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Construção de um vírus Vaccínia Ankara Modificado (MVA) Recombinante expressando a proteína e do vírus Dengue 3

A dengue é hoje objeto da maior campanha de saúde pública do Brasil, encontrando-se presente nos 27 estados da Federação. Visto que, as campanhas de combate ao vetor foram historicamente mal sucedidas, o desenvolvimento de uma vacina antidengue, ainda não existente, torna-se a opção mais segura para o controle desta arbovirose urbana. Os vírus MVA pertencentes à família Poxviridae, podem ser utilizados como um vetor poxviral vacinal antidengue possuindo vantagens como: ser incapaz de se multiplicar em células de mamíferos, métodos de construção e manipulação genéticos são relativamente simples, baseados principalmente no fenômeno de recombinação homóloga, seu genoma suporta a inserção de enormes quantidades de DNA exógeno, proteínas produzidas são processadas e transportadas de maneira idêntica ao que ocorre nas células de origem do gene estudado, dentre outras. Neste trabalho foram realizadas técnicas de biologia molecular para a construção de uma vacina recombinante contra o sorotipo 3 de Dengue, sorotipo mais prevalente no Brasil. Inicialmente foi realizada uma RT-PCR de uma amostra clínica positiva de DEN3, com o intuito de amplificar a região do genoma que codifica a proteína E. A proteína E é a maior e a principal proteína do envelope viral, sendo também o principal alvo de anticorpos neutralizantes o que revela o importante potencial que esta proteína pode possuir na construção de uma vacina recombinante. Subseqüentemente, a região que codifica a proteína para DEN 3 E foi inserida num plasmídeo de clonagem e seqüenciada, na etapa seguinte, DEN3 E foi introduzida no plasmídeo de transferência pLW44. Células de fibroblasto de embrião de galinha (CEFs) foram preparadas para que ocorresse infecção por MVA, que se multiplicam muito bem nestas células, e transfecção com o plasmídeo de pLW44-DEN3-E afim de se avaliar a funcionalidade desta construção. O sucesso desta etapa foi confirmado pelo ensaio de western blot. Os resultados obtidos até agora sugerem que este projeto foi relevante para a obtenção da vacina tetravalente almejada pelo grupo.

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2022-12-06T15:42:04Z

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Thiago Campolina Diniz

Ergonomia cognitiva e a interação do sistema informatizado: estudo de caso sobre estresse ocupacional em um cargo de Analista Administrativa Sênior

A pesquisa foi realizada com o objetivo de entender os fatores que causavam o estresse ocupacional a uma trabalhadora no cargo de Analista Administrativa Sênior de uma empresa multinacional do ramo de logística. A demanda do estudo surgiu pelo médico da empresa, tendo sido caracterizada como estresse ocupacional, e alegado que as metas da trabalhadora não condizem com a realidade do trabalho. Foi utilizado como instrumento de estudo a Análise Ergonômica do Trabalho (AET) e observações durante a jornada de trabalho da analista. Durante o estudo, foi acompanhada a interface da trabalhadora com seus colegas de trabalho e visto que o e-mail é o instrumento mais utilizado para esse fim. Também foi acompanhado o desenvolvimento da atividade através do sistema informatizado, constatando-se que o mesmo apresentava falhas, dificultando o cumprimento das tarefas e metas pela trabalhadora. Após o levantamento e análise dos dados, foi possível chegar ao diagnóstico de baixa interoperabilidade dos sistemas operacionais e falhas que obrigam a trabalhadora a adotar estratégias para a realização de suas atividades. Tais dificuldades, associadas à pressão temporal, podem levar ao estresse. Diante disso, destaca-se a importância do ergonomista para analisar a atividade da analista e entender os processos cognitivos, propondo assim, melhorias que objetavam diminuir a sobrecarga e o cansaço mental que são gerados pelo uso do sistema.

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2022-12-06T15:46:31Z

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Ludmila Peres Silva

McDowell e o Conteúdo da Experiência: entre o proposicional e o intuicional

O trabalho apresenta a mudança de posição efetuada por John McDowell em seu texto Avoiding the Myth of the Given (2009c). No primeiro capítuloé apresentada a tese da proposicionalidade desenvolvida por McDowell em seu livro Mente e Mundo(2005). Veremos que com a tese do conteúdo proposicional McDowell procura engatar a mente de forma racional ao mundo, assim como superar a oscilação coerentismo/Mito do Dado. No segundo capítulo, apresento as principais objeções feitas a McDowell. Apresentoas objeçõesfeitas porTravis,que fizeram McDowell rever sua teseda proposicionalidade. No terceiro capítulo, apresento a posição desenvolvida em Avoidingthe Myth of the Given (2009c), como uma resposta a Travis. A dissertação procura mostrar que McDowell defende, neste artigo, uma posição segundo a qual a experiência perceptiva possui um conteúdo conceitual, porém não-proposicional, aqui chamado de conteúdo intuicional.O trabalho se encerracom uma avaliação deste conteúdo frente a problemas epistemológicos.

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2022-12-06T15:47:49Z

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Paulo Andrade Vitória

Fatores associados à iniciação, aderência e abandono de um programa de atividades físicas

Neste estudo foram identificados os motivos levam à iniciação, aderência e abandono da prática regular de exercícios físicos, no intuito de propor estratégias positivas rumo à aquisição do hábito de manter-se fisicamente ativo. A partir das análises realizadas pôde-se concluir que os motivos que levam as pessoas a iniciarem um programa de atividades físicas são a prevenção de doenças, o prazer pela prática, a socialização e a estética e que os motivos que levam ao abandono da prática esportiva são a falta de tempo, falta de motivação, falta de resultados e ou problemas financeiros.

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2022-12-06T15:43:37Z

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Marluce Lima Avila de Aguiar

Comparação entre os valores de referência recomendados para o treinamento de força objetivando hipertrofia muscular e os valores utilizados em estudos experimentais

O objetivo desse trabalho foi identificar e comparar os valores de referência recomendados para o treinamento de força objetivando hipertrofia muscular e os valores utilizados em estudos experimentais, por meio de uma revisão de literatura. Devido à vastidão do tema foram comparados os valores referentes à intensidade, volume, duração, pausa, frequência e densidade. Frente às informações levantadas na literatura, ficou evidente que diversos valores de referência foram confirmados em estudos experimentais, mas alguns valores foram extrapolados em seus limites inferiores e superiores, enquanto outros valores não foram confirmados em relação à sua eficácia no desenvolvimento da hipertrofia muscular.

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2022-12-06T15:43:05Z

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Horacio Guimaraes Alcantara

Análise crítica de estudos de revisão relacionando alongamento e prevenção de lesões esportivas

Flexibilidade é uma capacidade física determinada pela amplitude de movimento máxima de uma ou mais articulações. Ao longo dos anos, o exercício alongamento é rotineiramente incluído em programas de treinamento para atletas sob a prerrogativa de que elas previnam eventuais lesões e otimizem o desempenho esportivo, diante disso o objetivo desse trabalho foi fazer uma análise crítica das revisões de literatura já publicadas que objetivaram investigar a relação entre alongamento e incidência de lesões esportivas. Participaram do estudo 4 revisões de literatura que foram analisadas sistematicamente, com os artigos de cada uma sendo lidos e classificados. Para cada revisão foi apresentado um quadro mostrando a amostra, protocolo de alongamento e o resultado de cada um. Os dados foram analisados e como resultados mostraram que o alongamento aumenta a flexibilidade do indivíduo e combinada com exercícios de condicionamento físico, podem reduzir as taxas de lesão. Porém, quando o alongamento é analisado separadamente, não há uma redução significativa no índice de lesões esportivas.

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2022-12-06T15:41:03Z

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Diogenes Cabral Gontijo Amaral Fonseca

A contra-comunicação no voleibol do sistema ofensivo e defensivo no 1x1 e 1x2 em situações de ataque de 3º tempo pelas extremidades da zona ofensiva: da formação ao alto nível

O voleibol proporciona confrontos táticos, como é o caso do ataque contra a defesa. O presente estudo tem como objetivo analisar o sistema ofensivo representado pelas ações finais (ataque) em contra-comunicação com o sistema defensivo na progressão dos escalões iniciante, intermediário e adulto (profissional) no voleibol masculino e feminino. Foi verificado o efeito da solução do ataque, nas ações ofensivas de terceiro tempo, atacadas na extremidade da rede, nas estruturas funcionais 1x1 e 1x2. A amostra foi compostas pelas equipes campeãs dos estados de São Paulo e Minas Gerais, das competições promovidas pela Federação desses estados nos escalões Mirim (sub-14), Infantil (sub-15) e Infanto-Juvenil (sub-17), mais o campeão da Superliga Feminina e Masculina. O instrumento usado foi o SOS-vgs, nos critérios efeito da solução e condições de finalização. Foram analisados 8 jogos, utilizado estatística descritiva: distribuição da frequência, frequência relativa e moda. O sucesso ofensivo das equipes ocorre no 1x1, mas tal estrutura funcional com o tempo de ataque e as posições investigadas não ocorre no adulto. O sucesso tambem se faz presente na estrutura funcional 1x2. A estrutura funcional 1x2 ocorre em todos os escalões/sexos investigados, independente do Complexo de Jogo (side-out e transition). A estrutura funcional 1x1 ocorre de modo escasso nos escalões iniciais da base e de modo inexistente no adulto. Conclui-se que uma equipe que almeje a disputa de um título, ou o próprio, deve ter jogadores aptos a decidirem em situações adversas decorrentes do confronto 1x2 e concomitantemente em situações de ataque de 3º tempo.

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2022-12-06T15:44:07Z

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Erica Mara da Silva Lopes

Iniciação esportiva: uma revisão sobre o treinamento esportivo e a periodização com crianças

Cada vez mais as crianças estão em evidência no esporte competitivo. Ser atleta de alto nível torna-se um objetivo comum entre muitas delas. Entretanto, para que isso possa acontecer, é necessário que haja um projeto bem elaborado em longo prazo. Assim, a iniciação esportiva para as crianças deve ser planejada integralmente e não na pressão familiar em visa do sucesso esportivo, como também, no interesse pessoal de treinadores e clubes. Vários estudos demonstram que, apesar de um grande número de crianças iniciarem no esporte, apenas uma pequena parcela chegará à fase final, o profissionalismo. Um dos motivos talvez seja pelo fato de poucas reunirem as condições necessárias para alcançarem o referido objetivo. Por isso muitas desistem e outras não conseguem manter o rendimento necessário, o que acaba por afastá-las da prática esportiva e as impede de usufruir dos benefícios que o esporte proporciona. Devido às diferenças entre as crianças, o treinamento esportivo direcionado deve ser planejado e controlado, com respeito às etapas sensíveis de desenvolvimento. Deve-se lembrar que a criança não é uma miniatura do adulto. Através de uma revisão de literatura, o presente trabalho tem como objetivo dissertar a respeito do sistema de treinamento esportivo e os processos de organização adotados na periodização com crianças, no intuito de aplicá-los de forma profissional no ambiente de trabalho.

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2022-12-06T15:49:37Z

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Enio Moreira da Silva

Limitações e dificuldades no desenvolvimento dos grupos operativos na estratégia saúde da família: uma revisão integrativa

INTRODUÇÃO: No contexto da produção científica sobre os Grupos operativos que permeiam a vida dos profissionais, gestores, usuários destacam-se os estudos que abordam dificuldades e limitações, trazendo discussões sobre o que acontece que não se chega a um resultado satisfatório. OBJETIVO: É analisar as evidências disponíveis na literatura sobre os limites e as dificuldades enfrentados pelos enfermeiros para a realização dos Grupos Operativos nas Unidades Básicas de Saúde, nas principais revistas de enfermagem brasileiras. METODOLOGIA: Estudo de revisão integrativa de artigos publicados entre janeiro de 1999 a dezembro de 2012, em 07 periódicos, e ao total 10 artigos, classificados como Qualis A1, A2, B1 e B2, disponíveis online. RESULTADO: Inicialmente, selecionaram-se 40 artigos que traziam no título, nas palavras-chave ou no resumo os termos enfermeiro, enfermagem, programa saúde da família, estratégias saúde da família, educação em saúde em Revistas de Enfermagem e Saúde. Destes, ficaram 10 que definiram a amostra final da presente revisão. Predominou a abordagem qualitativa e o uso dos descritores como referencial teórico. Em sua maioria autores correspondem a enfermeiros, um docente do curso de graduação em enfermagem. CONSIDERAÇÕES FINAIS: Este estudo revelou mais similaridades que divergências entre as produções, além de sinalizar para necessidade de incremento de publicações da enfermagem envolvendo discussões sobre os grupos operativos.

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2022-12-06T15:40:48Z

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Monaliza Santos Fabrini

Relação entre o teste de shuttle run e o teste de 200 metros em policiais militares do curso técnico em segurança pública

Este estudo teve como objetivo analisar a relação entre o desempenho nos testes de corrida de 200 metros e teste de agilidade Shuttle Run em policiais militares do curso técnico de segurança publica de Minas Gerais. A amostra foi constituída por 89 policiais com idade entre 19 e 30 anos. O teste de 200m foi aplicado em pista de atletismo e o teste de Shuttle Run foi realizado em local apropriado sendo que os dois ambientes fazem parte do complexo esportivo da Academia de Polícia de Minas Gerais. Para verificar possíveis relações entre os desempenhos nos testes, foi aplicado o coeficiente de Pearson com nível de significância de p<0,05. Foram encontradas correlações significativas entre o desempenho no teste de Shuttle Run e o teste de corrida de 200m, porém fraca (r=0,300).

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2022-12-06T15:41:34Z

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Vanessa Rezende da Silva

Tratamento de dados em sistemas de automação de nível superior para cálculo de indicadores

Com o uso de sistemas automatizados e com o crescente volume de dados gerados em uma organização, o erro na coleta, no tratamento dos dados ou no cálculo de um indicador gerar valores incorretos, o que pode incentivar decisões gerenciais indevidas, desviando a organização das suas metas. Para correção destes erros, ou redução do seu impacto no valor calculado, diversas metodologias podem ser utilizadas, sendo cada metodologia aplicada em um caso específico. Apresenta-se uma revisão de técnicas de tratamento de dados para cálculo de indicadores em sistemas de automação de nível superior. Dentre as metodologias de tratamento dos erros nos cálculos dos indicadores cita-se: decimação, filtragem de dados, interpolação, estudo de propagação de erros e métodos estatísticos. Considera-se que avaliação dos erros relacionados ao cálculo do indicador deva ser abordada durante a criação do indicador, buscando identificar e minimizar os erros do cálculo. O processo de definição e cálculo de indicadores é, também, analisado. As técnicas são ilustradas com aplicação de dados provenientes de processos reais.

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2022-12-06T15:40:16Z

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Jorge Eustaquio de Campos Filho

A atuação do exercício físico sobre fatores neurotróficos no tratamento de pacientes com mal de alzheimer

Vários estudos vem auxiliando à pesquisas no desenvolvimento de novas drogas que viabilizam a nível molecular uma melhora na qualidade de vida do paciente da doença de Alzheimer (DA) . Muito se sabe sobre o exercício físico e seus benefícios no tratamento de doenças neurodegenerativas, os mecanismos acerca do mesmo e o desenvolvimento das capacidades motoras e cognitivas a nível de sistema nervoso central (SNC) e/ou periférico (SNP) em vários casos iniciais da DA. A atuação de fatores neurotróficos reativando sítios motores aumentando funções motoras e cognitivas e possibilitando adaptações a serem ativadas e mantidas através de programas de exercício físico crônicos. Tornando a atividade física uma opção livre de farmacogênicos contra doenças neurodegenerativas. O objetivo deste estudo é realizar um levantamento literário de estudos relevantes sobre os benefícios do exercício físico crônico e atuação do mesmo sobre os fatores neurotróficos derivados do cérebro (BDNF- Brain derived neurotrophic factor) no tratamento de pacientes com mal de Alzheimer, sem a necessidade do uso de farmacogênicos. Para encontrar os artigos, livros, sites e outros estudos que abordam esse tema foram utilizados termos na barra de procura tais como, Doença de Alzheimer, Neurotrofinas, BDNF, Exercício Físico e DA, Idoso, Dados do IBGE, Politica Pública de Saúde do Idoso, UCP-1, Brown Fat, Irisina, além desse recurso, também foram usados a barra de procura do Periódico CAPES, portal Scielo e Pubmed/Medline utilizando os termos acima citados e artigos enviados por colaboradores e um áudio MP3. Os estudos e arquivos considerados demonstraram, a importância do exercício físico como fator atuante na liberação de BDNF por diversos tecidos neurais e até musculares e como o mesmo atua na plasticidade sináptica no SNC e SNP, podendo auxiliar no tratamento de pessoas com DA na fase inicial, principalmente dos efeitos da depressão nessa população. Além disso, foram destacados outros efeitos do exercício físico sobre a população idosa e/ou atingidas pela DA, dentre elas o promissor efeito da Irisina e como o exercício físico pode recuperar as funções motoras e cognitivas dessa população.

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2022-12-06T15:47:18Z

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Claudio Manuel Castro

A importância do professor da sala de musculação: a visão do cliente como estratégia de Marketing de Relacionamento

Esta dissertação teve como objetivo identificar o modo como o aluno da academia percebe o professor que o atende. Dessa forma, auxiliar administradores de empresas e profissionais de Educação Física a diagnosticar os problemas que levam um aluno a parar de frequentar uma academia, antes que isso ocorra. Utilizando um questionário, desenvolvido para este trabalho, observou-se que raramente os alunos reclamam dos itens que lhe aborrecem na academia, e quando o fazem, é através de comentários com outros alunos ou informalmente com o professor. Isso mostra a importância de um padrão de relacionamento com os clientes, que realmente funcione, para que as expectativas sejam atendidas ou superadas. Para fidelizar um cliente, é preciso mais do que fornecer uma estrutura adequada para a sua prática de atividade física, é necessário encantá-lo; através de um atendimento diferenciado e eficiente; um cliente satisfeito fala bem da empresa para a família, amigos e vizinhos. Ao mesmo tempo em que estudos mostram a importância da prática de uma atividade física regular, muitos alunos não conseguem se manter ativos por muito tempo. Cabe à academia, em especial, ao professor desenvolver um papel de motivador e influenciador para que essa relação aluno/academia seja mais duradoura.

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2022-12-06T15:42:50Z

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Carolina Ferreira da Costa

Distribuição urbana e restrição veicular: considerações sobre o caso do hipercentro de Belo Horizonte

Os fluxos de bens circulantes nas grandes metrópoles, dão suporte ao agitado estilo de vida dessas grandes cidades. Cada vez mais, a facilidade de se adquirir um produto ou serviço tem aumentando e, com um simples clique, consegue-se agendar entregas para qualquer parte do espaço urbano. O aumento no número de entregas realizadas, fez com que as empresas transportadoras e o Poder Público se adaptassem a tal realidade. Este trabalho irá apresentar os conceitos de distribuição urbana de mercadorias e restrição veicular. O cenário escolhido para o desenvolvimento deste estudo é a região do Hipercentro de Belo Horizonte. Serão apresentadas também a postura de cidades do Brasil e do mundo frente a dinâmica atividade de distribuição de mercadorias em áreas urbanas e as medidas adotadas pelo Poder Público dessas localidades. No final do estudo são apresentados os resultados de uma pesquisa realizada com algumas empresas transportadoras que operam na região do Hipercentro de Belo Horizonte.

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2022-12-06T15:46:46Z

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Debora da Luz Santos Queiroz

Validade estrutural, divergente e incremental dos estilos de pensamento, legislativo, executivo e judiciário

A presente dissertação de mestrado teve como objetivo validar algumas particularidades da teoria dos estilos de pensamento de Sternberg. Sendo assim, foi possível produzir dois estudos, a saber: o primeiro investiga a validade estrutural e divergente dos estilos legislativo, executivo e judiciário e, o segundo estudo investiga a validade incremental desses estilos frente ao desempenho acadêmico, além da inteligência. Os estudos utilizaram uma versão adaptada do Inventário dos Estilos de Pensamento Sternberg, (1988), três testes de habilidades que fazem parte do Conjunto de Testes de Inteligência Fluida (CTIF), e para identificar o desempenho acadêmico dos alunos, o estudo 2 utilizou as notas trimestrais de todas as disciplinas. Tais instrumentos foram aplicados em uma amostra de conveniência com alunos do ensino médio de uma escola da rede pública em um município de Minas Gerais. Foi utilizado como estratégia de análise de dados o modelamento por equação estrutural e a análise fatorial exploratória. Os dois estudos apresentaram um adequado ajuste aos dados dos modelos propostos, com CFI próximos a 0,95 e RMSEA menores do que 0,06. O estudo 1 apresentou evidências de validade estrutural e divergente. Já o estudo 2 não indicou evidências de validade incremental no fator geral de desempenho, mas apenas em desempenhos em disciplinas especificas.

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2022-12-06T15:43:05Z

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Eunaihara Ligia Lira Marques

O zebrafish (Danio rerio) como modelo de estudo das bases desenvolvimentais da esquizofrenia: regulação da via intracelular dopaminérgica DARPP-32/Akt durante o neurodesenvolvimento

A dopamina (DA) é um neurotransmissor monoaminérgico da família das catecolaminas e precursor de outros neurotransmissores catecolamínicos como: noradrenalina e adrenalina. Ela está envolvida em inúmeras funções desde o controle do movimento a processos cognitivos e motivacionais, por exemplo, mecanismos de formação de memórias (MA e LOPEZ, 2003). As primeiras etapas da síntese de DA consiste na conversão da tirosina em L-DOPA (l-3,4-diidroxifenilalanina ou levodopa) e esta por sua vez, em DA. Essas reações são catalisadas pela enzima tirosina hidroxilase (TH) e pela descarboxilase de aminoácido aromático (AADD), respectivamente, as quais sintetizam DA no terminal pré-sináptico do neurônio dopaminérgico (RINK e WILLIMANN, 2002). Após o processo de síntese, a DA é armazenada em vesículas sinápticas e liberada quando há despolarização da membrana pré-sináptica do neurônio dopaminérgico.

Year

2022-12-06T15:47:34Z

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Rafaela Almada Amaral

Teaching english to intermediate students

Teaching English for Intermediate Students is a mandatory final paper required for the conclusion of the Curso de Especialização em Inglês (CEI) and is divided in two thematic units which are environment and music. This choice was due to its necessity to increase public awareness about environmental problems and musicwas chosen because of its power to move us and stir our emotions.

Year

2022-12-06T15:47:34Z

Creators

Kelly Regina Milagres Miranda

Material didático para o ensino de inglês: alunos intermediários e pré-intermediários de escolas públicas e institutos de língua

The objective of this teaching material is to contribute to English as a foreign language learning process, which approch is communicative, and its propouse is to get the students immersed in learning the target language in an useful and meaningul way. The authentic materials are presented along the units, so they can lead the language learningto a realistic perspective. The abilities involved along the sections of this diadactic material are listening, speaking, reading and writing, which are simultaneously connected, so the learners will not learn in isolation, but immersed in a whole context.

Year

2022-12-06T15:45:59Z

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Carolina dos Santos

A importância do processo de compra na cadeia de abastecimento de uma indústria farmacêutica

Este trabalho busca compreender e sugerir melhorias no processo de aquisição das matérias primas e gerenciamento da cadeia de suprimentos dentro de uma indústria farmacêutica, identificando certos pontos que podem ser aprimorados. Através da observação dos processos e aplicação de um questionário estruturado, são identificados certos pontos críticos das atividades de compra, recebimento, análise e armazenagem dos materiais solicitados para fabricação de medicamentos além da periodicidade de demanda por cada tipo de material. Conclui-se que com um melhor controle de lançamento dos dados no sistema que alimenta o estoque e maior interação entre os envolvidos no processo de geração de demandas de produção e de compra, a indústria farmacêutica em questão consegue agregar valor à sua cadeia de abastecimento e consequentemente, aumentar a lucratividade.

Year

2022-12-06T15:40:16Z

Creators

Daisy Dutra Valladares Moreira

Estratégias de cultivo de células-tronco derivadas do tecido adiposo humano para promover a regeneração tecidual óssea in vivo

Grandes defeitos no crânio não regeneram satisfatoriamente, representando um importante problema biomédico. As atuais estratégias para regenerar o tecido ósseo ainda apresentam algumas limitações, dessa forma, a engenharia de tecidos é uma ciência atrativa para contornar tais limitações. Atualmente as células-tronco derivadas do tecido adiposo humano (hASCs) estão em foco para aplicação na engenharia de tecidos. Previamente a sua aplicação clínica, as hASCs devem ser expandidas ex vivo para obter o número requerido de células para transplante. No entanto, a expansão ex vivo das células-tronco antes da aplicação clínica ainda representa um desafio. O soro fetal bovino (SFB) é amplamente empregado como um suplemento para meio de cultura e expõe os pacientes receptores a infecções e reações imunológicas após o transplante. Além disso, a expansão celular constitui um risco de transformação celular maligna. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar se há resistência para transformação maligna durante a expansão de hASCs em condição de cultura livre de componentes xenogênicos, usando o pool de soro alogênico humano (SH), assim como, avaliar a capacidade das hASCs, quando cultivadas em matrizes tridimensionais de polihidroxibutirato-co-3-hidroxivalerato (PHB-HV), em se diferenciar em células da linhagem osteogênica e regenerar defeito de tamanho crítico em calvária de camundongos imunossuprimidos. As hASCs expandidas em meio suplementado com SH não apresentaram diferenças notáveis na morfologia, viabilidade, capacidade de diferenciação e imunofenótipo. A principal diferença observada foi um efeito proliferativo significativamente maior nas hASCs cultivadas em SH comparado ao SFB. Não existiu diferença significativa na expressão de c-FOS, mas a expressão da proteína c-MYC estava elevada nas culturas com SH comparado as culturas com SFB. No entanto, nenhuma diferença foi observada nos níveis de mRNA de MYC, CDKN2A, ERBB2 e TERT. Além disso, as hASCs apresentaram cariótipo normal, sofreram senescência e não formaram tumores in vivo, eliminando a possibilidade de imortalização espontânea das hASCs na presença de SH. As matrizes de PHB-HV, desenvolvidas pela técnica de liofilização, apresentaram estrutura de poros e performance mecânica adequada, que permitiu a colonização celular. As matrizes não foram tóxicas para as células, como mostrado pelo ensaio de MTT. E a diferenciação osteogênica das hASCs cultivadas na matriz foi confirmada pela redução da proliferação, atividade de fosfatase alcalina, expressão gênica de ALPL, COL1A1, RUNX2 e BGLAP, e expressão de marcadores ósseo, como colágeno tipo I, osteopontina e osteocalcina. Além disso, a matriz de PHB-HV demonstrou alto grau de biocompatibilidade in vivo. Na última etapa desta tese, embora as análises histológicas mostrassem uma boa progressão da injúria óssea com neoangiogênese, as matrizes tridimensionais de PHB-HV, colonizadas ou não por hASCs implantadas não foram capazes de regenerar o defeito de tamanho crítico em calvária após 12 semanas de implantação. No geral, os resultados obtidos sugerem que o SH é uma abordagem adequada e segura para cultivar hASCs e diferenciá-las em células da linhagem osteogênica destinadas para aplicações clínicas. E a matriz tridimensional de PHB-HV parece ser adequada para o crescimento e diferenciação das hASCs útil para engenharia de tecido ósseo, porém mais estudos são necessários.

Year

2022-12-06T15:46:16Z

Creators

Ana Claudia Chagas de Paula