Repositório RCAAP

There have been deep changes in societies during the last decade. As a result, schools face new challenges, such as avoiding exclusion by promoting inclusion. In this paper we present the findings of our efforts to use collaborative work as a mediation tool in order to achieve more inclusive learning settings. This work starts from the assumption that learning should be seen as a communicative process. This builds on the ideas of Vygotsky, who stressed the importance of social interactions in the development of complex functions and of working in the zone of proximal development in order to promote children's development. The study used a critical and ethnographic approach and thus peer interactions were implemented as a daily practice. Data were collected through participant observation (audio and videotaped), questionnaires, tasks inspired in projective techniques, interviews, reports, and sets of materials gathered by the teachers. The findings illuminate the role of collaboration in facilitating more positive attitudes towards academic learning and mathematics, promoting students' socialisation, their socio-cognitive and affective development, and their school achievement.

O treino e qualificação são um pré-requisito, legal e normativo, para os colaboradores envolvidos na preparação de medicamentos antineoplásicos. Tradicionalmente, a formação é baseada em leitura e prática supervisionada. Este projeto propõe uma abordagem inovadora ao treino e qualificação de operadores, utilizando simulação, gamificação e ferramentas digitais para criar um Escape room virtual. O objetivo principal é o desenvolvimento de um protótipo de Escape room virtual que proporcione ao utilizador uma experiência imersiva com foco na demonstração de competências. As etapas para a criação do Escape room virtual incluem Planeamento, Design, Desenvolvimento, Testes, Implementação e Melhoria contínua. O âmbito foi restrito às três primeiras. Na etapa de Planeamento, foram estabelecidos objetivos específicos, que englobam a criação de um ambiente virtual imersivo, a promoção do pensamento crítico, a disponibilização de feedback interativo e a implementação do acompanhamento do progresso dos operadores. Na fase de Design, foram elaborados o conteúdo interativo e a narrativa do jogo. A narrativa enfatiza a busca pelo código e a importância da segurança do operador e da qualidade e segurança das preparações, sendo essencial para criar uma experiência imersiva. O cenário é composto por cinco salas interconectadas, incorporando imagens em 360º de alta resolução para proporcionar realismo e familiaridade aos jogadores. A conceção dos desafios foi planeada, com a finalidade de promover o desenvolvimento do pensamento crítico, abordando diretamente as competências técnicas essenciais no treino e qualificação dos operadores. A fase de Desenvolvimento está atualmente em curso e envolve a construção prática do Escape room virtual com base nos requisitos e designs previamente definidos. Esta fase inclui a integração de imagens em 360º, a navegação interativa, a implementação de elementos visuais e sonoros e a criação de desafios. Foram estabelecidas métricas para avaliação da ferramenta, abrangendo a satisfação dos operadores e a eficácia do processo de aprendizagem. Este projeto representa uma inovação significativa na abordagem ao treino e qualificação de operadores, oferecendo uma ferramenta digital imersiva e educacional com elevado potencial de evolução.

O plasma humano contém muitas proteínas que são de grande importância médica. Após o fraccionamento de pools de plasma, proveniente de milhares de dádivas, obtém-se os medicamentos derivados do plasma, também designados por hemoderivados. Estes medicamentos são cruciais na profilaxia e tratamento de doentes com deficiências imunológicas, doenças autoimunes e inflamatórias, distúrbios hemorrágicos e uma variedade de deficiências congénitas. Todo o processo de produção de hemoderivados leva a que no final, estes produtos reúnam três premissas essenciais: eficácia terapêutica, tolerância clínica e segurança viral. Devido a possíveis problemas relacionados com transmissão de doenças infecciosas, a prescrição, dispensa e administração é muito rigorosa, sendo controlada por normas legais em todo o mundo, permitindo uma rastreabilidade destes produtos. Esta monografia aborda a importância terapêutica de cada um dos hemoderivados utilizados em Portugal, explicando o seu mecanismo de acção e caracterizando sumariamente a patologia envolvida. Os medicamentos derivados do plasma incluem a albumina humana, as proteínas de coagulação, as proteínas de anti-coagulação, a imunoglobulina humana e as imunoglobulinas específicas. A utilização de hemoderivados é cada vez maior e uma vez que o plasma é um bem escasso, abordaremos as diferentes técnicas de produção de medicamentos não derivados do plasma que tenham a mesma função.

Objetivo: Realizar uma revisão sistemática da literatura sobre os estudos de avaliação económica realizados aos serviços farmacêuticos, em contexto comunitário e a nível hospitalar, publicados entre 2016 a 2022. Métodos: A seleção de artigos foi realizada entre janeiro e março de 2023, através das bases de dados – OVID MEDINE e PubMed. Palavras-chaves como “Economic Evaluation”, “Health”, “Health Economics”, “Pharmaceutical Care”, “Pharmaceutical Services”, “Cost-effectiveness”, “Cost-Utility”, “Community Pharmacy”, “Hospital” e “Pharmacists” foram usadas neste processo. Os estudos foram incluídos nesta revisão sistemática quando cumpriam com os critérios de inclusão previamente definidos. Estes critérios consistiam em artigos com acesso à totalidade do seu conteúdo, apresentados em Inglês, publicados entre 2016 e 2022. Avaliações económicas dos serviços farmacêuticos realizados em hospitais e na comunidade usando metodologias como CEA, CUA e CBA (Análises de custo-efetividade, custo-utilidade e custo-benefício, respetivamente) foram também consideradas como critério de inclusão. Resumo de Dados: Foram incluídos 17 estudos nesta revisão sistemática. Os estudos CEA e CUA tiveram maior destaque, enquanto que CBA foi a metodologia menos utilizada. Os serviços farmacêuticos realizados em contexto comunitário foram efetuados através de intervenções lideradas por farmacêuticos, com resultados clinicamente positivos, mostrando uma grande tendência para serem custo-efetivos e rentáveis, quando comparados com as práticas comuns. Os serviços farmacêuticos hospitalares incluíam, na sua maioria, a integração de um farmacêutico numa equipa multidisciplinar, proporcionando benefícios clínicos aos doentes, apresentando uma boa relação de custo/qualidade. Conclusões: Análises económicas têm sido realizadas globalmente de forma a perceber quais os serviços mais eficazes, com maior relação de custo-efetividade, de forma a que as entidades responsáveis percebam onde alocar os seus recursos. A maioria destes serviços farmacêuticos cumprem com estes critérios positivos.

Enquadramento A Conditional Marketing Authorization (CMA) é um instrumento que visa facilitar o acesso precoce a medicamentos por parte de pacientes com necessidades médicas não satisfeitas, tornando-se cada vez mais essencial no panorama regulamentar farmacêutico. Nesta monografia, foi realizada uma análise abrangente da base de dados EU PAS Register, pertencente à União Europeia (UE), com foco específico na sua aplicação e importância no contexto de medicamentos aprovados por CMA desde abril de 2013 até junho de 2023. A EU PAS Register é uma base de dados centralizada que regista e divulga informações essenciais sobre estudos pós-autorização destinados a avaliar mais aprofundadamente a segurança, eficácia e padrões de utilização de produtos medicinais. Esta pesquisa investiga o enquadramento regulamentar, a compilação de dados e os resultados de estudos pós-autorização para medicamentos com CMA concedida na UE. Objetivos O objetivo deste estudo é duplo. Em primeiro lugar, procuramos analisar a evolução da CMA, enquanto um caminho para acelerar a aprovação de medicamentos e alguns outcomes já relevantes na inovação farmacêutica e no cuidado ao paciente. Em segundo lugar, procuramos realizar uma análise aprofundada dos estudos pós-autorização, registados na EU PAS Register, realizados para medicamentos aprovados sob CMA, identificando o seu âmbito, metodologias, descobertas e fornecendo algumas estatísticas a esse respeito. Métodos Esta pesquisa adota uma abordagem mista, combinando uma revisão narrativa da literatura relevante e a extração e análise de dados a partir da EU PAS Register e dos documentos da EMA de medicamentos aprovados por CMA entre abril de 2013 e junho de 2023. Ao sintetizar e contextualizar as conclusões, através de tabelas e análises percentuais, esta pesquisa visa contribuir para uma compreensão mais profunda da interação entre a CMA e a importância mais ampla no desenvolvimento de medicamentos, vias de aprovação rápida e segurança do paciente dentro da União Europeia. Resultados Os resultados deste estudo destacam a importância e o contínuo aumento da EU PAS Register como uma ferramenta vital para monitorizar e melhorar as avaliações pós-autorização. Além disso, lançam luz sobre o papel em evolução da CMA na promoção da inovação, partilha de valor em saúde e saúde pública. Ao explorar essas dinâmicas, esta pesquisa fornece outcomes sobre o número de medicamentos aprovados por esta via e respetivos estudos, bem como as suas principais características e requisitos neste âmbito.

A monitorização terapêutica (TDM) em psiquiatria é extremamente importante na minimização do impacto que a variabilidade interindividual pode ter na efetividade terapêutica, reduzindo também o potencial de Reações Adversas Medicamentosas (RAM). A Clozapina é um antipsicótico ‘atípico’ extensamente utilizado, constituindo a referência no tratamento da esquizofrenia refratária. As concentrações séricas de CLZ apresentam alta correlação com os outcomes terapêuticos. Segundo as guidelines europeias de consenso para a TDM em neuropsicofármacos, o intervalo terapêutico para a CLZ é de 350-600 ng/ml. Este estudo pretende avaliar os níveis séricos de CLZ em doentes psiquiátricos seguidos no Hospital Beatriz Ângelo, a existência de potenciais interações, a ocorrência de RAM e duração do internamento. Este é um estudo observacional retrospetivo que engloba doentes psiquiátricos internados e/ou em ambulatório entre 2012 e 2022. Os dados foram recolhidos do processo clínico eletrónico, tendo sido obtidos os seguintes parâmetros: sexo, idade, regime assistencial, diagnóstico, dose total diária, concentrações séricas, interações, RAM e duração do internamento. A análise estatística foi realizada em PythonTM 3.12.0 e Microsoft Excel 2019. Foram incluídos 189 doentes, a maioria do sexo masculino (58%). A mediana de idade da amostra foi de 42 anos (16-84), em que 57% se encontravam em regime de ambulatório. O diagnóstico mais frequente foi esquizofrenia (50%). Observaram-se 701 doseamentos de CLZ. Apenas 20% estavam dentro do intervalo recomendado (mediana 247 ng/ml, 3 -2511), 61% apresentavam níveis infraterapêuticos e 19% supraterapêuticos. Não houve correlação significativa entre a dose total diária e os níveis sanguíneos, Pearson(r): 0,36, 0,10 e 0,04 respetivamente para os intervalos infra, normal e supraterapêutico. Verificou-se que 32,3% doentes tinham prescrito pelo menos um fármaco com potencial risco de ‘interação X’. Verificou-se a ocorrência de RAM em 12,2% dos doentes. Apesar da importância de manter os níveis adequados de CLZ, a maioria dos doentes apresenta níveis séricos fora do intervalo recomendado. Os farmacêuticos devem monitorizar os valores séricos de CLZ e recomendar ajustes de dose, a fim de aumentar a efetividade e promover a segurança. No âmbito deste estudo projetou-se o desenvolvimento de uma WEB-APP para farmacocinética com CLZ, com base num modelo de machine learning.

A Tomografia por Emissão de Positrões (PET) consiste numa ferramenta funcional inestimável no contexto moderno da medicina atual. O presente trabalho aborda a utilização da PET para fins de diagnóstico bem como os seus princípios, métodos e constituintes radionuclídeos, os quais servem de base para a discussão de novas técnicas, dispositivos e radiofármacos que contêm o potencial de melhorar a situação clínica dos utentes submetidos ao procedimento. Os radiofármacos. apresentam especificidade para um tecido alvo, o qual é analisado através da libertação de energia na forma de positrões; estes positrões sofrem aniquilação e emitem fotões que são posteriormente detetados e traduzidos numa imagem a qual é posteriormente examinada. Cada um dos radiofármacos possui caraterísticas e mecanismos de captação diferentes. Um dos radiofármacos mais comuns em PET é o 18F-FDG, constituído por uma molécula com estrutura química muito semelhante à glicose, a fluor-2-desoxi-D-glucose (FDG). A sua afinidade com o alvo resulta do facto de ser um análogo da glicose, tornando-o um candidato típico para o diagnóstico de todo o tipo de doenças em que haja consumo de glicose pelas células afetadas, como as doenças do foro oncológico, em doenças neurológicas ou em cardiologia. O radiofármaco 11C-metionina, representa um bom indicador da presença de tumores, especialmente os cerebrais, devido ao elevado transporte transmembranar de aminoácidos associado à elevada atividade proliferativa das células tumorais. O 68Ga-PSMA-11 é um radiofármaco bastante utilizado em tumores neuroendócrinos graças a ter sido desenvolvido como um análogo dos recetores de somatostatina (SSTRs), enquanto no cancro da próstata, o 68Ga-PSMA-11 também apresenta maior especificidade do que outros radiofármacos seus concorrentes. A proteína PSMA (antigénio específico da membrana prostática) é encontrada em muitos órgãos do organismo humano, apresentando a sua expressão máxima nos tumores da próstata. O desenvolvimento da PET não se baseia apenas no radiofármaco utilizado. Do mesmo modo, não se pode negligenciar o equipamento que realiza as leituras, e gera as imagens sendo este cada vez mais potente, preciso e capaz de gerar imagens mais nítidas. Por outro lado, a capacidade computacional crescente no século XXI é uma parte relevante nos caminhos futuros da PET.

Contexto: O fumarato de dimetilo, fármaco utilizado na esclerose múltipla, e a rutina, um bioflavonóide, são ambos agentes anti-neuroinflamatórios relacionados a doenças degenerativas, apresentando, porém, uma fraca solubilidade e uma limitada biodisponibilidade. Para contornar estas questões, a nanotecnologia tem feito avanços notáveis na melhoria de tais problemas. Assim, nanopartículas híbridas lipídico-poliméricas foram sintetizadas, aproveitando o benefício de ambos os componentes para melhorar o efeito terapêutico e facilitar a administração por via intranasal, uma vez que existe uma ligação anatómica entre a cavidade nasal e o sistema nervoso central. Objetivo: O propósito deste estudo é avaliar como diferentes quantidades de diversos excipientes na formulação afetam a caracterização físico-química, bem como determinar a técnica de preparação mais eficaz. Métodos: Nanoprecipitação modificada, em que o componente orgânico consiste em fosfatidilcolina ou num lípido peguilado dissolvido em etanol, enquanto o componente polimérico é representado pelo ácido hialurónico dissolvido em água. As duas primeiras formulações foram produzidas apenas com o recurso ao sonicador, enquanto as restantes formulações foram produzidas com o método da bomba de seringa de perfusão, envolvendo a adição gradual de gota a gota de óleo na água. Ambas as abordagens foram seguidas de evaporação do solvente e caraterização físico-química, juntamente com a eficácia do aprisionamento das substâncias ativas. Resultados: A nanoprecipitação modificada feita com o sonicador produziu nanopartículas maiores do que as feitas com o auxílio da bomba de seringa de infusão e a distribuição de tamanho foi heterogénea na maior parte das formulações. Em geral, a percentagem de poloxâmero, colesterol, palmitoiletanolamida, a escolha do componente lipídico e a ausência de ácido hialurónico afetam o tamanho das partículas das formulações. A formulação de 8 poderá ser a mais adequada para a administração intranasal de fumarato de dimetilo, enquanto as formulações 13 ou 14 poderiam transportar rutina pela mesma via.

A Esclerose Múltipla é uma doença neurológica que afecta o sistema nervoso central, onde linfócitos auto-reactivos promovem um processo de inflamação com proliferação de linfócitos T. Esses linfócitos activam também a microglia, que conduz a lesões na mielina, desacelerando o fluxo de impulsos elétricos para determinada região do corpo, consoante o local onde ocorre a desmielinização. Por esta razão, os sintomas sentidos pelos doentes portadores de Esclerose Múltipla, são muito diferentes entre si, dificultando o processo de diagnóstico. À luz do conhecimento actual, a susceptibilidade genética, os factores ambientais – como a exposição ao fumo do tabaco, a baixa exposição à luz solar e, consequentemente, os níveis baixos de vitamina D – e a dieta serão determinantes para a etiologia. A existência de uma maior incidência de Esclerose Múltipla em países industrializados, onde as dietas são mais calóricas, com um maior consumo de produtos processados, ricos em açúcar e, simultaneamente, menos nutritivas, pobres em vitaminas e minerais, tem suscitado interesse em diversos grupos de investigação. Recentemente, também se tem estudado como as opções alimentares afectam a flora intestinal e como esta alteração se relaciona com a inflamação observada nas fases iniciais da Esclerose Múltipla. Nesse sentido, a dieta do indivíduo terá um papel fundamental, podendo as escolhas alimentares mais saudáveis diminuir a inflamação. Os doentes de Esclerose Múltipla apresentam valores inferiores de alguns nutrientes, comparativamente com indivíduos saudáveis, como os níveis de vitamina D, entre outras e alguns minerais essenciais. Quando a dieta é ajustada de forma a corrigir essas diferenças, os doentes mostram melhorias na evolução da doença. O mesmo acontece com a toma de suplementos vitamínicos, nomeadamente vitamina D. Atualmente, os medicamentos disponíveis apenas conseguem atrasar a progressão da doença. No entanto, apesar dos benefícios associados à alteração da dieta, o doente não é aconselhado pelo médico, que o segue, relativamente à importância dessas alterações. Os doentes de Esclerose Múltipla são indivíduos que se mostram bastante disponíveis em alterar os seus hábitos alimentares e estilo de vida, no entanto, muitas vezes, fazem-no sem aconselhamento ou recorrendo a medicinas alternativas.

Neste trabalho, foi estudado o extrato clorofórmio-metanol da raíz de Daphne laureola L., com o objetivo de isolar e caracterizar compostos marcadores, com potencial atividade. Recorrendo a cromatografia, espectroscopia e espectrometria, foi possível identificar compostos que pertenciam a certas classes químicas que estavam de acordo com os que tinham sido previamente descritos no género Daphne: derivados fenólicos e terpenóides. Os 14 compostos isolados na raíz são 8 lihnanos: compostos A (pluviatolide), B (matairesinol), D (siringaresinol), E (lariciresinol), F (buddlenol D), J (matairesinoside), L (lariciresinol-4-O-β-D glucopyranoside, M (lariciresinol-4’-O-β-D-glucopyranoside); 1 coumarina: composto C (7- hidroxi-8-metoxicoumarina); 1 sesquiterpeno: composto G (daphneaine G); 2 biflavonóides: composto H (neochamaejasmin B) e I (chamaejasmin) e 2 glicosídeos fenólicos: composto K (siringina) e N (di-O-metil-crenatina). Os compostos H, I e G foram os compostos dominantes do extrato, uma vez que estavam presentes em maior quantidade. Toda o trabalho descrito na monografia assim como a pesquisa, os resultados e a respetiva discussão, sugerem que a Daphne laureola pode apresentar muitas atividades biológicas devido à presença de um amplo espetro de metabolitos secundários e por isso, pode ser protagonista de estudos adicionais. O potencial dos fitoquímicos é bastante conhecido e a maioria dos compostos isolados e descritos nesta monografia já teve parte da sua bioatividade estudada em diferentes contextos, tanto in vitro quanto in vivo, como compostos anti-tumorais, anti-inflamatórios, antioxidantes, entre outros.

O aumento da esperança média de vida a nível mundial tem trazido benefícios, mas, o envelhecimento inerente está intimamente ligado a uma maior probabilidade de aparecimento de doenças e de doentes polimedicados com menor qualidade de vida, podendo estas condições levar à falta de apetite. Estima-se que entre 15% a 30% da população geriátrica sofra de anorexia do envelhecimento (falta de apetite associada à perda de peso), sendo escassas as opções terapêuticas disponíveis e detendo estas efeitos adversos que dificultam a sua utilização. A redução do apetite resulta de desequilíbrios nos sistemas reguladores do apetite centrais e periféricos. A presente monografia tem como objetivo conhecer as principais plantas medicinais e produtos de saúde à base destas com utilidade terapêutica em geriatria como incrementadores do apetite. Pretende-se identificar as plantas medicinais descritas como úteis para o efeito e detentoras de monografia elaborada pela Agência Europeia do Medicamento (EMA), bem como outras plantas medicinais usadas tradicionalmente para o mesmo fim mas não objeto de monografia por parte desta. Para tal, foi realizada uma pesquisa bibliográfica na base de dados da EMA e nas bases de dados PubMed e Web of Science, segundo a metodologia PRISMA. Foram identificadas catorze monografias da EMA para uso tradicional, treze de plantas medicinais e uma de um óleo essencial, destacando-se a planta medicinal Achillea millefolium L. pela maior evidência de segurança demonstrada com um teste adequado de genotoxicidade, podendo esta planta vir a constituir uma opção terapêutica viável e segura na abordagem da falta de apetite no idoso. No decurso da pesquisa bibliográfica foram identificadas mais nove plantas medicinais ou preparações à base destas, destacando-se a preparação Rikkunshito e a planta medicinal Astragalus membranaceus. Apesar da heterogeneidade de ensaios e consequente dificuldade de comparação dos resultados obtidos entre estes, foi possível confirmar a eficácia terapêutica destas plantas/preparações na melhoria do apetite no idoso. Assim, estas podem vir a constituir mais uma linha de tratamento ou ser coadjuvante de certos fármacos para o fim terapêutico mencionado.

Portuguese schools in urban areas became multicultural during the 90s. Some students are quite distanced from the school culture. Many repeat grades. The curriculum emerges as a means of (re)organizing school practice, so that it is designed to foster inclusion. It is a tool for social mediation between the culture and knowledge of teenagers, and academic ones. It shapes the interactions between participants, cultural tools and knowledge. The principles of inclusive schooling promote the respect for diversity, underlining the need to listen to all voices of a learning community. According to the socio-cultural approach appropriating knowledge and developing competencies is a complex process. Interactive practices shape students’ academic performances. Collaborative project work has been used to promote students’ engagement. This action-research project developed an alternative curriculum in a class (grades 5 and 6) from a poor and multicultural school in Lisbon. A follow-up investigated the impact of the educational changes on the learners’ participation in school and in social practices, and on their future life. We aim at analyzing this alternative curriculum process by focussing on students’ narratives. Results highlight improvements in students’ academic and social competencies. Changing practices during compulsory education facilitated achievement and resulted in a better socialization.

O chumbo (Pb) é um metal não essencial, usado desde a antiguidade, devido às suas propriedades físico-químicas, sendo considerado como um dos contaminantes ambientais mais comuns e perigosos para a maioria dos seres vivos. O Pb está presente em diversos alimentos provenientes de solos agrícolas contaminados, como por exemplo, nas frutas e vegetais. Este composto pode causar diversos efeitos tóxicos, incluindo nefrotoxicidade, neurotoxicidade e alterações na produção de espermatozoides através da exposição oral, inalatória ou dérmica. Como tal, tem sido pertinente encontrar estratégias adicionais para diminuir a toxicidade deste metal. Neste trabalho foram avaliadas duas vertentes complementares com vista à mitigação dos efeitos nefrotóxicos do Pb, recorrendo a um agente quelante promissor, o macrociclo [15]pyN5 e ao carotenoide marinho astaxantina (ATX). O composto macrociclo foi inicialmente caracterizado por ressonância magnética nuclear (RMN) de 1H, tendo sido titulado através de um método potenciométrico, de modo a obtermos a sua concentração exata em solução aquosa. Foram realizados estudos termodinâmicos através do cálculo das constantes de protonação e de estabilidade, tendo sido também elaborado um estudo de distribuição de espécies deste quelante na presença de diferentes concentrações de Pb. Tanto o macrociclo [15]pyN5 como a ATX foram em seguida avaliados isoladamente e em conjunto com diferentes concentrações de Pb (na forma de nitrato) em células humanas renais não tumorais (HK-2), recorrendo ao ensaio do cristal violeta (CV) de modo a determinar a viabilidade celular e os respetivos perfis de citotoxicidade. O Pb demonstrou ser citotóxico nas células HK-2, revelando alterações morfológicas marcadas a partir da concentração de 10 μM e um valor de IC50 de 26,3 μM. O macrociclo [15]pyN5, revelou baixar a viabilidade celular para concentrações superiores a 5 μM. Por outro lado, a ATX não demonstrou ser citotóxica na gama de concentrações testadas até 20 μM. No que diz respeito aos ensaios combinatórios, o [15]pyN5 não mostrou conferir nenhum tipo de proteção relativamente à citotoxicidade induzida pelo Pb nestas células, enquanto que a ATX, pelo contrário, aumentou a viabilidade de células expostas a este metal, sendo esse aumento significativo para a concentração máxima de ATX testada. Em conclusão, os resultados obtidos no âmbito deste trabalho sugerem que a ATX é um composto promissor que deverá ser estudado com maior profundidade no contexto da nefrotoxicidade induzida pelo Pb.

No summary/description provided

No summary/description provided

Esta dissertação aborda os primeiros passos de um projeto pratico mais amplo, um laboratório agrovoltaico estabelecido no Campus Solar da Faculdade de Ciências. O Campus Solar, inicialmente composto apenas por painéis solares e a sua estrutura, foi transformado num laboratório operacional. Este laboratório irá permitir avaliar o potencial da abordagem combinada de geração fotovoltaica e produção agrícola. A dissertação quanto a ela, visa abordar dois desafios globais urgentes ligados ao setor agrícola: produzir mais alimentos e utilizar menos água doce. Face a desafios globais atuais, como a escassez de água (doce) e a crescente procura na produção de alimentos, são necessárias soluções inovadoras. Neste sentido, a dissertação procura integrar conhecimentos em três áreas: energia solar, sistemas agroflorestais e gestão hídrica, enquanto investiga o potencial da Internet das Coisas na promoção da agricultura sustentável, alinhando-se com os Objetivos de Desenvolvimento Sustentável das Nações Unidas. Esta iniciativa não tem apenas o propósito de facilitar a pesquisa, mas também de criar uma plataforma para estudos futuros. Com a implementação desta nova instalação, visamos viabilizar a contínua exploração dos benefícios advindos da combinação de energia solar e agricultura. Num primeiro tempo, realizou-se uma revisão bibliográfica, incluindo casos práticos como projetos em operação, mas também literatura académica. Este passo serviu como fundamento para as decisões futuras e garantir uma integração bem-sucedida. A configuração experimental foi desenhada para investigar nove tratamentos distintos, abrangendo três modalidades de irrigação (sequeiro, irrigação convencional/temporizada e irrigação adaptada/inteligente) e três níveis de exposição solar (sombreamento nulo, intermédio e máximo). No entanto, dada a natureza de longo prazo do estudo, que englobava não apenas o cultivo de plantas anuais, mas também de espécies perenes, incluindo pequenas árvores, optou-se por priorizar a sustentação e o desenvolvimento das plantas perenes nesta primeira fase. Assim, ao nos concentrarmos na variação de exposição solar, optou-se por implementar tratamentos que permitissem avaliar o impacto direto da intensidade de luz sobre as culturas, enquanto se mantinha a prática de irrigação convencional constante. Este método foi concebido para proporcionar uma compreensão de como os diferentes níveis de sombreamento, proporcionados pelo sistema agrovoltaico, influenciam as taxas de crescimento, produtividade e o estado geral de saúde das plantas. Antes de se avançar para a fase experimental, foi preciso definir o posicionamento das linhas de cultivo e determinar os diferentes tratamentos de nível de sombreamento. Para esta tarefa, recorreu-se a um programa de modelação 3D que permitiu georreferenciar o campo. Através do uso de uma ferramenta de simulação solar, conseguiu-se identificar o local mais adequado para o posicionamento do tratamento de maior sombreamento assim como o de sombreamento intermédio. Adicionalmente, refinaram-se os padrões de sombreamento ao longo das linhas de cultivo. Este processo visava identificar subtilezas no sombreamento e eventuais microclimas resultantes, uma consideração que provou ter um impacto não negligenciável nos resultados. Para algumas plantas, estar nas extremidades das linhas de cultivo demonstrou ter influência no seu crescimento. Além disso, desenhou-se e implementou-se um sistema de rega gota-a-gota, com o papel de assegurar um fornecimento eficiente e preciso de água às plantas. Este sistema incorpora quarto electroválvulas. Cada tratamento de rega é associado a uma electroválvula específica. Uma delas sendo dedicada à rega convencional, a qual não leva em consideração os diferentes níveis de sombreamento. As três eletroválvulas restantes são atribuídas à rega adaptada, cada uma correspondendo a um nível de sombreamento. No futuro, quando as linhas de cultivo forem equipadas com sensores de humidade do solo (e potencial hídrico), essa diferenciação permitirá a rega diferenciada e desfasada, ajustando-a de acordo com as necessidades específicas de cada área de cultivo. Para gerir a rega, foi proposto um modelo conceptual que envolve as seguintes componentes: arquitetura do sistema, comunicação, rede de sensores e armazenamento de dados. A comunicação foi configurada para garantir uma troca eficiente e segura de dados entre os dispositivos. Para a próxima fase do projeto, foram propostos diversos sensores que, quando implementados, fornecerão informações para uma tomada de decisão mais informada, contribuindo significativamente para a gestão agrícola. O armazenamento de dados foi projetado para incluir redundância, assegurando a preservação e integridade dos dados mesmo em cenários de falha. Das sete espécies de plantas selecionadas, destacam-se duas como variedades anuais, enquanto as restantes cinco são de natureza perene. Optou-se por integrar práticas dos sistemas agroflorestais, que combinam cultivo com a presença de árvores, desde a seleção das espécies iniciais. A cada tipo de planta, foi atribuído um indicador ajustado para avaliar o seu desempenho sob diferentes tratamentos de sombreamento. Esta abordagem não apenas enriquece a dinâmica do ambiente experimental, mas também proporciona uma perspetiva sobre como a interação entre plantas e árvores pode otimizar a produção agrícola sob sistemas agrovoltaicos. Além disso, realizou-se uma observação não quantitativa para avaliar o aumento da biodiversidade após a implementação do sistema. Durante o processo experimental, foram observadas várias tendências entre as sete variedades examinadas. O milho e as alfazemas, por exemplo, mostraram uma clara preferência pela exposição plena ao sol, ao passo que, os feijoeiros e as jovens alfarrobeiras demonstraram um desempenho superior em áreas com maior sombreamento. Por outro lado, as restantes espécies apresentaram respostas semelhantes em diversos níveis de sombreamento, evidenciando a adaptabilidade dessas culturas à integração com sistemas agrovoltaicos. Atualmente, o laboratório encontra-se em plena operação, marcando um passo significativo na realização deste projeto. A próxima fase deverá concentrar-se na medição da poupança de água resultante do sombreamento, bem como na redução da evapotranspiração. Os dados obtidos nesta etapa são aguardados com interesse, uma vez que têm o potencial de contribuir para a compreensão e aprimoramento desta abordagem inovadora.

Atualmente são diversas as doenças oculares conhecidas, e estima-se que mais de 1 mil milhão de pessoas em todo o mundo sofram de algum distúrbio visual, o que torna necessário o desenvolvimento de formulações nesta área. Apesar desta necessidade, a passagem dos fármacos pelas membranas oculares nem sempre é possível devido à anatomia e fisiologia do olho humano. Assim, é necessário a inclusão de promotores de permeação nas formulações oftálmicas, ou seja, com estes compostos será possível aumentar a permeabilidade do fármaco pelas membranas oculares. Neste trabalho de investigação foram desenvolvidas nanopartículas híbridas lípido-polímero e adicionados promotores de permeação como o Gelucire® 48/16 e HP-β-CD, também com propriedades mucoadesivas. Além disso, a adição de ácido hialurónico permite que as nanopartículas tenham maior mucoadesão. As nanopartículas híbridas poliméricas foram otimizadas para poder abranger fármacos de natureza hidrofílica e lipofílica. Para esta inclusão foi utilizada a técnica de homogeneização a quente, sendo a levofloxacina (quinolona) e o ibuprofeno (anti-inflamatório não esteróide) incorporados na fase lipídica. Posteriormente foram verificadas as propriedades físico-químicas das nanopartículas, bem como suas propriedades mucoadesivas. Em estudos in vitro foi possível verificar a captação de nanopartículas pelas células ARPE-19 e verificar a viabilidade celular dos diferentes componentes das nanopartículas. As formulações finais otimizadas tiveram tamanho médio de 264,9 ± 25,8 nm; um PDI de 0,312 ± 0,067 e um potencial zeta de -31,4 ± 2,5 mV. A adição de fármacos às nanopartículas não afetou significativamente estes parâmetros, sendo possível verificar que a eficiência de encapsulamento foi de quase 100% para o ibuprofeno, que também apresentou maior perfil de libertação. Testes in vitro demonstraram que as células ARPE-19 foram capazes de captar positivamente as nanopartículas e seus compostos não apresentaram citotoxicidade celular, sendo a viabilidade celular de quase 100%.

O termo nanotecnologia foi introduzido em 1959 pelo físico Nobel Richard Feynman, na sequência de uma apresentação intitulada "Há muito espaço no fundo". A introdução da nanotecnologia no desenvolvimento de produtos farmacêuticos para uso em humanos requer a adaptação dos quadros regulamentares existentes às propriedades exigentes dos nanomateriais, bem como ao impacto que essas propriedades apresentam no que diz respeito às alterações induzidas nas funções das células. No presente trabalho foi efetuada uma avaliação dos atuais procedimentos regulamentares para a análise dos pedidos de introdução no mercado de novos medicamentos na União Europeia e nos Estados Unidos. Realizou-se uma profunda revisão da literatura sobre os esforços que a EMA e a FDA têm feito ao longo dos anos para estabelecer diretrizes específicas para os nanomedicamentos. Com uma compreensão da regulamentação e das estratégias que estão a ser implementadas para a adaptar aos nanomedicamentos, procedeu-se à identificação de fatores que impedem o sucesso das translações clínicas. Verificou-se uma forte correlação entre a falta de diretrizes regulamentares e as dificuldades que os fabricantes encontram ao longo do processo de produção, existindo uma lacuna significativa de informação de qualidade e segurança dos nanomedicamentos, particularmente de protocolos normalizados e de CQAs. Dada esta incerteza e a carência de critérios para os fabricantes, é frequente que os nanomedicamentos terminem os ensaios clínicos com grandes margens de fracasso. Concluiu-se que tanto a EMA como a FDA têm sido cautelosas na avaliação dos nanomedicamentos e que a análise caso a caso, com base na regulamentação extensa, sólida e eficaz em vigor, é a escolha certa. Além disso, as vastas iniciativas lançadas para desenvolver orientações que cubram a falta de dados mencionada são essenciais, e a mudança para um papel mais proactivo dos reguladores é vital, com um envolvimento prematuro na fase de desenvolvimento.

Cystic Fibrosis (CF) is an autosomal recessive disorder caused by mutations on the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) gene. The gene encodes a chloride channel (Cl- ) expressed at the plasma membrane (PM) of epithelial cells. The deletion of phenylalanine 508 (Phe508del) is the most common mutation, it causes the protein to misfold and be prematurely degraded, failing to reach the PM. The use of recently clinically approved CFTR modulator drugs has changed CF management, enabling the rescue of several CFTR mutant proteins, including Phe508delCFTR folding, trafficking, and function at the PM. However, these rescued channels still exhibit evidence of a reduced half-live at the PM, indicating space for improvement in CF therapeutic strategies. Previous work of the host lab identified new cellular pathways and key interactor proteins that were shown to influence the retention of rescued Phe508delCFTR at the PM. The group identified a short list of candidate proteins that could constitute new targets for pharmacological modulation of rescued Phe508del-CFTR stability at the PM of airway cells. Therefore, the objective of this project was to validate and characterize the effect of 11 of these candidate proteins on the pharmacologically rescued Phe508del-CFTR. We found that downregulation of Calgranulin, TCP-1-Theta and FLT-1 did not change the abundance of rescued Phe508del-CFTR at the PM, but Tenascin-C downregulation did. We suggest a role for Tenascin-C in regulating Phe508del-CFTR permanence at the PM. We observed a reduction of rescued Phe508del-CFTR after Coronin 1C and Enigma knockdown, suggesting that they affect CFTR ER-Golgi traffic. We saw a reduction on CFTR mRNA levels for Ku86 knockdown, however this result still needs confirmation. We also demonstrated that βII Spectrin, PTRF, TG2 and Lamin affected Phe508del-CFTR expression, and propose an additional role for βII Spectrin in Phe508del-CFTR traffic to, and abundance at the PM.

A cosmética surge como resultado da busca pela beleza e pela preservação de uma aparência saudável, inerentes à sociedade humana. Em particular, a manutenção de uma pele saudável é um dos maiores focos desta indústria, já que os produtos de cuidados com a pele representam mais de um terço do total de cosméticos e estima-se que esse valor possa aumentar. Com o aumento da esperança média de vida, as mulheres passarão mais tempo no período pós-menopausa, caracterizado por baixos níveis de estrogénio que levam aos sinais de envelhecimento, assim como a pele mais sensível e seca. Desta forma, a procura por novos ingredientes ativos que melhorem a condição da pele é essencial para a indústria cosmética. Atualmente, essa procura tem em consideração o impacto humano nos ecossistemas, pelo que ingredientes sustentáveis que respondam às necessidades dos consumidores sem prejudicar o ambiente são valiosos. Neste contexto, surge o interesse de explorar o potencial cosmético de subprodutos industriais, uma vez que promovem uma economia circular. As vesiculas extracelulares são partículas desprovidas de núcleo delimitadas por uma membrana lipídica necessariamente libertadas por células. Estas partículas estão envolvidas em processos de comunicação celular e são secretadas por todos os organismos. Recentemente, vários investigadores observaram que, dependendo da fonte, as vesículas extracelulares apresentam propriedades rejuvenescedoras, antioxidantes e de clareamento da pele, identificando estas partículas como um possível novo ingrediente cosmético. Em vários destes estudos, foram utilizados organismos previamente reconhecidos pelos seus efeitos benéficos para a pele, como diversas macroalgas e plantas, cujas vesículas extracelulares também apresentavam propriedades cosméticas. Chlorella vulgaris é uma espécie de microalga com diversas aplicações industriais, incluindo na indústria de produtos de cuidados com a pele pelo seu potencial antioxidante, hidratante e rejuvenescedor, estimulando a produção de colagénio na pele. Apesar disso, o potencial das suas vesículas extracelulares para a cosmética não parece ter sido estudado até ao momento. As vesículas extracelulares são libertadas frequentemente durante o ciclo de vida dos organismos, pelo que é espectável que sejam libertadas para o meio de cultura durante a produção industrial desta microalga. Assim, esta tese foca-se no isolamento de vesículas extracelulares de meio de cultura industrial de C. vulgaris (CvEV) e na análise do seu possível efeito cosmético in vitro. Esta ideia apresenta-se como uma forma de encontrar novos possíveis ingredientes cosméticos em subprodutos industriais, promovendo uma inovação sustentável. Neste estudo, obtivemos CvEV usando métodos de isolamento distintos, recorrendo a ultracentrifugação (CvEV.0), ultrafiltração com membrana de poros com 100 kDa (CvEV.1) e ultrafiltração com membrana de poros com 500 kDa (CvEV.2). Também foi possível isolar CvEV recorrendo à ultrafiltração de poro com 500 kDa no dia seguinte à recolha do meio de cultura de C. vulgaris (CvEV.3). Todos os isolamentos foram apenas efetuados uma única vez, não sendo por isso possível comparar estatisticamente o conteúdo das amostras obtidas entre si. No entanto, mostrámos que o isolamento de CvEV é exequível através de métodos escaláveis num intervalo de tempo razoável após a conclusão do processo industrial de cultura de microalgas. Antes de iniciar a análise do potencial cosmético de CvEV, certificou-se que as partículas não interferiam com a atividade metabólica de queratinócitos ou fibroblastos humanos em cultura in vitro. Estas células foram escolhidas neste trabalho por serem os tipos celulares dominantes na epiderme e derme, respetivamente, as camadas mais superficiais da pele. Duas concentrações distintas de CvEV, 2x104 e 1x105 partículas/célula, foram testadas e nenhuma induziu toxicidade nem proliferação excessiva nas células, pelo que foi possível prosseguir para avaliação das propriedades cosméticas. Ao avaliar o potencial de CvEV para cosmética, foi necessário considerar as inúmeras possibilidades de atuação destas partículas na pele, assim como os principais pontos de interesse e objetivos da indústria, de uma forma pragmática. Assim, neste estudo escolhemos avaliar o potencial hidratante, rejuvenescedor, antioxidante e de reforço da epiderme das CvEV, com base nas linhas celulares presentes no laboratório e nas propriedades conhecidas de C. vulgaris. Para isso, recorreu-se a análise de expressão génica direcionada, por permitir analisar a transcrição de genes com importante valor cosmético após as células terem sido tratadas com CvEV, de uma forma acessível. Em queratinócitos, o potencial hidratante foi avaliado visando a expressão de aquaporina-3 (AQP3) e involucrina (IVL), enquanto em fibroblastos, a transcrição de uma sintase de ácido hialurónico (HAS) foi escolhida para esse propósito. O efeito de CvEV como possível ingrediente rejuvenescedor foi avaliado em fibroblastos verificando se a expressão de colagénio-1 (COL1A1) ou colagénio-3 (COL3A1) aumentava e a transcrição de metaloproteínase-1 (MMP1) diminuía, enquanto o seu potencial antioxidante foi estimado através da expressão génica de superóxido dismutase-1 (SOD1) em fibroblastos e catalase-1 (CAT1) em ambas as linhas celulares. Por fim, a possibilidade de CvEV reforçar a epiderme foi avaliada apenas em queratinócitos, examinando a expressão de queratina-5 (K5), queratina-10 (K10) e ocludina (OCL). Em geral, as CvEV não induziram mudanças na expressão dos genes analisados. No entanto, verificou-se que CvEV.2 levou a um aumento significativo de expressão de sintase de ácido de hialurónico-3 (HAS3), uma enzima envolvida na síntese de um glicosaminoglicano essencial no equilíbrio hídrico da pele, o que sugere um possível efeito hidratante de CvEV. É também de notar que CvEV.1 levou a uma diminuição da expressão de involucrina em queratinócitos basais. In vivo, este gene é expresso em queratinócitos terminalmente diferenciados, presentes nas camadas superiores da epiderme, uma vez que codifica para uma proteína essencial na impermeabilização do stratum corneum. Assim, a diminuição de expressão de involucrina em queratinócitos basais não invalida um possível efeito hidratante de CvEV. Por ter sido a primeira vez que o potencial de CvEV como ingrediente para a indústria de cuidados com a pele foi avaliado, recorreu-se a técnicas e modelos relativamente simples, de modo a explorar o máximo de possíveis efeitos promissores, de uma forma acessível. Desta forma, apenas foi estudado o efeito de CvEV a nível da expressão génica de células da pele, não permitindo concluir se estas partículas intervêm a jusante da transcrição em processos de regulação relevantes para a cosmética. Além disso, como o estudo foi desenvolvido em linhas celulares 2D, os resultados obtidos podem não ser equiparados ao efeito real das CvEV in vivo, pelo que modelos mais representativos da pele, como modelos 3D ou ex vivo, deverão ser utilizados em trabalhos seguintes. Para além das limitações acima referidas, este estudo compreendeu a análise de um número relativamente pequeno de genes e de parâmetros cosméticos, pelo que seria interessante expandir esse número recorrendo a tecnologias “ómicas”. Assim, o efeito de CvEV na pele poderia ser detetado utilizando uma abordagem de obtenção de dados a larga-escala não direcionada, uma vez que a sua ação é praticamente desconhecida. Nesta tese, foram isoladas vesículas extracelulares de um resíduo da indústria de microalgas e testadas quanto ao seu potencial como ingrediente para cuidados da pele, demonstrando que é possível procurar por novos ingredientes cosméticos usando subprodutos industriais. De facto, mostrámos que as vesículas extracelulares de uma variedade heterotrófica de C. vulgaris cultivada para ser utilizada em suplementos alimentares parecem apresentar propriedades hidratantes. Como tal, é espectável que este trabalho seja um ponto de partida para explorar o efeito cosmético de vesículas extracelulares de outras fontes industriais, incluindo outras variedades de C. vulgaris ou outras microalgas com valor industrial e cosmético, contribuindo assim para a formação de novas formas de fomentar a economia circular. Esta tese compreende uma das áreas de investigação da empresa Exogenus Therapeutics, onde a tese foi desenvolvida, o que evidencia novamente o interesse e pertinência deste trabalho.