main objective of this study was to understand the physical-chemical processes related to the phytoplankton communities’ distribution in these areas. Particularly, the Nazaré submarine canyon region (coast of Portugal) and around the tip of the Antarctic Peninsula, and characterize their communities through pigment analysis (HPLC) and identifying dominant species by microscopy. A great spatial variability in chlorophyll a (Chl a) was observed in the Antarctic Peninsula: highest levels in the vicinity of the James Ross Island (exceeding 7 mg m-3 in 2009), intermediate values (0.5 to 2 mg m-3) in the Bransfield Strait, and the lowest concentrations in the Weddell Sea and Drake Passage (below 0.5 mg m-3). On the other hand, in the region of Nazaré submarine canyon, a clear onshore-offshore gradient was visible: high Chl a concentrations were recorded in the canyon head, near the coast, where values greater than 4 mg m-3 were observed; in contrast, Chl a was relatively low in offshore regions, with values below 0.5 mg m-3. The use of taxonomic tools such as CHEMTAX software allowed efficient quantification of the contribution of different taxonomic groups present to total Chl a (biomass index). This study also showed that the spatial distribution of macronutrients is one of the key factors regulating the distribution of phytoplankton communities in the Nazaré Canyon region, while in the neighboring Antarctic Peninsula, other factors, such as light availability and/or iron distribution, mostly associated with the structure of the water column, determined the spatial composition of phytoplankton communities. The results presented are important to understand the oceanographic dynamics of these regions, and provide new insights for the overall knowledge of phytoplankton dynamics. Moreover, this work contributed with invaluable in situ data, which can be used in ecosystem modeling.O ambiente marinho contém comunidades biológicas muito diversas que estão interligadas em complexas cadeias tróficas. Na base dessas cadeias tróficas encontra-se o fitoplâncton (principal produtor primário dos oceanos), que embora representando menos de 1% da biomassa vegetal do planeta, é responsável por cerca de metade da produção primária na Terra. O estudo da dinâmica do fitoplâncton constitui uma ferramenta fundamental na monitorização e avaliação ambiental, nos estudos das relações tróficas e na modelação dos ecossistemas. A presente dissertação constituiu uma rara oportunidade de estudar dois ecossistemas tão distintos como uma zona polar, a Antártica, e uma zona temperada influenciada por processos de afloramento, a costa portuguesa. Apesar de o oceano Austral ser, usualmente, caracterizado como uma região de elevadas concentrações de nutrientes, mas com baixas concentrações de clorofila a (Chl a), existem determinadas zonas ao redor da Antártica onde se registam elevadas taxas de produtividade marinha, que servem de importantes áreas de alimentação para herbívoros e que são cruciais para captação de CO2 atmosférico em termos globais. Por sua vez, as regiões costeiras caracterizadas pelos processos de afloramento, como o caso da costa de Portugal, estão entre os ecossistemas marinhos mais produtivos dos oceanos e são conhecidas por sustentar algumas das regiões de pesca mais importantes do mundo. O principal objectivo deste estudo foi compreender os processos físico-químicos responsáveis pela distribuição das comunidades de fitoplâncton na região da Península Antártica e na região do canhão da Nazaré (costa de Portugal), caracterizando as respectivas comunidades através da análise Resumo 22 pigmentar por HPLC (high-performance liquid chromatography, que se poderá traduzir como cromatografia líquida de elevada precisão) e identificando as espécies dominantes por microscopia. A utilização de ferramentas químico-taxonómicas como o programa CHEMTAX permitiu uma eficiente quantificação da contribuição das diversas classes taxonómicas para o total de Chl a (índice de biomassa). O estudo ecológico efectuado na região da costa de Portugal encontra-se descrito e discutido no Capítulo II. Este trabalho baseou-se em uma campanha oceanográfica efectuada na região do canhão da Nazaré, numa altura do ano em que predominaram ventos favoráveis (quadrante norte) para a ocorrência de processos de afloramento costeiro. Esta situação foi evidenciada pelo surgimento de uma banda de águas mais frias, junto à costa, observada nas imagens de satélite da temperatura da superfície da água do mar. Nesta região da costa de Portugal foram observadas maiores concentrações de Chl a, relacionadas com a presença de diatomáceas e/ou dinoflagelados, nas regiões costeiras em associação com a presença de águas mais frias e ricas em nutrientes. Nas regiões mais afastadas da costa, fora da região de afloramento, observou-se um aumento da estratificação, menores concentrações de nutrientes e um total domínio de primnesiófitas, com um incremento na contribuição das cianobactérias nas estações mais oceânicas. Por outro lado, a presença do canhão submarino determinou um diferencial Norte-Sul na circulação dos nutrientes, que proporcionou uma injecção de maiores quantidades de nutrientes (bem visível na distribuição espacial do fosfato) para a região costeira a Sul do canhão, favorecendo o desenvolvimento de diatomáceas nesta área. Os dinoflagelados, por sua vez, competindo com as Resumo 23 diatomáceas por nutrientes e, provavelmente, melhor adaptados a regimes com menores concentrações de fosfato estabeleceram-se numa região a norte da cabeceira do canhão, onde este nutriente foi observado em concentrações muito baixas. Esta região de elevada biomassa (valores de Chl a superiores a 4 mg m-3) foi caracterizada por um forte florescimento de um dinoflagelado tóxico formador de cadeias longas – Alexandrium affine – em conjunto com outros dinoflagelados como Ceratium candelabrum, Ceratium furca, Ceratium fusus, Dinophysis acuta e Dinophysis caudata. O Capítulo III diz respeito ao estudo acerca da distribuição espacial das comunidades de fitoplâncton no entorno da Península Antártica, baseado nos resultados obtidos em dois cruzeiros oceanográficos realizados em dois anos consecutivos (2008 e 2009) no final do verão austral. As maiores biomassas registaram-se nas estações mais costeiras e próximas à Península, que apresentaram uma coluna de água mais homogénea e, possivelmente, uma maior disponibilidade em ferro devido aos processos de mistura. Estas zonas mais costeiras, em especial a região ao redor da ilha de James Ross (onde se registaram valores de Chl a superiores a 7 mg m-3), foram associadas com um predomínio de diatomáceas. Em zonas mais oceânicas (mar do Weddell e Passagem de Drake) verificou-se um aumento da estratificação, provavelmente restringindo os níveis de ferro na camada eufótica, o que limitou a biomassa e favoreceu o crescimento de organismos nanoplanctónicos, como as criptófitas e/ou Phaeocystis antarctica (primnesiófita). A utilização de índices pigmentares permitiu avaliar alguns processos fisiológicos das comunidades de fitoplâncton em resposta a determinadas condições ambientais (disponibilidade de ferro, luz e/ou herbivoria). Esta informação serviu para uma melhor compreensão dos Resumo 24 complexos processos responsáveis pela dinâmica do fitoplâncton ao redor da Península Antártica. A região do Estreito de Bransfield apresentou uma grande variabilidade espacial e temporal das suas características físico-químicas devido, em parte, a uma influência repartida de águas provenientes do mar de Weddell e do mar de Bellingshausen. Este facto reflectiu-se na grande variabilidade observada na distribuição da biomassa (concentrações de Chl a entre 0.5 e 2 mg m-3) e, consequentemente, das comunidades de fitoplâncton. Na sequência desta grande variabilidade observada para o Estreito de Bransfield e juntando uma terceira campanha oceanográfica realizada em 2010, na mesma época do ano (final do verão austral) e nas mesmas estações de amostragem realizadas em 2008 e 2009, efectuou-se um estudo específico para a região do Estreito de Bransfield, apresentado no Capítulo IV, sobre a variabilidade interanual das comunidades de fitoplâncton (variação na dominância dos principais grupos taxonómicos) em relação às condições físico-químicas e climáticas observadas. Foi ainda possível associar o início do degelo marinho, para a região do Estreito de Bransfield, com as variações observadas nas comunidades de fitoplâncton no final do verão austral (período em que se realizaram as amostragens). Tal como já observado por diversos autores para outras regiões ao redor da Península Antártica, uma alteração no início e/ou intensidade do degelo marinho causa um desfasamento (atraso ou antecipação) na natural sucessão fitoplanctónica da região. No ano de 2010, onde se verificaram temperaturas atipicamente frias durante o verão austral, o início/intensidade do degelo (gatilho fundamental para o desenvolvimento dos primeiros florescimentos de diatomáceas) foi de tal forma atrasado que resultou Resumo 25 em valores de biomassa bastante reduzidos durante todo o verão austral de 2010. Além disso, este processo resultou em um domínio de criptófitas em detrimento das diatomáceas, naquele ano, com presumíveis implicações para toda a cadeia trófica marinha da região.

A proposta desta dissertação é compreender o processo de construção das imagens de Gungunhana, soberano angune de Gaza, em Moçambique, produzidas em Portugal entre os anos de 1896 e 1907 e referentes ao seu exílio forçado na Europa, assim como as suas possíveis conexões com os diferentes projetos coloniais de Portugal, idealizados e exercidos ao longo do século XIX. Analisamos as relações entre Portugal e Gaza, desde as origens deste Estado em meados da década de 1820, até o rompimento definitivo das relações diplomáticas entre ambos os Estados, em 1895. Damos ênfase ao período do governo de Gungunhana (1884-1895), com o intuito de averiguar os reflexos das resoluções estabelecidas na Conferência de Berlim (1884-1885) sobre os projetos coloniais de Portugal e a forma como esses projetos influenciaram na deterioração das relações com Gaza. Por último, analisamos a adequação dos projetos coloniais de Portugal ao contexto europeu, marcado pelo acirramento das disputas por territórios africanos, que resultou na captura de Gungunhana, assim como a projeção desse contexto nas imagens e textos acerca do exílio do soberano angune, veiculadas na imprensa ilustrada lisboeta e elaboradas a partir da reprodução de estereótipos acerca da África e dos africanos.

A microbiota humana (conjunto de microorganismos que vive no corpo humano) atrai muita atenção por parte dos investigadores devido ao seu impacto numa variedade de doenças, nomeadamente o cancro, uma das principais causas de mortalidade mundial. Nos últimos anos, vários estudos realçaram o duplo papel da microbiota intestinal na preservação da saúde. Certas bactérias têm a capacidade de ativar o sistema imunitário para combater o cancro, enquanto outras, por outro lado, medeiam uma imunossupressão, permitindo às células cancerígenas escaparem do sistema imunitário. As terapias convencionais no combate ao cancro incluem cirurgia, quimioterapia, radioterapia e imunoterapia. No entanto, limitações, tais como a falta de especificidade, citotoxicidade e multirresistência representam um desafio substancial para o tratamento do cancro. As abordagens tradicionais para a manipulação do microbioma, como antibióticos, dieta, prebióticos, probióticos e transplante de microbiota fecal – uma abordagem emergente -, demonstraram melhorar a eficácia das terapias tradicionais contra o cancro, como a quimioterapia e a imunoterapia. De forma a superar as limitações das terapias convencionais, uma melhor compreensão dos mecanismos relacionados com a progressão do cancro permitiu o desenvolvimento de sistemas de libertação de fármacos baseados em nanotecnologia que revolucionaram o tratamento do cancro. Destacam-se os avanços nestes sistemas que visam aumentar a eficiência da terapia através da modulação/manipulação da microbiota intestinal. Nesta dissertação, exploramos a importância da microbiota na tumorigénese e na terapia do cancro, a sua interação com o sistema imunitário e como estratégias direcionadas à microbiota podem melhorar a eficácia do tratamento do cancro, como estratégias tradicionais e sistemas de libertação de fármacos baseados em nanotecnologia.

This paper argues that the integration of texture analysis in image classification may help to increase the overall accuracy in urban cartography, by reducing the problem of spectral variability. In a first phase, images were classified with the following algorithms: Parallelepiped, Minimum Distance, Mahalanobis Distance, Maximum Likelihood, Spectral Angle Mapper, Binary Encoding, and Neural Net. The best results in each land cover class were selected, producing two pre-final maps, one with urban classes and another with non urban. Texture analyses were applied in the first result for detecting and correction of errors in the residential class. In a second phase the following image transformations were implemented: Minimum Noise Fraction, Spectral Unmixing, and Mixture Tuned Matched Filtering. This step allowed the production of masks for the different urban classes. An increase in the overall accuracy occurred between the first and second phases, namely form the Maximum Likelihood classifier (North image 73%, South image 76%) to around 80% in the final mapping.

O cancro pancreático é uma patologia fatal, com mau prognóstico e taxa de sobrevivência a 5 anos bastante reduzida. A sua gravidade prende-se com o seu diagnóstico tardio, que é provocado pela ausência de sintomas específicos numa fase mais antecipada e pela falta de biomarcadores específicos capazes de providenciar um diagnóstico precoce. O CA 19-9 é uma glicoproteína cujos níveis se encontram elevados nestes doentes e que corresponde, atualmente, ao biomarcador de eleição para o cancro pancreático. Todavia, este possui algumas limitações no que diz respeito à sua prestação enquanto meio de diagnóstico, já que não permite o estabelecimento de um diagnóstico precoce e não possui especificidade ou sensibilidade ótimas. Consequentemente, é urgente que sejam identificados biomarcadores capazes de detetar esta patologia numa fase mais precoce. A glicosilação (processo através do qual os glicanos são covalentemente ligados a proteínas ou lípidos, formando glicoconjugados) encontra-se alterada no cancro pancreático. As lectinas correspondem a um grupo de proteínas com uma distribuição de enorme abrangência na natureza, com capacidade de se ligarem por afinidade a recetores glicosilados. A ligação estabelecida entre lectinas e glicanos é comparável à que se observa entre anticorpos e antigénios. Assim, as lectinas representam uma ferramenta com enorme potencial na identificação de possíveis biomarcadores, sendo estes maioritariamente glicoproteínas. Esta monografia procurou recolher vários exemplos da utilização de lectinas neste contexto. Foram encontradas publicações que relacionam o aumento da expressão de glicanos e glicoproteínas com o cancro pancreático, revelando o seu potencial como biomarcadores. Outros estudos focaram-se na identificação de glicoconjugados ligados a exossomas secretados, com acumulação sérica, por doentes com cancro pancreático. Contudo, a abordagem mais promissora parece ser a que visa o estabelecimento de um painel de biomarcadores, composto por vários glicanos e glicoconjugados. Mais especificamente, foram encontradas duas descrições que identificaram, através de técnicas que envolviam o uso de lectinas, painéis de biomarcadores que demonstraram possuir uma prestação enquanto meio de diagnóstico superior à do CA 19-9. O primeiro era constituído por CA 19-9, variantes de sLeX e N-acetilactosamina sialilada do tipo 1, enquanto que o outro era constituído por CA 19-9, α-1-antiquimiotripsina, tromboespondina-1 e haptoglobina.

A retina, o tecido que mais oxigénio consome por unidade de área, possui um complexo sistema de autorregulação vascular. Este mecanismo permite manter o adequado fornecimento de oxigénio e nutrientes à retina em condições de hipóxia ou alterações da pressão arterial, por exemplo. Na maior parte dos estudos existentes, as respostas vasculares da retina foram avaliadas com recurso a técnicas de imagem que se limitam à avaliação dos vasos de maior calibre. A possibilidade de analisar em maior detalhe estes mecanismos poderá ajudar a compreender melhor os processos envolvidos na autorregulação microvascular da retina, tanto em condições fisiológicas como de doença. A angiografia por tomografia de coerência ótica (OCTA) é um exame rápido, seguro, não-invasivo, tridimensional e de alta resolução da microvasculatura retiniana. O objetivo principal desta tese foi estudar a reatividade vascular da retina usando OCTA, em indivíduos saudáveis e com diabetes tipo 1 (DM1), e discutir potenciais aplicações clínicas. Nesse sentido, desenvolvemos uma série de trabalhos experimentais multidisciplinares. A primeira publicação constitui a prova de conceito sobre a capacidade daOCTA detetar uma resposta vascular retiniana. No segundo artigo, utilizou-se OCTA para estudar alterações microvasculares estruturais da retina em pacientes com DM1 sem retinopatia. O terceiro manuscrito consiste num protocolo metodológico em que a OCTA é utilizado para estudar respostas vasculares retinianas a estímulos vasodilatadores e vasoconstritores, utilizando dois testes padronizados - hipóxia e exercício isométrico, respetivamente. Na última publicação, aplicou-se este protocolo a doentes com DM1 sem evidência de retinopatia, e verificou-se que estes apresentam alterações nas respostas autorregulatórias da retina. Os estudos realizados no âmbito desta tese destacam o potencial de otimização da tecnologia OCTA no sentido de combinar uma análise funcional ao angiograma estrutural atualmente isponível. A metodologia desenvolvida nesta tese para o estudo da microcirculação retiniana constitui um ponto de partida para futuras aplicações clínicas da OCTA, não só em Oftalmologia mas também em outras áreas, como a Medicina Cardiovascular e Neurociências.

Objetivo: Avaliar a eficácia de uma adaptação transcultural da Psicoterapia de Grupo Centrada no Significado (PGCS) na melhoria da Qualidade de Vida (QdV), bem-estar espiritual e psicológico em doentes com cancro, e os processos terapêuticos de mudança promovidos pela psicoterapia. Métodos: Após a adaptação transcultural do manual standardizado da PGCS, foi realizada uma restruturação no número de sessões para garantir a viabilidade do estudo. Os participantes (n=91) com queixas psicológicas foram distribuídos, de acordo com a sua preferência, em 2 grupos: PGCS (n=51) e Care As Usual (n=40). Para a avaliação da eficácia, os outcomes primários foram a melhoria da QdV e bem-estar espiritual, e os secundários: redução da depressão, ansiedade e distress. Foram realizadas duas avaliações (intervalo de 1 mês) usando os seguintes instrumentos: Termómetro do Distress, McGill Quality of Life Questionnaire (MQOL), Functional Assessment of Chronic Illness Therapy – Spiritual Well-Being Scale (FACIT-Sp-12), e Hospital Anxiety and Depression Scale (HADS). Foram realizadas análises estatísticas quantitativa (tipos intent to treat [PGCS = 51 vs. CAU = 40] e, a posteriori, per protocol, com exclusão dos drop-outs [PGCS = 38 vs. CAU = 40]), nomeadamente ANCOVA para testar os efeitos de grupo, e mista para avaliação dos processos terapêuticos. Resultados: Foi verificado um efeito de grupo, de dimensões pequenas a elevadas, no qual o grupo da PGCS apresentou um aumento na QdV (b=0.81, p=.013, η2p=0.073), mas não no bem-estar espiritual, e um efeito de grupo, de dimensões pequenas a médias, com melhoria na depressão (b=-1.14, p=.044, η2p =0.048) e no distress (b=-1.38, p=.001, η2p=0.127); no que diz respeito ao bem-estar espiritual, comparando os valores da média da FACIT do grupo PGCS, antes e depois da intervenção, verificou-se que estavam acima da média do score total (os resultados foram suportados na análise per protocol). Constatou-se um efeito moderador da presença em ≥ 3 sessões na relação entre a o distress no início da psicoterapia e a QdV no final da intervenção, bem como o impacto das “Fontes Históricas do Significado” nos processos terapêuticos de mudança. Conclusões: Os resultados suportaram a eficácia da PGCS na QdV e no bem-estar psicológico, mas não para o bem-estar espiritual, embora, no último caso, o resultado necessite de ser contextualizado nos valores baseline da amostra.

Infective endocarditis (IE) is an infrequent clinical condition with a challenging diagnosis and management. An infection of the endocardium, prosthetic or intracardiac devices predominantly caused by bacteria occurs, with a multisystemic involvement and heterogeneous clinical presentation. A long hospitalization course is usually mandatory. Despite several advances in the fields of medical imaging, microbiology techniques, antibiotic and cardiac surgery, complications are common, with fatal outcome still being a frequent finding. Its incidence rate in developed countries from Europe and North America is estimated between 3 and 12 per 100000 people. A progressive shift in the epidemiology of affected patients has been observed. Older patients, with a higher burden of comorbidities and long-term survivors of repaired structural or congenital heart disease have been progressively replacing the former stereotype of younger patients with rheumatic valve disease described in medical conferences more than one century ago. Likewise, more aggressive infectious agents such as Staphylococcus or Enterococcus have been replacing the dominance of Streptococcus in the last decades. Early aggressive surgical management of such patients has become the new standard. Still, prognosis continues poor with an in-hospital mortality rate ranging between 15 and 25%. In industrialized countries, a generalized growing trend noted in the incidence rate of IE and a shift in its epidemiology have been a consequence of the evolution in Medicine itself. Ageing of the population, with an increasing exposure to more invasive medical interventions, that in the case of structural heart disease have led to an increase in the prevalence of intracardiac devices and prosthesis carriers, have been in the cornerstone of these findings. In Portugal, ageing of the population has been well noted, consequently leading to a higher prevalence of comorbidities and structural heart disease. Nevertheless, there is limited understanding on the epidemiology and outcome of patients hospitalized with IE. Its impact, mainly assessed by the publication of single centre retrospective cross-sectional cohorts, lacks a populational perspective. International populational based analyses although useful, reveal significant variability. Prudence is required on the application of their conclusions in the Portuguese clinical setting. The main objectives in this thesis were: i) to provide a population-based analysis on the epidemiological and prognosis of IE in Portugal; ii) to identify temporal trends and predictors of incidence and mortality due to IE in Portugal; iii) to identify indicators of cardiac surgery for IE in Portugal and outcome (mortality); iv) to characterize the use of IE prophylaxis among physicians caring for high-risk patients in Portugal. With the purpose of understanding the published evidence on the epidemiology of IE in Portuguese hospital centres, we undertook a thorough systematic review of all relevant scientific publications concerning cohort studies of hospitalized patients with IE in Portuguese hospitals in the last three decades. The search resulted in the analysis of eighteen retrospective cohort studies, three of them exclusively surgical. One thousand eight hundred seventy two patients were described. Older patients, predominantly men with a higher involvement of native left heart valves were identified. Staphylococcus and Streptococcus were the most frequent infectious agents involved. Nearly 30% of total cohort underwent surgical intervention. Short-term mortality rate averaged 21.9% in the overall cohort, ranging between 13.1 to 16% in the post-operative subgroup. Afterwards, we conducted a nationwide retrospective temporal trend study on the incidence of IE in Portugal, between 2010 and 2018. Additionally, we analysed clinical characteristics, involved infectious agents, heart valve surgical intervention and outcomes of patients hospitalized with IE in that period. We used an administrative medical database derived from the Central Administration of Health System of the Portuguese Ministry of Health. The database included information derived from medical discharge reports of hospitalization episodes, including demographic and clinical diagnoses (coded using International Classification of Disease versions 9 and 10). Seven thousand five hundred seventy four patients were hospitalized with IE in Portuguese public hospitals between 2010 and 2018. Anonymised clinical data was used. Statistical analysis included univariate analysis and multivariate logistic regression models to evaluate factors associated with surgical intervention and all cause in hospital mortality. Odds Ratio (OR) and 95% confidence intervals (CIs) were reported for categorical variables. The analysis was conducted at a 5% level of significance. Between 2010 and 2018, 7574 episodes of hospitalization with IE were analysed. The annual incidence of IE in Portugal that period was 8.3 per 100000 people, higher in men (9.9 versus 6.8 in women per 100000 people) and peaking in patients older than 79 years old (40.6 per 100000 people). 12.4% of patients underwent cardiac valve surgery during the index hospitalization and one fifth of the total cohort died. Men were predominant (56.9% versus 43.1%). Women were older (76 versus 69 years old) and were less likely to undergo cardiac surgery (OR 0.48 – 95%CI 0.40-0.57, p< 0.001), but with a higher odd of dying in the postoperative period (OR 1.84, 95%CI 1.19-2.84, p=0.006). The sub-analysis of patients submitted to cardiac surgery (n= 937 patients) revealed that patients younger than 60 years old, with previous valve or congenital heart disease, infection with Streptococcus spp or the presence of heart failure, systemic embolization or acute renal failure were associated with a higher rate of intervention. In addition, the initial admission of a patient with a diagnosis of IE in a tertiary hospital with cardiac surgery unit was also related with cardiac surgery during the hospitalization. Nearly 74% of patients underwent single valve surgical intervention, with aortic valve being the most frequently involved. In-hospital all-cause postoperative mortality rate was 15.6%. Also, factors linked with in-hospital mortality were older age, female gender, liver, kidney and coronary disease, cardiac valve prosthesis, Staphylococcus spp, acute renal failure and sepsis during hospitalization. Furthermore, we conducted a retrospective temporal trend analysis of all patients whose basic cause of death was IE, in Portugal, between 2002 and 2018. Data was gathered from national death certificates. Three thousand six hundred thirty four people died from IE throughout the 17-year study period with an annual specific mortality rate of 2.1 per 100 000 people. 89% were at least 60 years old, and most were women (55%). Mortality rate was higher in colder months. Finally, we performed a cross sectional study based on a self-completed online questionnaire distributed to physicians, members of the Portuguese Society of Cardiology, evaluating the current practice regarding IE prophylaxis. 253 valid questionnaires were replied. 83% follow the European scientific orientations. 61% find IE prophylaxis challenging. Discrepancy between scientific orientations and some high-risk cardiac conditions or procedures was noted among responders. These findings provide novel insight into the epidemiology and prognosis of IE in Portugal. Additionally, they raise concern regarding temporal incidence, surgical management, and mortality trends compared to other developed countries settings. Our results support the implementation of a national multicentric clinical registry for further evaluation.

Introduction: Parkinson’s disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease, affecting 1% of the world population over the age of 60. The presence of a large and heterogeneous spectrum of motor and non-motor symptoms, some resistant to levodopa therapy, is usually a major source of disability that affects patients’ daily activities and social participation. Functional mobility (FM) is an outcome that merges the concepts of function with mobility, autonomy, and the accomplishment of daily tasks in different environments. Its use in PD studies is common. However, several aspects associated with its application in PD remain to be defined, hampering a wider use of the concept in clinical practice and the comparison of clinical study results. Aim: This thesis aimed to provide evidence on the appropriateness of the concept of FM in the PD field. A two-fold approach was used to this end: 1) To investigate the clinical and research applicability of the concept of FM in PD; 2) To identify the most suitable clinical and technological outcome measures for evaluating the response of PD patients’ FM to a therapeutic intervention. Methods: A narrative review using the framework of the International Classification of Functioning, Disability, and Health (ICF) was performed to explore the concept of FM when applied to PD. This first study aimed to provide a better understanding of the interaction between PD symptoms, FM, and patients’ daily activities and social participation. To identify and recommend the most suitable outcome measures to assess FM in PD, a systematic review was conducted using the CENTRAL, MEDLINE, Embase, and PEDro databases, from their inception to January 2019. During this review, we also explored the different definitions of FM present in the literature, proposing the one we believed should be established as the definition of FM in the PD field. We then conducted a focus group to explore PD patients' and health professionals’ perspectives on the proposed definition. Part of the scope of the focus group was also to investigate the impact of FM problems on patients’ daily living and the strategies used to deal with this. The study included four focus groups, two with patients (early and advanced disease stages), and two with health professionals (neurologists and physiotherapists). A second systematic review using the CENTRAL, MEDLINE, Embase, and PEDro databases, from their inception to September 2019, was performed to summarize and critically appraise the published evidence on PD spatiotemporal gait parameters. Finally, a pragmatic clinical study was conducted to identify the clinical and technological outcome measures that better predict changes in FM, when patients are submitted to a specialized multidisciplinary program for PD. Results: All the definitions found in an open search of the literature on the FM concept included three key aspects: gait, balance, and transfers. All participants in the focus group study were able to present a spontaneous definition of FM that matched the one used by the authors. All also agreed that FM reflects the difficulties of PD patients in daily life activities. Early-stage PD patients mentioned needing more time to complete their usual tasks, while advanced-stage PD patients considered FM limitations as the main limiting factor of daily activities, especially in medication “OFF” periods. Physiotherapists maintained that the management of PD FM limitations should be a joint work of the multidisciplinary team. For neurologists, FM may better express patients’ perception of their overall health status and may help to adopt a more patient-centered approach. Of the 95 studies included in the systematic review aiming to appraise the outcome measures that have been used to assess FM in PD patients, only one defined the concept of FM. The most frequent terms used as synonyms of FM were mobility, mobility in association with functional activities/performance, motor function, gait-related activity, or balance. In the literature, the Timed Up and Go (TUG) test was the most frequently reported tool used as a single instrument to assess FM in PD. The changes from baseline in the TUG Cognitive test, step length, and free-living step time asymmetry were identified as the best predictors of TUG changes. Conclusion: The information generated by the different studies included in this thesis revealed FM as a useful concept to be adopted in the PD field. FM was shown to be a meaningful outcome (for patients and health professionals), easy to measure, and able to provide more global and ecological information on patients’ daily living performances. Our results support the use of FM for PD assessment and free-living monitoring, as a way to better understand and address patients’ needs. The changes in the TUG Cognitive test, the supervised step length, and the free-living step time asymmetry seem the most suitable outcomes to measure an effect in FM. Future research should focus on determining the severity cut-off for FM changes, the minimal clinical important difference (MCID) for each of these outcome measures and resolve the current obstacles to the widespread use of technological assessments in PD clinical practice and research.

As neoplasias cutâneas são o tipo de neoplasia mais comum nos seres humanos, e a incidência está constantemente a aumentar devido a mudanças nos fatores ambientais, nos estilos de vida e nos hábitos humanos, o que tornou este tema num importante problema de saúde pública. As neoplasias cutâneas podem ser benignas ou malignas, sendo que existem dois tipos principais de neoplasias cutâneas malignas, as melanoma, menos comuns, e as não melanoma, que representam a maioria dos diagnósticos, e são o alvo de estudo nesta monografia. O carcinoma basocelular, com origem nas células da camada basal da epiderme, e o carcinoma de células escamosas, com origem nos queratinócitos, são os dois tipos principais de cancro cutâneo não-melanoma. Apesar de existirem vários fatores de risco associados ao desenvolvimento das neoplasias cutâneas não-melanoma, o principal é a exposição à radiação ultravioleta, que causa mudanças progressivas nas células da pele. Consequentemente, as zonas do corpo com exposição regular à radiação ultravioleta, tais como a cara, a cabeça, o pescoço e os braços têm maior probabilidade de desenvolver lesões cutâneas malignas ou pré-malignas. A prevenção é crucial para diminuir o risco de desenvolvimento destas neoplasias, quer seja através do uso regular de protetor solar ou de dispositivos médicos tópicos que combinem princípios de fotoproteção e de fotorreparação, quer seja através da adoção de medidas que previnam a exposição intensa à radiação ultravioleta. Independentemente da estratégia, o farmacêutico desempenha um papel fundamental na consciencialização e no aconselhamento a realizar ao utente. Foi no âmbito da intervenção que os farmacêuticos têm perante este tipo de neoplasias na farmácia comunitária que foram desenvolvidos 2 folhetos de aconselhamento, um para os profissionais de saúde e um para os utentes. Embora as modalidades cirúrgicas continuem a ser a base do tratamento, novas abordagens são necessárias para reduzir a morbilidade e a mortalidade. Portanto, a gestão das neoplasias cutâneas necessita de estratégias mais eficazes, seguras e acessíveis, tanto para o tratamento, como para a prevenção. E é nesta perspetiva que o uso de fitoquímicos, a nanotecnologia e a imunoterapia são consideradas as abordagens do futuro.

The thymus generates central immune tolerance by producing self-restricted and self-tolerant T-cells, while the parathyroid glands regulate extracellular calcium homeostasis through the production of the parathyroid hormone (Pth). Despite their functional differences, they share a common endodermal origin in the pharyngeal region, which in avian corresponds to the endoderm of the 3rd and 4th pharyngeal pouches (3/4 PP). The involvement of several transcription factors and signalling pathways (including the Hedgehog pathway) during the early stages of thymus and parathyroid glands (T/PT) development has been reported over the years. However, the molecular mechanisms and interactions between major signalling pathways regulating their early development are still poorly understood. Namely, the potential contribution of Notch signalling – one of the major pathways involved in cell-fate determination and boundary formation – at these early stages remains unknown. Recently, and using the avian model, we observed the expression of Notch-related molecules in the presumptive territories of T/PT. In addition, during my master’s thesis I showed that the pharmacological inhibition of Notch signalling at these stages of T/PT development blocked Gcm2 (parathyroid marker) and altered Foxn1 (thymic marker) expressions, detected through in situ hybridization. These data suggest a potential role of Notch signalling during thymus and parathyroid glands early development. In addition, Notch and Hedgehog pathways have been shown to interact in several biological contexts. In this thesis, we investigated the role of Notch signalling at the early stages of T/PT development, and its possible interaction with Hedgehog in this context. Using the quail-chick developmental model and pharmacological inhibitors in vitro and in vivo, we show, for the first time, that Notch is crucial for T/PT common primordium development and for parathyroid formation. Notch signalling was found to be required (within a 48h time-window) for the normal expression of Foxn1 and Gcm2 at early stages of development. Moreover, Notch signals within this time-window were found to be crucial for parathyroid glands formation. We also show that Hedgehog acts upstream of Notch during T/PT early development. Hedgehog positively regulates the median domains of the pouch endoderm – the Gata3+/Gcm2+ anterior domain and the Lfng+ posterior domain – which seem to be more Hedgehog-responsive than the pouch tips, namely the dorsal tip where the thymus is formed. In addition, we provide evidence that the Lfng-expression domain is involved in the definition of the dorsal/posterior boundary of Foxn1/thymic rudiment. To clarify the tissue-specific role of Notch signalling at the early stages of T/PT development, isolated quail 3/4PP endoderm was electroporated with a Tol2-mediated gene transfer and tetracycline-dependent conditional expression system of vectors generated during my master thesis to induce loss- and gain-of-function of Notch signalling. A new loss-of-function construct (pT2K-NLS-Cherry-DNMAML1-eGFP) was also developed. However, the results obtained using the tested conditions were inconclusive, limiting the analysis of tissue-specific roles of Notch signalling in T/PT development during this thesis. This work provides new insights into the role of Notch signalling in T/PT early development, and into the interactions between major signalling pathways that regulate this development. However, which tissue – the endoderm or the surrounding mesenchyme – is the main driver of these Notch effects remains unanswered.

O Noroeste de Portugal apresenta uma heterogeneidade de habitats e uma elevada pressão humana, o que impõe um desafio à conservação do lobo. Este trabalho pretendeu obter o diagnóstico dos parâmetros populacionais e ecológicos relativos ao lobo e delinear uma estratégia para a sua conservação, através de um estudo de longa duração e com uma abordagem metodológica multidisciplinar. Os resultados obtidos demonstraram: i) um importante núcleo populacional, estimado em 89 lobos/ano; ii) uma acentuada dinâmica de extinção-recolonização ao nível local, sustentada por um número reduzido de alcateias-fonte com elevado sucesso reprodutor e situadas no Parque Nacional da Peneda-Gerês; iii) uma progressiva diminuição do número de alcateias reprodutoras ao longo de século XX e até 2005; iv) uma forte incidência de mortalidade por causas humanas em toda área de estudo e período temporal analisado; v) uma elevada fidelidade espacial traduzida por distâncias de dispersão curtas e pelo uso regular dos locais de reprodução ao longo de várias décadas; vi) uma elevada dependência trófica de animais domésticos, principalmente de quatro espécies pecuárias e onde os equinos possuem um papel proeminente devido à sua elevada selectividade; vii) que as alcateias que recorrem | necrofagia como estratégia de obtenção de alimento apresentam áreas vitais inferiores às exibidas por alcateias com hábitos predatórios; viii) um dos maiores impactos económicos da predação que se encontram documentados mas com uma reduzida magnitude social; ix) uma forte componente cultural do lobo junto das comunidades rurais, reflectida por exemplo, na arquitectura rural, tradição oral e na medicina tradicional. Os resultados obtidos permitiram caracterizar, de forma abrangente, este núcleo populacional de lobo que sobrevive numa estreita relação com a actividade humana. Tal possui importantes implicações na conservação aplicada, a qual deve assegurar a viabilidade populacional, a redução do conflito com humanos e a investigação aplicada à gestão.

Epigenome-targeting drugs are an emerging class of therapeutic agents against a variety of human cancers. This results from the increasingly clear understanding of histone post-translational modifications and their role in tumorigenesis and tumor progression. Proteins of the bromodomain and extraterminal (BET) family, in particular, are epigenetic regulators of great interest as biological targets. These family of proteins is comprised of BRD2, BRD3, BRD4 and BRDT, which bind to chromatin through recognition of acetylated lysine residues (KAc) on histone tails, leading to the recruitment and co-activation of master regulatory transcription factors including the oncogene MYC. Preclinical modulation of BET protein function in malignant models through small molecule inhibition has therefore resulted in marked phenotypic changes and promising therapeutic benefits, driving multiple effectors into clinical evaluation. However, early clinical trials have had modest results with only a few, short-lived, responses in both hematologic and solid tumors. Relevant toxicities were observed in many patients, including severe thrombocytopenia, fatigue, gastrointestinal (GI)-side effects, nausea, vomiting, and which significantly limited compliance to treatment. The targeted delivery of BET inhibitors to cancer cells can, on the other hand, markedly improve their therapeutic index and overall efficacy. Through the conjugation of the therapeutic agent to a tumor-cellspecific ligand via a cleavable linker, it is possible to enhance the accumulation of drug at the tumor site while sparing healthy cells and the associated collateral toxicity. This project describes the engineering of a conditionally stable construct for the efficient, targeted and traceless release of a BETbromodomain protein effector in cancer cells. Based on published evidence and organic chemistry methodologies, a BET inhibitor was designed to retain high binding efficacy to target proteins and potent antitumor activity, while enabling targeted delivery approaches. The derivatised compound, featuring a tertiary amine suitable to accommodate a self-immolative release mechanism, engaged BET protein targets with great affinity as determined by different biophysical assays. Crystallography studies and molecular modeling of compounds in complex with target proteins provided further mechanistic insights into their mode of binding, revealing unprecedented bond formation and establishing a rationale for the exquisite binding observed. At the cellular level the tertiary-amine containing BET inhibitor exhibited potent antitumor activity against several human cancer cell lines from different tissues. Particularly in the context of prostate cancer, cellular target engagement strategies have shown successful binding of compounds to BET bromodomain proteins, while flow cytometry analysis displayed potent perturbations of cell cycle progression. Concomitantly, a substantial suppression of Myc protein levels was observed following compound treatment in a dose- and time-dependent manner, further corroborated by transcriptome analysis data showing a significant down-regulation of MYC and MYC-related gene signatures. Additional transcriptional perturbations were found in several growth-promoting gene signatures and known downstream effectors of BET bromodomain protein activity, further supporting the antitumoral efficacy and therapeutic potential of the tertiary-amine containing BET inhibitor. Finally, the derivatised BET bromodomain effector was assembled in a unique ligand-targeted conjugate for its selective delivery in prostate cancer cells. The tertiary-amine functionality of the drug was used to tether a self-immolating motif, which allows for intracellular release upon an enzymatic trigger, further conjugated to a ligand that specifically targets prostate cancer cells. The data observed confirmed the labile nature of the release mechanism and selective liberation of the tertiary-amine derivative in the presence of a triggering event. Furthermore, in a mice model of prostate cancer it is shown that the unique ligand-linker-BET inhibitor conjugate has a remarkably superior therapeutic activity than that of the BET inhibitor alone, thus suggesting a therapeutic advantage over the nontargeted counterparts.

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