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Neonicotinoids are the most widely used insecticides worldwide. A large proportion ends up in the soil, where they degrade slowly, and are likely to affect non-target species in the soil community, such as Collembola (springtails). Springtails play an important role in soil ecosystems by contributing to litter decomposition and nutrient cycling. Standard toxicity tests use soil exposure to toxicants, which does not allow for detailed observation of the individuals during the experiment. These tests are developed to expose organisms through soil to certain types of contaminants, but in nature springtails can also be exposed to them through their diet. We therefore aimed to, and successfully developed, a method for dietary exposure to toxicants, allowing us to observe springtails performance during exposure. The neonicotinoid imidacloprid was applied as a test substance, and we studied two springtail species, Folsomia quadrioculata and Hypogastrura viatica, with different life histories, habitat, and ecology, to assess potential difference in sensitivity. For each species, five replicates of 20 newly hatched animals were exposed through feed treated with one of two different applications: moistening the feed with a micropipette (estimated final concentration of 129 mg/kg imidacloprid) or soaking it in a solution with 129 ug/L imidacloprid, at room temperature. Moistening the Tilia cordata bark was most accurate, giving concentrations similar to the estimated nominal ones, while soaking resulted in 38 times higher concentrations than moistened measured method. With our established method of moistening the bark, we conducted a concentration-response experiment to study how imidacloprid affects different life history traits in juvenile H. viatica using 5 sub-lethal concentrations from 0.01 to 1.2 mg/kg dry bark. Due to time constraints as a result of the COVID-19 pandemic, which prevented access to the laboratory, it was difficult to analyze some endpoints for Folsomia quadrioculata, and since it was possible to register molting and measure body size in Hypogastrura viatica we conducted the second experiment only on that species. Exposure to the soil relevant concentrations of imidacloprid caused H. viatica to reach maturity late, reduced its molting frequency, and thus reduced its body size. Since these endpoints have negative impacts on Collembola egg production, the studied neonicotinoid shown negative effects on population growth and may therefore cause population-level effects. There is still little information about these two springtails species and especially on the life history traits for springtails in general. Therefore, in the future it would be important to use methods that allow the monitoring of effects on life history traits.

Um dos mais conceituados cirurgiões do seu tempo, Francisco Gentil ficou ligado ao desenvolvimento de estruturas hospitalares como o Instituto Português de Oncologia, o Hospital de Santa Maria, em Lisboa e o Hospital de S. João, no Porto. Foi, contudo, o IPO o projecto a que mais se associou. O estabelecimento oncológico de Lisboa viria a receber justamente o seu nome, também atribuído a uma artéria de Lisboa, no Lumiar (Rua Prof. Francisco Gentil).

Foi discípulo de Cascão de Anciães, que lhe incutiu o interesse pelas doenças do tubo digestivo e metabolismo. A Pulido Valente deve a prática clínica e o adestramento em cardiologia e electrocardiografia. Teve, por sua vez, como discípulos, Pinto Correia e Mário Quina, entre outros. Foi um dos mais prestigiados internistas do seu tempo, tendo-se dedicado especialmente à gastroenterologia.

Background: Psychotic spectrum features in borderline personality disorder (PD) are a long-standing phenomenon, but remarkably, to date, they have not been the focus of many empirical studies. Moreover, the comparative studies that acknowledge their links to affective psychoses are even more scarce. Likewise, the contributions of empirical research on the DSM-5 dimensional approach to this topic are also uncommon. This study seeks to identify the best set of pathological personality traits and/or symptoms that are predictors of psychotic features (psychoticism and ideation paranoid symptoms) in borderline PD and in bipolar disorder, based on the framework of the DSM-5 section III personality traits. Methods: A cross-sectional study of two clinical samples: 1) Borderline PD group of 63 participants; 2) Bipolar disorder group of 65 participants. Self-reported assessment: Personality Inventory for DSM-5 (PID-5); Brief Symptom Inventory (BSI). A series of linear and logistic regression analyses were computed. Results: Overall, the data emerging as common predictors are detachment, negative affectivity, psychoticism, depressivity, grandiosity, suspiciousness and interpersonal sensitivity symptoms. Borderline PD has the highest score in BSI paranoid ideation which emerges as its discriminating trait (Nagelkerke R2 = .58): cognitive and perceptual dysregulation (OR: 13.02), restricted affectivity (OR: 12.09), withdrawal (OR: 11.70), anhedonia (OR: 10.98) and emotional lability (OR: 6.69). Conclusions: Besides the commonality that appears to overlap both disorders with a psychosis superspectrum, the patterns of the pathological personality-symptoms underlying the psychotic features appear to reinforce a position between schizophrenia and bipolar disorders that borderline PD may occupy, highlighting the possibility of its intersection with schizoaffective/psychosis spectra. The pathological personality nature of the psychotic features emerges as a potential comprehensive trait of the phenomenological dimensions.

We will begin by approaching the transition, currently underway, from an information society to a communication society («communication turn»), a transition in which the information production is decentralized and, at the same time, by the triumph of the receiver. We will then address some of the current problems that affect communication, namely the problem of «guessing» and the dominance of opinion in the public space, the effects of biases and conspiratorial ideas, the media crisis, and its implications for the reconfiguration of the verification and communication of information centres, and the role of trust and literacy in the dynamics of reception. Finally, we will present the hypothesis that the time of communication – which is at the centre of human and social experience – is, after all, the time of ethics, and that the society of communication, which is above all a society centred in the Other and in others, both in its positivity and in its negativity, necessarily implies a nourishment of moral and ethical values that converge in a cohabitation.

In occupational environments, employees might be exposed to a diversity of microbiological agents. However, less is known about firefighter’s exposure in the work environment. Thus, this study aims to characterize the microbiological contamination in firefighter’s headquarters from Lisbon, Portugal. SARS-CoV-2 and fungal resistance profile assessment were also performed. Eleven firefighters headquarters (FFH) were assessed and the sampling campaign comprised active and passive sampling methods. The microbiological assessment covered culture-dependent and culture-independent methods. Additionally, to perform the azole resistance screening the samples extracts were inoculated in Sabouraud dextrose agar (SDA) azole supplemented media (Itraconazole (ITR), Voriconazole (VOR) and Posaconazole (POS)). In general, from all the matrices the predominant genera were Cladosporium and Penicillium. Regarding microbiological load indoors, in accordance with the scientific criteria for occupational exposure assessment (I /O ≤1), from the 11 FFH sampled, 5 (45.45%) surpassed the stipulated value in what concerns fungal levels. The same trend was reported in 7 FFH (63.63%) for bacteria. Moreover, when using the World Health Organization (WHO) suggested indoor guideline (maximum value of 150 CFU.m-3 ), the same FFH were above the stipulated limits for fungal and bacterial load respectively. Overall, the use of a multi-approach protocol for sampling and analyses allowed a broader microbial characterization. Also, fungal growth in azole supplemented media suggests the presence of multidrug resistance. Thus, further antifungal susceptibility tests should be preconized. The molecular detection of sections Fumigati and Nidulantes in additional matrices suggests molecular tools as a suitable approach overcoming culture-dependent methods limitations. Regarding SARS-CoV-2 assessment, no detection was obtained which suggest the effectiveness of cleaning in viral control. In short, these facilities are an occupational environment to have into consideration regarding the microbiological contamination. In fact, more research is needed in order to implement proper measures to reduce workers risk and minimize the exposure.

Esta tese tem como objectivo a reconstrução do diálogo intelectual entre Maurice Merleau-Ponty e Claude Lévi-Strauss, tema que em toda a sua complexidade nunca foi objecto de um estudo sistemático. Como não apontamos para uma comparação entre a obra de Merleau-Ponty' e a obra deLévi-Strauss' na sua globalidade, mas para a investigação da relação concreta entre os seus percursos teóricos, o enfoque foi colocado sobretudo, mas não exclusivamente, num período delimitado compreendido entre o princípio dos anos 30 e a morte de Merleau-Ponty. Nos primeiros dois capítulos faz-se uma retrospectiva das obras dos dois pensadores até finais da década de quarenta. O terceiro capítulo estabelece uma primeira comparação, a partir de um curso que Merleau-Ponty leccionou na Sorbonne no ano académico 1950/51 em que se elabora uma breve análise crítica da Introduction à l'oeuvre de Marcel Mauss' de Lévi-Strauss. Para considerar plenamente este encontro' inicial, foi incluído na análise um espaço sobre a questão da linguagem na reflexão de Merleau- Ponty que ganhou a partir deste período uma nova centralidade procedendo-se depois à comparação das suas abordagens à psicanálise freudiana e, em modo particular, à relação entre psicanálise e antropologia cultural. O quarto capítulo articula-se em torno de uma leitura cruzada do livro Race et histoire de Lévi-Strauss e dos comentários que Merleau-Ponty dirige nos primeiros cursos no Collège de France ao antropólogo, relativamente à sua abordagem da história. Os textos aqui considerados remontam à primeira metade dos anos 50. Já o quinto e último capítulo não se baseia propriamente nas referências explícitas que os autores possam ter formulado, mas procura detectar uma possível convergência entre a direcção que toma o pensamento de Merleau-Ponty na sua última fase, nos últimos cursos no Collège e em Le visible et l'invisible, e as obras que Lévi-Strauss publicou em 1962, Le totemisme aujourd'hui e La pensée sauvage.

Neste projeto, o nosso objetivo é usar a técnica de teste de fuzzing, que fornece dados inválidos, inesperados ou aleatórios para a entrada de um programa para nele tentar encontrar vulnerabilidades. Os resultados do teste fornecem ao programador informações para melhorar o programa, nomedamente para torná-lo mais seguro. Um ambiente de computação em grade é usado para suportar o fuzzing das aplicações usando simultaneamente os recursos de vários computadores em uma rede, a fim de paralelizar o processo e permitir tentar muitas entradas diferentes. Um trabalho de fuzzing é dividido em várias tarefas de fuzzing e distribuído aos recursos de rede que se encontrem livres para que a operação seja realizada. Um broker recebe as solicitações de fuzzing de clientes, e insere a divisão de tarefas num servidor Web, como o Apache. Quando os recursos da rede estão disponíveis, as tarefas de difusão são descarregadas a partir do servidor web e automaticamente executadas e os resultados retornados ao serviço de coordenação. O serviço de coordenação Zookeeper é usado para sincronizar o broker, o servidor web e dos recursos.

O objetivo principal desta dissertação é a otimização das plataformas de transdução compostas por filmes híbridos biocompatíveis de polidopamina e biomoléculas para aplicação em sensores óticos e eletroquímicos. Da necessidade em desenvolver multiplataformas sensíveis para deteção rápida e seletiva de diferentes tipos de analitos, surgiu o uso da polidopamina que, além de biocompatível, apresenta propriedades adesivas imobilizando, em elétrodos ou superfícies, diferentes tipos de materiais reativos a determinados estímulos. Otimizou-se o crescimento eletroquímico de filmes de polidopamina de modo a ultrapassar o carácter isolador já conhecido e a limitação de espessura inerente, por forma a albergar uma maior quantidade de lacase e, assim, melhorar a resposta cronoamperométrica de biossensores para compostos fenólicos. Para substratos de ouro o filme mais espesso (66 nm) foi crescido potenciodinamicamente; para carbono vítreo foram obtidos filmes de 180 nm em modo potenciostático pulsado. O espessamento foi possível devido à ocorrência de um fenómeno a sobrepotenciais mais elevados ( 1,1V), transversal a todos os materiais explorados (ouro, platina e carbono). Estes filmes apresentam-se muito porosos e permeáveis a espécies redox em solução, ao contrário do observado anteriormente. Em elétrodos de grafite, os filmes espessos híbridos de polidopamina-lacase exibem comportamento típico bloqueador, inviabilizando o seu uso em biossensores. Não obstante, estes apresentam cores na região do visível e são oticamente sensíveis à humidade do meio ambiente: observação inédita para filmes de polidopamina crescidos eletroquimicamente. Os filmes espessos conseguem ainda reter espécies neutras ou carregadas positivamente (hexaaminoruténio III e CO2). Foram ainda desenvolvidas diferentes plataformas imunossensoras recorrendo a filmes de polidopamina e nanopartículas de ouro ou de óxido de ferro para a deteção de anticorpos e toxinas, responsivas por eletroquímica ou oticamente por efeito de ressonância de plasmão de superfície, para aplicação em sistemas de microfluídica. Conseguiu-se detetar Ocratoxina A abaixo de 10 ppb (limite máximo UE).

Enquanto componente da gramática especialmente sensível a condicionantes extralinguísticas, sócio-históricas e culturais, o léxico constitui um domínio de diferenciação notável entre português do Brasil (PB) e português europeu (PE), que tem sido objeto de estudo frequente. São, no entanto, ainda escassos os trabalhos que consideram esta diversidade a partir da dimensão geolinguística dos territórios brasileiro e português, uma dimensão que diversos atlas linguísticos com materiais lexicais permitem investigar. Esses materiais reúnem um conjunto de mapas de um território que representam as realizações dos paradigmas linguísticos, sendo possível visualizar a distribuição geográfica de determinado fenômeno linguístico e isolar áreas dialectais, que são definidas pela concentração de variantes idênticas. Dentro dessa perspectiva, o presente trabalho é dedicado à análise e comparação de dados geolinguísticos relevantes para estudar aspectos do léxico do português do Brasil e Português europeu, nomeadamente no campo semântico de fenômenos atmosféricos. Para alcançar esse objetivo, foram considerados materiais de atlas linguísticos do PE, com o Atlas Linguarum Europae (ALE) e o Atlas Linguístico-Etnográfico de Portugal e da Galiza (ALEPG), e do PB, com os atlas regionais Atlas Linguístico-Etnográfico da Região Sul do Brasil (ALERS), Atlas Linguístico da Paraíba (ALPB), Atlas Semântico-Lexical da Região do Grande ABC (ASLEABC), Atlas Linguístico de Sergipe (ALS) e Atlas Linguístico de Pernambuco (ALlPE) e o Atlas Linguístico do Brasil (ALIB). São estudadas, cartografadas conjuntamente e comparadas as variantes registadas relativas aos fenômenos ‘arco-íris’, ‘granizo’, ‘neblina/nevoeiro/cerração’, ‘raio’ e ‘relâmpago’, escolhidos devido à sua disponibilidade e coincidência em atlas. Com esse trabalho, pretende-se contribuir para o estudo do léxico da língua portuguesa, nas vertentes de comparação entre PB e PE e entre diferentes variedades regionais.

Objectives: We investigated the cutaneous silent period (CutSP) as a measure of upper motor neuron (UMN) dysfunction in amyotrophic lateral sclerosis. Methods: The onset latency, duration, and amount of EMG suppression of the CutSP were compared with clinical UMN signs in 24 patients with amyotrophic lateral sclerosis (ALS). UMN signs were quantified using a clinical index and transcranial magnetic stimulation (TMS). Central motor conduction time (CMCT), cortical motor threshold and motor evoked potential amplitudes were assessed as measures of UMN dysfunction. CutSP was studied in abductor digit minimi (ADM) and tibialis anterior (TA) EMG recordings following stimulation of the 5th finger and sural nerves respectively. Non-parametric tests and binomial logistic regression were applied to evaluate the data. Results: CutSP onset latency was increased in ALS patients, compared to healthy controls, both for ADM and TA muscles. In limbs with clinical UMN signs or abnormal TMS findings, the CutSP onset latency was particularly increased. There was a significant positive correlation between CutSP onset latency and the UMN score in both upper and lower limbs. In TA muscles there was also a negative correlation between CutSP onset latency and EMG suppression. The logistic regression model based on CutSP parameters correctly classified more than 70% of the cases regarding the presence of clinical signs of UMN lesion, in both upper and lower limbs. The results were not significant for TMS. Conclusion: We conclude that upper limb CutSP changes associates with UMN lesion in ALS. This neurophysiological measurement merits further investigation in ALS.

Translation Memory is the most commonly used Computer-aided Translation system, whose main purpose is to store and retrieve previous high-quality translated sentences. Although they are very important systems for the translation process, they operate at the sentence level. This approach can be problematic as translated documents without considering the full context can cause coherence and cohesion issues at the text level. The present thesis aims at the analysis and creation of context-independent and gender neutral Translation Memories by resorting to part-of-speech (POS) information, in order to automatically identify context-dependent segments. This would enable the reuse of segments without causing meaning constraints at the document level. In order to achieve this purpose, three experiments were conducted focusing on customer support data. We firstly conducted a pilot experiment to annotate context-related issues in a dataset of 2,045 TMs for Brazilian Portuguese and European Spanish. The results showed that gender agreement was the most frequent category (80%), followed by Register (20%). For the second experiment, we analyzed a total of 5,200 segments for Portuguese, Brazilian Portuguese, Spanish and Latin-american Spanish, with English as the source language. The goal of this analysis was to annotate context related issues with a new context annotation typology. Thereafter, all the context-dependent data was analyzed by a POS tagger in order to understand if it was possible to create sequences of parts of speech patterns that could distinguish context-dependent TMs from context-independent ones. The last experiment consisted on the analysis of a new dataset of a total of 8,000 segments for the same languages. The goal of this experiment was to verify if the previously found patterns could actually identify context-dependent segments. Results showed that 1,298 out of 15,245 TMs were context-dependent in which 1,263 had gender constraints. We were able to turn the latter segments into gender neutral, therefore improving 8% of very frequent data.

Este estudo foca as memórias de infância das práticas parentais, a sintomatologia psicopatológica do adulto, e a relação com a criança e com os pais ao longo da vida (variáveis relacionais). Pretendeu-se analisar, comparativamente, um grupo de homens (GH) e um grupo de mulheres (GM) nas memórias de infância (suporte emocional/rejeição/sobreproteção) e na sintomatologia psicopatológica (depressão/ansiedade/ hostilidade), bem como a relação destas variáveis entre si e de cada uma delas com as variáveis relacionais. Participaram no estudo 127 indivíduos, 55 homens (Midade=44.89; DP=6.24) e 72 mulheres (Midade=43.19; DP=5.16), com filhos (5- 12 anos). Utilizou-se o EMBU-Memórias de Infância, o BSI e um Questionário Demográfico e Psicossocial para recolha de informação sociodemográfica e referente às variáveis relacionais. Os grupos não se distinguiram nas memórias de infância, mas o GH reportou níveis mais baixos de ansiedade. Neste grupo o suporte emocional (materno e paterno) associou-se negativamente com as dimensões da sintomatologia e no GM a rejeição (materna e paterna) associou-se positivamente com estas dimensões, havendo também algumas associações com a rejeição no GH. Nos dois grupos, não ocorreram associações significativas com a proximidade na relação com a criança, mas a qualidade da relação com os progenitores associou-se positivamente com o suporte emocional (materno e paterno). No GH verificaram-se ainda associações negativas desta qualidade com a rejeição (materna/paterna); no GM ocorreu uma associação entre a relação com o pai e a rejeição paterna. Por último, a hostilidade associou-se negativamente com a qualidade na relação com o pai (GM) e com a mãe (ambos os grupos), obtendo-se no GM uma associação negativa da ansiedade com a relação com o pai. Os resultados contribuem para aprofundar a compreensão da relação entre memórias de infância das práticas parentais e sintomatologia e sugerem que o seu impacto nas relações pais-filhos pode ter características diferentes para homens e mulheres.

The coverage of SARS-CoV-2 vaccination in large parts of the world, together with the high number of breakthrough infections, especially following the emergence of Omicron subvariants, makes hybrid immunity (resulting from vaccine and infection) common. Hybrid immunity, particularly after BA.1 or BA.2 infection, confers substantial protection against the BA.5 infection. However, although the waning of protection afforded by natural infection in non-vaccinated individuals or by vaccination has been well documented, the stability of hybrid immunity, specifically against the BA.5 subvariant, now dominant in many countries, has not been thoroughly addressed.

O presente estudo teve como objetivo investigar a relação entre as perturbações de ansiedade e a personalidade. Para isso, foram avaliados e comparados os resultados do Inventário da Personalidade para o DSM-5 – Adulto (PID-5), do Inventário de Sintomas Psicopatológicos (BSI), e do Questionário Sociodemográfico de dois grupos, sendo eles o grupo com outros diagnósticos psiquiátricos (n = 435) e o grupo com o diagnóstico de perturbações de ansiedade (n = 24). As hipóteses exploratórias tiveram como base a investigação robusta sobre as relações entre o Modelo dos Cinco Fatores – no qual o Modelo Alternativo de Traços de personalidade do DSM-5 se baseia – e as perturbações de ansiedade, e a investigação sobre as relações entre o modelo de personalidade do DSM5 e estas perturbações. Os principais objetivos foram (1) caracterizar as perturbações de ansiedade e diferenciá-las das outras perturbações psiquiátricas através do PID-5, que operacionaliza o critério B do Modelo Alternativo do DSM-5, (2) caracterizar as perturbações de ansiedade e diferenciá-las das outras perturbações psiquiátricas através do BSI e, (3) contribuir para a validação da versão portuguesa do PID-5 na população clínica, nomeadamente com perturbações de ansiedade. A amostra é constituída por 459 participantes, com idade igual ou superior a 18 anos (M = 44.10; DP = 12.41), sendo a maioria de nacionalidade portuguesa (95%), dos quais 250 são do sexo masculino e 209 do feminino. Encontraram-se diferenças significativas entre os participantes com perturbações de ansiedade e os com outros diagnósticos no domínio Psicoticismo do PID5 e nas suas duas facetas, nomeadamente, a Desregulação cognitiva e percetiva e a Excentricidade, como também na faceta Perseveração, do domínio Afetividade negativa do PID-5, enquanto no BSI apenas a escala Psicoticismo apresentou diferenças significativas entre as duas populações. Estes resultados, inesperados à luz das hipóteses consideradas, são discutidos e explicados pelas características das amostras do presente estudo, principalmente a amostra com outros diagnósticos, e pela comorbilidade entre as perturbações de ansiedade e outras perturbações psiquiátricas.

Este relatório descreve e analisa a Unidade Didática Basket Superhumans realizada no âmbito da Prática de Ensino Supervisionada, no ano letivo de 2020/2021. Esta foi desenvolvida com o 12.º ano, do Colégio Marista de Carcavelos, na disciplina de Oficina de Multimédia B e em parceria com uma equipa de basquetebol adaptado, da Associação Portuguesa de Deficientes de Lisboa. Ligando a arte à cidadania e dando a conhecer que, para além do seu lado estético, esta também tem uma função interventiva na sociedade, os alunos foram desafiados a criar um vídeo de divulgação para a equipa. Esta Unidade Didática foi desenvolvida em grupos, recorrendo a um método de projeto de multimédia, organizado em várias fases: pesquisa e elaboração de moodboards; desenho do storyboard; edição do vídeo final; apresentações. Ao longo deste projeto tivemos como objetivos a aprendizagem de conceitos e conteúdos relacionados com a multimédia, a compreensão do valor social da arte e como trabalhar em grupo e o desenvolvimento de competências, tais como: criatividade; comunicação; capacidade de pesquisa e síntese. Para além disto, a cultura visual dos alunos foi alargada, através da apresentação de exemplos de elementos artísticos em todas as fases do projeto. A implementação assentou em diversas práticas educativas, nomeadamente a diferenciação pedagógica, a educação pela cultura visual, o feedback e a elaboração de um dossiê de projeto. No final, concluímos que os alunos conseguiram atingir todos os objetivos definidos, apesar de terem surgido algumas limitações, principalmente devido à pandemia. Ao compreenderem que o seu trabalho iria ter um grande impacto na associação e na comunidade, em geral, a motivação dos alunos e o seu empenho aumentou, fazendo com que conseguissem realizar atempadamente os elementos solicitados no projeto e compreendessem todas as ferramentas básicas de edição de imagem e de vídeo, traduzindo-se em resultados finais de elevada qualidade.

Os dermatófitos são um grupo de fungos filamentosos com uma distribuição cosmopolita, que têm a capacidade de invadir tecidos queratinizados (pele, cabelo e unhas) de humanos e outros animais e provocar uma infeção superficial denominada de dermatofitose. As dermatofitoses são responsáveis por 3 - 4% dos casos afeções dermatológicas, sendo a infeção superficial mais comum em humanos (com uma prevalência entre os 20-25%). No entanto, espera-se que a sua prevalência continue a aumentar devido ao aparecimento de novos fatores de risco. As espécies do género Trichophyton são os principais agentes causadores de patologias como pé de atleta e onicomicose nas mãos e pés e estima-se que afete ~1.000.000.000 de pessoas em todo o mundo. T. rubrum e T. interdigitale são os principais agentes etiológicos com prevalências de 80% e 20%, respetivamente. Em Portugal, é estimado que 1.510.391 de portugueses sofram de dermatofitoses, correspondendo a uma incidência de 14.300 infeções por dermatófitos por cada 1.000.000 de habitantes. Para o tratamento das dermatofitoses, a primeira terapia a ser prescrita é, na grande maioria dos casos, a terbinafina. Desde 2017 que os casos de resistência a este antifúngico por parte de T. rubrum e T. interdigitale têm vindo a aumentar gradualmente. Os mecanismos de resistência à terbinafina são, essencialmente, descritos como mutações pontuais no gene que codifica a esqualeno epoxidase. Assim, neste estudo, procurámos perceber se a problemática de resistência ao antifúngico terbinafina em T. rubrum e T. interdigitale estaria ou não negligenciada em Portugal. Cento e sessenta e quatro isolados de T. rubrum e T. interdigitale foram identificados até à espécie através de tecnologias moleculares e também com recurso a espectoctrometria de massa (MALDI-TOF). De seguida, verificámos a presença da resistência ao antifúngico terbinafina nestes isolados e pesquisámos as mutações associadas a essa mesma resistência. Para tal, procedemos à otimização e implementação de metodologias que permitiram efetuar a avaliação da resistência de isolados de T. rubrum e T. interdigitale, quer por método cultural quer por metodologias moleculares com sequenciação do gene da esqualeno epoxidase (SQLE) seguida de deteção de mutações neste gene que conferem resistência a este composto. A caracterização dos padrões de suscetibilidade ao antifúngico terbinafina foi feita recorrendo a meios de screening (agar suplementado com terbinafina) e ao método das microdiluições em caldo. Numa primeira abordagem, de 102 isolados de T. rubrum, apenas 1 isolado (nº126) revelou ser resistente á terbinafina por meio de screening e dos 17 isolados T. interdigitale, apenas 3 demonstraram ser resistentes à terbinafina por meio de screening em ambas as concentrações utilizadas definidas pela norma EUCAST (0.06 mg/L e 0.125 mg/L). De acordo com a metodologia das microdiluições, 2,44% dos isolados apresentaram menor suscetibilidade à terbinafina. Os nossos resultados demonstram que o isolado nº126 (T. rubrum) revelou ser bastante resistente à terbinafina com uma CMI de 8 mg/L, os isolados nº 63 e nº94 (T. interdigitale) apresentaram CMIs superiores a 8 mg/L o que representa uma baixa suscetibilidade à terbinafina. O isolado T. interdigitale nº 59 apresentou uma CMI igual a 1 mg/L o que revela uma resistência moderada à terbinafina. A otimização da PCR de amplificação e sequenciação do gene da SQLE de T. rubrum e T. interdigitale permitiu a deteção de mutações pontuais apenas num isolado de cada espécie num total de quatro isolados classificados como resistentes. O isolado T. rubrum nº126, após análise da sequência do gene da SQLE, apresentou uma mutação pontual na posição 1189 na ORF do gene da SQLE o que corresponde a uma substituição de uma fenilalanina na posição 397 da sequência de aminoácidos da proteína por uma isoleucina. Apesar de as substituições mais comuns e que levam a uma maior resistência à terbinafina serem L393F e F397L, a substituição F397I detetada no isolado T. rubrum deste estudo, sugere causar uma elevada resistência à terbinafina. Relativamente aos isolados resistentes T. interdigitale, apenas o isolado nº 94 apresentou uma mutação pontual na posição 1189 na ORF do gene da SQLE, ocorrendo uma substituição de uma fenilalanina na posição 397 da sequência de aminoácidos da proteína por uma leucina, o que confirma a sua CMI superior a 8 mg/L. Nos restantes isolados resistentes pertencentes à espécie T. interdigitale, não foram encontradas quaisquer mutações no gene que codifica a SQLE. Este estudo, permitiu-nos efetuar uma caracterização da população amostrada, das amostras biológicas e dos isolados do género Trichophyton obtidos por cultura destas amostras. Foi também possível detetar, pela primeira vez, isolados do género Trichophyton resistentes à terbinafina em Portugal. Foi ainda possível estimar, dentro dos isolados estudados, uma frequência de resistência de 2,44%. A resistência à terbinafina por parte de T. rubrum e T. interdigitale é um problema real em todo o mundo e estima-se que os casos continuem em aumentar e por isso acreditamos que, a aplicação do método de screening e das microdiluições bem como a implementação da reação de PCR para pesquisa de mutações que conferem essa mesma resistência será uma mais valia e um contributo importante no que toca ao diagnóstico e posterior terapia das dermatofitoses reportadas em Portugal.

No final do século XIX e início do século XX, devido à melhoria contínua do status internacional do Japão após a vitória de algumas guerras, o Japão desenvolveu-se industrialmente a um nível sem precedentes, não obstante ser ainda incapaz de resolver alguns problemas espinhosos na sua sociedade, tais como a insegurança de vida da população, a existência de um grande número de famintos, etc. Para resolver estes e outros conflitos internos, o governo japonês incentiva os japoneses a emigrar. A fim de melhorar suas condições de vida, as pessoas trabalharam duro e esperavam ir para o exterior para ganhar dinheiro. O Brasil tem vastas terras, uma pequena população, recursos abundantes e condições de imigração flexíveis, que atraem um fluxo constante de imigrantes japoneses. A chegada de imigrantes japoneses resolveu o problema da escassez de mão de obra no Brasil, e os imigrantes japoneses também se desenvolveram e também deram grandes contribuições para o desenvolvimento agrícola do Brasil. Antes da II Guerra-Mundial, o Brasil tinha 190.000 imigrantes japoneses e construiu sua própria sociedade de imigrantes. Mas com a eclosão da II Guerra-Mundial, os japoneses que vivem no Brasil começaram a ser hostis e reprimidos pelos países aliados antifascistas. O que acabou desencadeando um grande perturbação social e política, de origens sociais profundas, envolvendo características da sociedade imigrante, psicologia do imigrante e questões de identidade.

A implementação de grandes infra-estruturas é uma das causas de regressão do lobo-ibérico, Canis lupus signatus. Deste modo, a construção de duas novas auto-estradas, A24 e A7, na região de Trás-os-Montes constitui uma ameaça para a mobilidade e viabilidade da população lupina, contribuindo para a sua fragmentação. Assim sendo, em 2005 iniciou-se um Plano de Monitorização do Lobo para avaliar o impacto destas auto-estradas na população lupina no Sítio Rede Natura 2000 Alvão/Marão. Neste estudo pretendeu-se analisar o efeito de repulsa das auto-estradas e a eficácia das estruturas de permeabilidade, criar um modelo de adequabilidade de habitat e efectuar uma actualização sobre os hábitos alimentares deste carnívoro. Para tal, efectuaram-se percursos para procurar e quantificar indícios de presença da espécie pela área de estudo, recolhendo os dejectos para o estudo da dieta e colocaram-se máquinas fotográficas com sensores de movimento para registar a utilização das passagens nas estruturas de permeabilidade. Relativamente ao uso do espaço, observou-se um decréscimo dos valores de IQA (Índices Quilométricos de Abundância), desde 2005, tendo mesmo diminuído a área de presença da espécie, reflectindo o efeito de repulsa que seria de esperar com a imposição de barreiras artificiais. Obtiveram-se também seis registos fotográficos de lobos em duas das passagens construídas na A24. Além disso, ao longo destes cinco anos, encontraram-se sete dejectos em passagens da A7 e quatro dejectos em passagens da A24. Segundo o modelo de adequabilidade, as áreas que apresentaram os requisitos ecológicos essenciais para a distribuição da espécie encontram-se principalmente nas zonas de maior altitude. Relativamente ao estudo da dieta, verificou-se uma preferência pelos ungulados domésticos, especialmente por caprinos. Dentro dos ungulados silvestres, o corço é a presa mais consumida. Por fim, tendo em conta os resultados obtidos, apresentaram-se sugestões para melhorar a eficácia das medidas mitigadoras já efectuadas.

Segundo a Organização Mundial de Saúde (WHO), o glioblastoma (GBM) é uma neoplasia de classe IV com diferenciação astrocística, responsável por aproximadamente 45% de todos os tumores cerebrais primários malignos. Devido à sua natureza altamente invasiva e rápida taxa de proliferação, a ressecção cirúrgica completa do tumor não é exequível. Adicionalmente, a grande heterogeneidade genética típica deste tumor cerebral possibilita um rápido desenvolvimento de resistência à quimioterapia e radioterapia utilizadas, e uma consequente célere recidiva tumoral. Para além da sua grande variabilidade genética intra-paciente, o GBM é também notório pela sua heterogeneidade inter pacientes, o que se revela de forma clara no comportamento patológico diferencial deste tumor, como por exemplo, na resposta aos diferentes tratamentos. Por este motivo, o GBM foi agrupado em diferentes grupos, de acordo com a natureza das suas mutações e com a sua expressão fenotípica. Esta informação pode ser utilizada para personalizar terapias para pacientes com GBM, aumentando assim a sua eficácia. De acordo com o último relatório da WHO de 2016, que clarifica a classificação de tumores do sistema nervoso central através da integração tanto de critérios fenotípicos como genotípicos, o GBM pode ser dividido em dois grupos: Desidrogenase de isocitrato (IDH)-estirpe selvagem e IDH-mutante. Existe ainda um terceiro grupo que inclui todos os diagnósticos de GBM no qual a avaliação do gene IDH é inconclusiva. O perfil genotípico mais comum ocorre em cerca de 90% de todos os casos e está associado a pacientes que apresentam a estirpe selvagem do gene IDH. Esta variante está associada a GBM primários, isto é, tumores com as suas principais mutações a ocorrem de novo, em pacientes com mais de 55 anos, com uma idade mediana de 62 anos aquando do diagnóstico. Este grupo está também associado com uma maior incidência no sexo masculino, com um rácio de 1,42:1 em comparação com o sexo feminino. A taxa de sobrevivência geral de pacientes neste grupo é de apenas 15 meses após diagnóstico. Associado a aproximadamente 10% de todos os casos, a segunda variante mais comum deste tumor está associada com GBM secundários que se desenvolvem em pacientes mais novos, por volta dos 44 anos. Os pacientes neste grupo apresentam mutações no gene IDH, e normalmente possuem um histórico clínico de casos de gliomas difusos de baixo grau. A taxa de sobrevivência nesta variante ronda os 31 meses após o diagnóstico, um pouco mais do dobro quando comparada com a variante IDH estirpe selvagem. Até ao momento, não existe ainda um claro conjunto de sintomas associados com nenhuma variante específica. Os sintomas para ambas as variantes podem incluir défices neurológicos focais progressivos, danos cognitivos e motores, náusea, dor de cabeça e convulsões. Estes sintomas derivam normalmente de fatores como a localização do tumor, destruição direta de tecido cerebral por necrose, ou da pressão intracraniana elevada devido ao volume tumoral. Devido a este conjunto de sintomas ambíguos e a falta de grandes manifestações clínicas, o GBM é normalmente diagnosticado num estádio avançado, revelando assim uma falta de estratégias de diagnóstico eficientes. Os métodos de diagnóstico atualmente utilizados consistem em testes neurológicos, neuroimagem e sobretudo realização de biópsias, apesar do seu caracter invasivo e das limitações deste método em avaliar mudanças na dinâmica tumoral em tempo real. O último grande avanço no tratamento do GBM ocorreu em 2005, quando o pró-fármaco temozolomida (TMZ) foi introduzido em combinação com a radioterapia após ressecção cirúrgica máxima em segurança do tumor. A TMZ é um agente alquilante capaz de causar quebras na molécula de ácido desoxirribonucleico (DNA) através da formação de incompatibilidades no emparelhamento de bases que iniciam ciclos fúteis de reparação de DNA, resultando em morte celular. Este agente é um pró-fármaco que não necessita de ativação metabólica, uma vez que a TMZ é convertida espontaneamente ao seu princípio ativo, o catião eletrofílico altamente reativo metildiazónio. Ao contrário de outros fármacos comumente utilizados em quimioterapia, a TMZ tem a capacidade de atravessar a barreira hematoencefálica e atingir a localização tumoral em concentrações adequadas. Esta capacidade deve-se não só ao facto de que este pró-fármaco possui uma massa molecular de apenas 194 Da, mas principalmente devido ao seu padrão de degradação a diferentes valores de pH. O efeito citotóxico e citostático mediado por TMZ é geralmente causado pela metilação de uma guanina na posição O6, resultando no seu mal emparelhamento com uma timina durante a replicação que despoleta os vários ciclos fúteis de reparação de DNA mencionados anteriormente. No entanto, este aduto pode ser reparado pela enzima O6-metilguanina-DNA metiltransferase (MGMT). Metade dos pacientes diagnosticados com GBM possuem o promotor da enzima MGMT metilado, resultando numa menor expressão da mesma e num maior efeito citotóxico e citostático. Todavia, a outra metade dos pacientes é geralmente intrinsecamente resistente a TMZ devido a não possuírem a expressão de MGMT silenciada. Adicionalmente, após realização de quimioterapia com TMZ, existe uma pressão seletiva sobre as células para a perda do silenciamento do promotor do gene MGMT, resultando assim em quimiorresistência a TMZ. Uma vez que existe uma escassez de fármacos aprovados para o tratamento de primeira linha do GBM, é importante aprofundar o conhecimento das vias biológicas que levam ao desenvolvimento de resistência à TMZ, com o objetivo de potencialmente melhorar a eficácia do medicamento e retardar o desenvolvimento de quimiorresistência. As vesículas extracelulares (EVs) são um grupo heterogéneo de nanoestruturas de bicamada lipídica, que atuam como transportadoras biológicas de macromoléculas, como lipídios, proteínas e ácidos nucleicos. A biogénese destas estruturas é altamente dependente do tipo de célula, do seu estado fisiológico ou patológico e dos estímulos do microambiente celular. Devido às suas funções na comunicação celular, as EVs estão implicadas em vários processos fisiológicos e patológicos, incluindo funções importantes na biologia tumoral. Exemplos destas são: a promoção da proliferação e invasão celular, auxílio no aparecimento de metástases e angiogénese, e desenvolvimento de resistência às terapias utilizadas. Por este motivo, o estudo de EVs no contexto da biologia tumoral tem recebido grande atenção. Isto deve-se ao facto destas vesículas terem a potencialidade de servirem como biomarcadores do estado patológico das células cancerígenas em tempo real, mas também devido ao seu potencial valor terapêutico. O objetivo principal do presente estudo foi compreender melhor o impacto das EVs na transferência de quimiorresistência à TMZ entre linhas celulares com diferentes níveis de resistência. Deste modo, foram isoladas EVs através de um método baseado na ultracentrifugação diferencial em gradiente de densidade, sendo posteriormente validadas biologicamente. Estas vesículas foram isoladas de uma linha celular resistente a este pro-fármaco, T98G, e de uma linha celular sensível, U-251. De modo a serem identificadas possíveis diferenças na carga de vesículas extracelulares de células tratadas com TMZ, estas também foram isoladas de células cultivadas na presença deste pró-fármaco. Com a finalidade de estabelecer a concentração de TMZ utilizada nestas experiências, foram realizados dois ensaios, um referente à viabilidade celular com MTT e outro para avaliar a proliferação utilizando sistemas de análise Incucyte®. Para este trabalho, foi estipulado que a concentração de TMZ utilizada sobre as células T98G e U-251 seria 300 µM e 50 µM, respetivamente. Utilizando sistemas de análise Incucyte®, ao avaliar a proliferação de células U-251 tratadas com TMZ juntamente com EVs previamente isoladas, foi possível observar uma maior proliferação celular nestas condições quando comparadas às células que foram tratadas apenas com TMZ. Apesar da falta de significado biológico deste resultado, vários estudos publicados no decorrer desta dissertação corroboraram que as EVs têm a capacidade de transferir quimiorresistência entre células com diferentes graus de sensibilidade à TMZ. Por exemplo, foi demonstrado que EVs com níveis elevados de ácido ribonucleico longo não codificante (lncRNA) SBF2-AS1 derivadas de células com resistência a TMZ, foram capazes de transmitir quimiorresistência a células sensíveis em GBM. Outro estudo do mesmo laboratório, demonstrou que EVs derivadas de células de GBM resistentes a TMZ contendo níveis elevados de microRNA 1238 (miR-1238) foram também capazes de conferir resistência em células sensíveis. Embora se tenha tornado evidente que as vesículas extracelulares estão implicadas em vários processos biológicos, incluindo quimiorresistência no GBM, a tradução deste conhecimento em aplicações clínicas exigirá uma compreensão mais profunda das EVs. Além do já mencionado valor intrínseco das vesículas extracelulares como biomarcadores do estado patológico, há uma grande janela de oportunidade no uso destas mesmas vesículas como alvos ou vetores terapêuticos num futuro próximo.