RCAAP Repository

A crescente preocupação com as questões ambientais, aliada ao advento de leis que procuram proteger os recursos naturais, tem criado uma nova demanda na área das ciências forenses que trata das perícias ambientais. Em relação às atividades de pesca, existem diversas cartas legislativas em vigor que buscam proteger os recursos pesqueiros. Em contrapartida, a correta identificação de espécimes apreendidos em ocorrências de pesca ilegal ainda é feita de modo precário. Dessa forma, seria desejável o estabelecimento de protocolos simplificados que permitam a correta identificação de materiais apreendidos como forma de fortalecer as ações de fiscalização e, posteriormente, a prova no meio jurídico. Nesse aspecto, as técnicas moleculares podem oferecer grande ajuda através do estabelecimento de marcadores espécie-específicos, que permitam afirmar se o material questionado é proveniente, de fato, de espécie cuja pesca não é permitida. O presente trabalho objetiva caracterizar marcadores moleculares para as espécies Prochilodus argenteus e Prochilodus costatus, ambas de grande importância ecológica e econômica na região da bacia hidrográfica do rio São Francisco. Para tanto, foi feito o sequenciamento de DNA genômico das duas espécies, montagem de novo das reads geradas, montagem e anotação das sequências de DNA mitocondrial e comparação com a sequência de DNA mitocondrial de outra espécie do mesmo gênero: Prochilodus lineatus. Foram selecionados marcadores mitocondriais gênero-específicos e espécie-específicos e o desenho de primers foi feito levando-se em conta a possibilidade de identificação de gênero e espécie através da análise dos amplicons gerados em reação em cadeia da polimerase (PCR). Foram identificados um par de primers gênero-específicos, que apresentaram boa sensibilidade e especificidade na detecção de DNA do gênero Prochilodus. Quanto aos primers espécieespecíficos, foi encontrado um par que apresentou amplificação apenas para DNA de P. argenteus. O presente trabalho também obteve sucesso na extração de DNA de petrechos de pesca (uma rede e uma tarrafa) que foram sabidamente utilizados para coleta de espécimes de P. argenteus e P. costatus. Através de PCR utilizando marcadores mitocondriais, foi possível detectar a presença de material genético de Prochilodus no DNA extraído dos petrechos de pesca. Os dados obtidos a partir do sequenciamento de P. argenteus e P. costatus também permitiram a identificação de dezenas de milhares de marcadores microssatélites, que ainda precisam ser avaliados quanto à aplicabilidade para a identificação de espécies e para estudos de diversidade. A tecnologia apresentada no presente trabalho possui potencial para ser expandida para outras espécies e para ser aplicada em estudos de ecologia molecular, genética de conservação e na área forense como meio de determinação da materialidade de delitos e, consequentemente,fortalecimento da prova pericial no meio jurídico.

O objetivo desta tese foi verificar as relações entre condições de trabalho e saúde psíquica de catadores de materiais recicláveis vinculados a uma cooperativa de segundo grau na região central de Minas Gerais. As condições de trabalho são entendidas de maneira compreensiva, considerando o conteúdo e o entorno do trabalho, a partir de quatro categorias (1) contratuais e jurídicas; (2) físicas e materiais; (3) processos e características da atividade; e (4) ambiente sociogerencial. Consideramos a saúde psíquica em sentido amplo e não apenas como a ausência de doença, mas a partir da capacidade de instituir novas normas em situações diversas. Para atingir o objetivo proposto, aplicamos métodos distintos, sendo: observação participante, pesquisa documental e questionários estruturados. As observações se pautaram no respeito ao conhecimento do trabalhador e na busca do seu saber sobre o trabalho. Na pesquisa documental, buscamos registros como atas, estatutos e notas de comercialização arquivados na cooperativa, além da legislação e informações na World Wide Web. Para apreender como os catadores percebem suas condições de trabalho e sua própria saúde psíquica, além do desenvolvimento de observação participante, aplicamos questionários estruturados: Questionário das Condições de Trabalho (QCT), Questionário de Saúde Geral, versão resumida (QSG-12), a Escala de Afetos Positivos e Negativos (EAPN), e a Escala de Autoestima (EA) de Rosenberg. Como resultado, identificamos que os catadores ocupam um lugar economicamente desprivilegiado na cadeia produtiva da reciclagem, mas têm se organizado nos últimos anos, constituindo um movimento representativo, que contribuiu para a formação de um grupo funcional. Os catadores têm a percepção da inadequação de algumas das condições de trabalho, como os fatores Movimentos Repetitivos e Exposição à Violência. Sobre a saúde psíquica apresentam boa prevalência de afetos positivos, boa autoestima e baixos sinais de esgotamento psicológico, sendo mais associada a institucionalização do trabalho do catador e menos a aspectos pontuais das condições de trabalho.

INTRODUÇÃO: Transtornos neuropsiquiátricos são, predominantemente, doenças multifatoriais. A presença de heterogeneidade é um complicador no entendimento dos mecanismos envolvidos no desenvolvimento destas doenças, na realização de diagnósticos e na escolha do tratamento adequado. A medicina personalizada, em conjunto com o desenvolvimento de biomarcadores, visa solucionar estes problemas. Sua aplicação auxilia na criação de medidas terapêuticas eficazes, tendo em vista as particularidades inerentes do indivíduo. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o potencial de polimorfismos do gene do receptor de dopamina D1 (DRD1) para ser utilizado como biomarcador para a resposta ao tratamento com antipsicóticos e a possibilidade do alelo E4 do gene da apolipoproteína E (ApoE) participar da manifestação do déficit cognitivo sintomático em pacientes com o vírus da imunodeficiência humana (HIV). MÉTODOS: Foi realizada uma revisão sistemática buscando estudos de associação genética entre (1) polimorfismos no DRD1 e resposta aos antipsicóticos e (2) o alelo E4 da ApoE e déficit cognitivo em pacientes com HIV. Dados epidemiológicos e clínicos foram extraídos e conduziu-se uma metanálise. RESULTADOS: Os resultados indicaram que não há associação entre o polimorfismo rs4532 do gene DRD1 e a resposta ao tratamento com antipsicóticos, nem com resposta ao tratamento monoterapêutico com clozapina. Foi observada uma associação entre o Alelo ApoE E4 com a disfunção cognitiva, clinicamente sintomática, em estudos que utilizaram a bateria de testes neuropsicológicos como instrumento de avaliação neuropsicológica mas nenhuma associação foi observada entre o alelo E4 da ApoE e o déficit cognitivo sintomático ou demência em pacientes com HIV, isoladamente, em estudos com outros métodos de avaliação clínica ou quando todos os grupos foram combinados. Os resultados demonstram que os polimorfismos genéticos estudados não estão associados aos fenótipos neuropsiquiátricos avaliados, não devendo, portanto, serem utilizados como biomarcadores.

Streptococcus pneumoniae é uma bactéria Gram-positiva de ampla dispersão mundial. É o principal agente etiológico de infecções pulmonares, meningite e sepse, sendo classificados mais de 90 sorotipos. Embora as vacinas existentes, baseadas em antígenos polissacarídeos, sejam eficientes, elas não conferem proteção contra vários sorotipos, e têm-se observado surgimento de doenças causadas por sorotipos não inclusos nas vacinas. Com o intuito de superar essas desvantagens e conferir uma proteção mais ampla, busca-se o desenvolvimento de uma vacina baseada em antígenos proteicos conservados entre os diferentes sorotipos de S. pneumoniae. Neste trabalho, selecionamos a proteína Sortase A (SrtA) que está ancorada a membrana do S. pneumoniae e possui um importante papel no processamento de proteínas de superfície. O objetivo foi avaliar as características imunogênicas da SrtA e o nível de conservação de sua sequência entre diferentes linhagens de S. pneumoniae através de análises in silico, além de avaliar seu potencial protetor em modelo animal. A partir das análises in silico foi possível determinar que a SrtA apresenta um peptídeo sinal compreendendo os resíduos Met1 até Asp10 e uma hélice transmembrana entre Lis13 a Tre35. Sequências SrtA de diferentes linhagens de S. pneumoniae foram alinhadas e as análises demonstraram 99% de identidade. Além disso, foram feitas predições de epítopos que demonstraram que a proteína SrtA possui três potenciais regiões antigênicas para ativação de linfócitos B. Já com relação aos epítopos de linfócitos T foram preditos epítopos na região entre os aminoácidos 33 e 137. Para confirmar a funcionalidade da SrtA como potencialmente imunogênica, o gene srtA foi clonado no vetor de expressão heteróloga pET-21a. A proteína foi expressa em Escherichia coli e após a sua purificação, sua imunogenicidade foi avaliada por Western blot utilizando soro de coelho imunizado com SrtA. Camundongos Swiss Webster foram imunizados com SrtA recombinante por via intraperitoneal e a resposta humoral foi analisada indicando que a proteína induziu a produção de IgG específica, caracterizada por uma alta taxa de IgG1 e IgG2a. Os camundongos foram desafiados e a resposta inflamatória foi avaliada. Os resultados indicaram que a SrtA é capaz de controlar o infiltrado celular no pulmão, mas não é capaz de modular o perfil de células inflamatórias. O potencial protetor da SrtA também foi avaliado utilizando como rotas de desafio as vias intranasal ou intraperitoneal. Observou-se que a SrtA é capaz de conferir proteção aos camundongos vacinados. Em conclusão, foi possível mostrar que a proteína SrtA é altamente conservada, entre diferentes linhagens de S. pneumoniae, e que é altamente imunogênica, gerando efeito protetor, in vivo. Estes resultados demonstram o potencial multivalente da SrtA para o desenvolvimento de uma vacina que possa produzir uma maior cobertura contra diferentes sorotipos de S. pneumoniae.

A presente pesquisa teve por objetivos verificar as relações entre as dimensões da personalidade, satisfação com o trabalho e percepção de justiça distributiva com comportamento contraproducente no trabalho (CCT). Participaram deste estudo 381 profissionais, do setor público e privado, sendo 142 residentes em cidades de Minas Gerais e 239 em cidades da Bahia, todos com vínculo empregatício formal há mais de um ano e em diferentes níveis hierárquicos, socioeconômico e de escolaridade sendo, a maioria do ensino médio (35,4%), seguido daqueles com pós-graduação (34,1%). Da amostra total, 74,3% eram do sexo feminino, a idade dos participantes variou entre 18 e 69 anos (DP = 8,47; M=30,42). A composição desta amostra foi por conveniência. O tamanho das organizações variou de micro (12,0%) a grande porte (46,0%). Os instrumentos utilizados foram: Workplace Deviance Scale (WDS), California Psychological Inventory (CPI-Cp), Escala de Satisfação no Trabalho, Escala de Percepção de Justiça Distributiva e o NEO-PI-R. Os resultados evidenciaram, de forma geral, correlações de magnitudes consideradas nulas à moderadas entre as diferentes variáveis. Os fatores de personalidade neuroticismo, amabilidade e conscienciosidade e os fatores de satisfação no trabalho satisfação com a natureza do trabalho e com promoções apresentaram correlações de magnitude moderada com os comportamentos contraproducentes. Quanto maior a pontuação em amabilidade, conscienciosidade e satisfação no trabalho menor o envolvimento dos funcionários em comportamentos contraproducentes e quanto maior o escore no fator neuroticismo maior o envolvimento com CCTs.

A presente dissertação de mestrado tem, como principal objetivo, pesquisar sobre a liderança transformacional por meio duas estudos: a evidência de validade da escala de liderança transformacional desenvolvida por Bass e Avolio (2004) no contexto brasileiro e o estudo da associação entre estilos de liderança, comportamentos de civismo nas organizações e a satisfação no trabalho. Foram utilizados, como instrumentos, Escala de Desejabilidade Social, de Marlowe-Crowne; Escala de Civismo nas Organizações; Escala de Satisfação no Trabalho, Multifactor Leadership Questionnaire (MLQ 5x form), na forma líder e liderado para a coleta de dados de conveniência dentre profissionais de diversas organizações de municípios de Minas Gerais. A investigação da estrutura interna, enquanto uma evidência da validade do instrumento foi realizada por meio de análises fatoriais exploratórias e a consistência interna foi medida por meio do alfa de Cronbach. Os resultados levaram à conclusão de que em ambas as modalidades da versão breve do MLQ 5X form, a estrutura interna proposta pelos autores do questionário não se manteve e os coeficientes foram altos tanto para o questionário dos líderes quanto para o dos liderados. No segundo estudo, por meio da correlação de Pearson e regressão linear múltipla, observou-se que a satisfação no trabalho aumenta significativamente e de forma positiva os comportamentos de civismo e liderança ativa.

O uso de aditivos alimentares nas dietas dos animais é uma das técnicas aplicadas com resultados significativos para melhorar os índices zootécnicos e aumentar a produtividade. Entre os aditivos utilizados na produção animal destacam-se os probióticos, os quais trazem benefícios à saúde do hospedeiro, não deixam resíduos nos produtos de origem animal e não promovem resistência às drogas. Neste contexto, este estudo teve como objetivo caracterizar in vitro e in vivo bactérias láticas isoladas de fezes de potros jovens para uso como probióticos na suplementação alimentar, como promotor de crescimento ou adjuvante imune. Trinta e três bactérias dos gêneros Lactobacillus, Weissella, Pediococcus e Enterococcus foram testadas in vitro a fim de caracterizar e selecionar potenciais linhagens probióticas. A viabilidade das bactérias foi verificada perante os desafios do trato gastrintestinal: a maior parte destas foi resistente ao pH ácido do estômago e cerca de 30% apresentou inibição de crescimento leve ou moderada aos sais biliares. O potencial de adesão à superfície do epitélio intestinal foi avaliado indiretamente pela capacidade das bactérias se associarem a solventes orgânicos apolares, com 40% das linhagens testadas apresentando alta ou moderada hidrofobicidade da superfície celular. Algumas das linhagens de bactérias apresentaram forte atividade antagonista contra quase todos os patógenos bacterianos testados. Todas as linhagens testadas apresentaram padrão similar de resistência/suceptibilidade a antimicrobianos utilizados na terapia humana e animal. As linhagens Pediococcus pentosaceus 40 e Weissella confusa 1 apresentaram melhores resultados nos testes in vitro de caracterização funcional probiótica e foram escolhidas para os testes in vivo em camundongos em modelo de infecção por Salmonella enterica sorovar Typhimurium. A suplementação alimentar de camundongos convencionais com as duas linhagens de bactérias láticas por 10 dias consecutivos não causou aumento dos índices hepático e esplênico, nem a morte dos camundongos, demonstrando sua segurança. Todavia, estas bactérias não promoveram uma maior sobrevivência dos animais infectados experimentalmente com o enteropatógeno S. Typhimurium. A quantificação relativa dos níveis de mRNA de genes codificadores das citocinas fator de necrose tumoral alfa (TNFA), interferon gama (IFNG), fator de transformação de crescimento beta (TGFB1) e interleucinas 6 (IL6) e 10 (IL10), após 1, 4, 7 e 10 do início do tratamento com P. pentosaceus 40 revelou um perfil inflamatório, induzindo um aumento da expressão de IFNG e um aumento significativo da expressão de TNFA 10 dias após o início do tratamento. Portanto, as linhagens W. confusa 1 e P. pentosaceus 40 mostraram-se seguras, porém não se apresentaram como uma terapia apropriada contra infecção por S. Typhimurium. Por induzir um perfil inflamatório de expressão de citocinas, é possível que a linhagem P. pentosaceus 40 sirva como adjuvante imune em vacinas ou que confira proteção frente a alguma importante infecção viral. Já em relação à linhagem W. confusa 1 é necessário que seja feita a mesma análise do perfil de indução de citocinas, mas os demais resultados in vivo foram muito semelhantes a P. pentosaceus 40. É importante ressaltar a necessidade de serem realizados testes de triagem em bactérias candidatas a probióticos, assim como foi feito neste trabalho, antes de sua extensa utilização na terapia animal e humana, tendo em vista que os efeitos nem sempre serão benéficos para todos os tipos de infecção, como foi demonstrado no presente estudo.

A genotipagem RHD fetal não-invasiva tem sido amplamente utilizada como rotina no acompanhamento de gestantes RhD negativo nos países desenvolvidos. Entretanto, no Brasil, esse teste ainda não é bem conhecido e nem se sabe qual o impacto a adoção desta ferramenta poderia causar na rotina de atendimento a gestantes RhD negativo sensibilizadas e não-sensibilizadas. O presente estudo tem como objetivo avaliar o impacto da introdução do teste de genotipagem RHD fetal na rotina de atendimento de gestantes RhD negativo não-sensibilizadas e sensibilizadas. Material e métodos: 248 amostras de sangue de gestantes RhD negativo foram processadas para purificação do DNA fetal. PCR em tempo real foi realizada para amplificar segmentos dos exons 5 e 7 do gene RHD. Os resultados da genotipagem fetal no plasma materno foram comparados com a fenotipagem RhD dos recém-nascidos. Foi ainda levantado o custo do teste e o impacto de sua adoção na rotina de atendimento de gestantes RhD negativo sensibilizadas e não-sensibilizadas. Resultados: Os resultados da genotipagem RHD fetal puderam ser comparados com 217 fenótipos RhD dos recém-nascidos. Houve 9 resultados inconclusivos, quatro falso negativos e 12 falso positivos. A sensibilidade do teste foi de 97,3%, a especificidade foi de 82,1% e a concordância dos resultados moleculares com os sorológicos foi de 93,1%. O custo da genotipagem RHD fetal não-invasiva foi de R$74,47. A economia estimada para a introdução do teste molecular não-invasivo para gestantes não-sensibilizadas foi de cerca de R$4.000,00 e para as sensibilizadas foi de cerca de R$45.000.000,00. Conclusão: O teste de genotipagem RHD fetal se mostrou sensível e de baixo custo. A análise do impacto da introdução do teste na rotina de atendimento a gestantes RhD negativo, não-sensibilizadas e sensibilizadas, demonstrou que sua introdução seria muito vantajosa do ponto de vista econômico e assistencial. Para gestantes sensibilizadas, o impacto financeiro foi bem maior que para as não-sensibilizadas. Entretanto, para gestantes não-sensibilizadas a possibilidade de administração da imunoprofilaxia antenatal geraria uma substancial redução da sensibilização materna com consequente redução no custo do acompanhamento dessas gestantes numa próxima gestação.

Corynebacterium pseudotuberculosis é um patógeno intracelular facultativo, que se subdivide em dois biovares: C. pseudotuberculosis ovis, agente etiológico da linfadenite caseosa em pequenos ruminantes, e C. pseudotuberculosis equi, que é responsável pela linfagite ulcerativa em equinos, mastite em bovinos e doença de pele edematosa em bubalinos. Estudos in silico do genoma de C. pseudotuberculosis identificaram vários genes que poderiam desempenhar papel importante, tanto na fisiologia quanto na virulência deste patógeno. Em complemento a genômica estrutural, a genômica funcional visa elucidar a função que cada gene exerce no organismo, bem como a interação destes genes entre si, dentro de uma rede biológica. Assim, neste presente trabalho, nós utilizamos diferentes estratégias proteômicas para avaliar o genoma funcional de C. pseudotuberculosis em nível proteico, para complementar prévio estudo in silico. Primeiramente, foi caracterizado o proteoma extracelular das linhagens 1002_ovis e C231_ovis, que permitiu a caracterização total de 60 diferentes proteínas de C. pseudotuberculosis. Além disso, 18 proteínas foram diferencialmente reguladas entre as duas linhagens. Posteriormente o proteoma da linhagem 1002_ovis foi avaliado em resposta ao estresse nitrosativo, o qual possibilitou a caracterização de 835 proteínas, correspondendo a aproximadamente 41% do genoma predito desta linhagem. Além disso, foram identificadas 58 proteínas diferencialmente reguladas, envolvidas em diferentes processos biológicos que podem favorecer o processo de sobrevivência deste patógeno na presença do estresse nitrosativo. Em um terceiro estudo foi realizado uma análise comparativa, entre o proteoma extracelular das linhagens 1002_ovis e 258_equi. Neste estudo, a análise proteômica realizada após um processo de passagem serial das linhagens em camundongos, permitiu a identificação de 250 proteínas diferencialmente reguladas de C. pseudotuberculosis, envolvidas em sistemas de transportes, detoxificação, virulência, adesão celular e resposta geral a estresse. Por fim, este trabalho de doutorado promoveu a geração de um banco de dados proteicos, assim como a validação de genes preditos anteriormente in silico. Além disso, pela primeira vez foi demonstrado um estudo proteômico comparativo, entre linhagens pertencentes aos biovares ovis (1002_ovis) e equi (258_equi). Os resultados gerados nestes estudos forneceram informações importantes, acerca de fatores que favorecem processos fisiológicos básicos, quanto envolvidos na virulência e na patogênese de C. pseudotuberculosis.

The genomic area has distinguished itself between different areas of modern biology, mainly after the advent of new high-throughput sequencing technologies (Next-Generation Sequencing - NGS), which allowed the massive deposit of whole genomes in public databases. The deluge of sequenced data, then, required the development of new bioinformatics software, with the ability to analyze these data, culminating in the creation of new areas such as comparative genomics that involves the comparison of the genetic content of an organism against another and helping the prediction of gene function and coding region sequences, identification of evolutionary events and finding of phylogenetic relationships. In this scenario, pan-genome studies allow the comparison of a large number of related bacteria enabling infer correlated genes with a lifestyle, gene repertoires and minimal genome size. In this work, first we describe the genome sequence, assembly and annotation of the Corynebacterium urealyticum strain DSM7111 followed by the comparison of two C. urealyticum, an opportunistic pathogen normally isolated from skin and mucous membranes in humans. Altogether, the strains encode 2,115 non-redundant coding sequences, of which 1,823 are commonly shared by both. Additionally, we applied the Vaxign software and we found 19 putative antigenic proteins through the application of the reverse vaccinology approach. Moreover, we expanded the comparative genomic analyses to the genus Corynebacterium, using 44 genomes of 25 different species. The pan-genomic analyses revealed an open pan-genome, which is currently composed of 22,177 proteincoding genes; the predicted core genome is composed of 562 genes; and, the predicted singletons account for 8,762 genes. Phylogenomic analysis using different strategies revealed the occurrence of four different clusters in the taxonomic tree: one composed of pathogenic, one of non-pathogenic and two of opportunistic pathogenic species. Finally, we presented genomes of C. ulcerans, which will be importante for future pan-genomic studies of this species.

Este trabalho pretende mostrar resultados de aprendizagem obtidos em projeto desenvolvido com os alunos dos 2º e 3º anos, Ensino Médio, do Colégio Estadual Dr. Raimundo Albergaria Filho Centro Interescolar -, em Governador Valadares, MG, nos anos de 2005 e 2006, referente ao plantio de mudas de árvores na área da escola, visando trabalhar conteúdo específico de Física Térmica e assim fugindo da rotina das aulas expositivas e cansativas da disciplina. Com esse projeto, visava-se também lançar sombra nas paredes das salas de aula das turmas, bem como trazer mais conforto aos seus usuários e trabalhar valores como integração dos grupos, aprendizagem interdisciplinar, conscientização ecológica e preocupação com o meio ambiente, procurando soluções práticas para dificuldades no contexto em que estão inseridos. Em 2014, com nova turma de 3º ano da mesma escola, promove-se a avaliação dos resultados desse projeto através de novas medições das temperaturas das salas, discussões, entrevistas, questionários e sugestões para novos projetos dentro do ensino da Física e do processo educativo em geral. Desse modo, esta monografia tem por objetivo verificar a efetividade de um projeto que aplicava conhecimentos da Física Térmica em turmas de Ensino Médio da rede estadual de Minas Gerais e mostrar que os alunos envolvidos compreenderam, por meios próprios, que os conteúdos aprendidos em sala de aula podem ser usados para melhorar a qualidade de vida ao seu redor.

Aproximadamente 7.000 doenças mendelianas já foram descritas, porém menos da metade delas foi relacionada com mutações em genes específicos. No presente trabalho, realizamos a análise bioinformática de exomas de pacientes com doenças mendelianas raras, atendidos no Hospital das Clínicas da UFMG ou no Laboratório Gene Núcleo de Genética Médica, com o objetivo de localizar variantes que pudessem estar causalmente relacionadas com as doenças. Foi realizado um estudo embasado na análise de exomas, tendo como foco duas aplicações clínicas distintas: (1) aprimoramento da correlação genótipo-fenótipo em cromossomopatias através do estudo de um paciente com microdeleção no cromossomo 1p13.2; (2) estudo de doenças mendelianas de causa pouco esclarecida; neste, analisamos duas famílias com miofibromatose infantil e dois pacientes com calcificações no cérebro e convulsões. No primeiro caso, avaliamos o fenótipo de pacientes com microdeleções em 1p13.2 e observamos que muitos apresentavam características de síndrome de Noonan. A região deletada em comum entre todos os pacientes contém o gene NRAS, e mutações de ganho de função nesse gene foram descritas em casos de síndrome de Noonan tipo 6. Realizamos, então, a análise de sequenciamento do exoma do nosso paciente para examinar a possibilidade de variantes patogênicas recessivas desmascaradas pela deleção hemizigota e também para verificar se o paciente tinha alguma variante patogênica nos genes relacionados com a síndrome de Noonan. Concluímos que o fenótipo dos pacientes pode ser relacionado causalmente com a deleção do gene NRAS. Então, havia o paradoxo de que haploinsuficiência de NRAS poderia causar características similares a mutações de ganho de função. Uma situação similar foi descrita para a síndrome de Noonan com ganho de função e haploinsuficiência do gene SHOC2 e também para a síndrome cardio-facio-cutânea, na qual o fenótipo da doença pode aparecer tanto em razão de deleções de MAP2K2 quanto de mutações de ganho de função. Concluímos, assim, que a desregulação da via Ras/MAPK causada tanto por mutação de ganho de função como por haploinsuficiência pode resultar em fenótipos similares. Realizamos também a análise de exomas, a fim de estudar doenças mendelianas de causa pouco esclarecida; para tal, analisamos duas famílias com miofibromatose infantil (MI), desordem rara, de patogênese molecular pouco conhecida, caracterizada pelo desenvolvimento de tumores benignos na pele, no músculo, nos ossos e nas vísceras. Neste estudo, realizamos inicialmente a análise dos exomas de dois irmãos diagnosticados com MI multicêntrica visceral e dos seus pais saudáveis e consanguíneos. Identificamos uma variante homozigota no gene NDRG4 nos dois irmãos. Coerentemente com o fenótipo de MI, NDRG4 é um gene relacionado com o desenvolvimento de tumores. Desse modo, sugerimos que a variante em NDRG4 pode ser a variante causal na família estudada com MI autossômica recessiva. Para confirmar nossos achados, pesquisamos na literatura por famílias com MI com herança possivelmente autossômica recessiva. Estudamos, então, uma família francesa com dois irmãos afetados com pais saudáveis e não consanguíneos. Identificamos, porém, nos dois irmãos, uma variante heterozigota no gene PDGFRB. Variantes nesse gene foram relacionadas com a forma autossômica dominante de MI. Para nossa surpresa, a mãe dos pacientes também apresentava a mesma variante em PDGFRB. Constatamos que ambos os irmãos herdaram paternalmente uma variante heterozigota em PTPRG, uma enzima que sabidamente desfosforila PDGFRB, reduzindo sua atividade. Sugerimos, então, que variantes em PTPRG podem explicar a penetrância fenotípica completa nos irmãos afetados. Portanto, propusemos que a variante em NDRG4 deve ser investigada em outras famílias com MI autossômica recessiva e que variantes no gene PDGFRB estão relacionadas apenas com a forma autossômica dominante da doença. Além disso, estudamos dois pacientes com microcefalia, convulsões e calcificações no tegmento pontino do cérebro, desordem rara com etiologia pouco conhecida. Suspeitamos de variantes provavelmente patogênicas em quatro genes candidatos: CCBE1, ARL5B, RSU1 e CRLS1. Todavia, pela técnica de sequenciamento de Sanger, verificamos que tais variantes eram erros de leitura do sequenciamento do exoma. Realizamos, então, nova análise dos exomas, procurando por genes que sabidamente causassem epilepsia. Encontramos, por meio dessa análise, variantes candidatas nos genes SCN1A e CHD2. Mutações heterozigotas nesses genes foram causalmente relacionadas com síndrome de Dravet, caracterizada por crises de convulsões com início no primeiro ano de vida. Porém, estas variantes também não foram confirmadas pela técnica de sequenciamento de Sanger. Análises futuras serão então necessárias para identificar novos genes candidatos. Concluindo, com o presente trabalho verificamos que a análise de exomas pode melhorar a qualidade de correlações genótipo-fenótipo de síndromes causadas por anormalidades cromossômicas, bem como auxiliar na detecção de genes que, quando mutados, podem ser causadores de doenças genéticas. Os resultados encontrados contribuíram para o melhor entendimento das doenças genéticas estudadas, auxiliando, desse modo, no diagnóstico de pacientes futuros e contribuindo para o acompanhamento e o aconselhamento genético dos pacientes e de seus familiares.

Este é um Estudo Ator-Rede sobre uma controvérsia envolvendo as identidades profissionais de licenciandos em Ciências Biológicas de uma universidade pública do sudeste do Brasil. Referenciados na Teoria Ator-Rede e na cartografia de controvérsias, buscamos mapear os atores envolvidos nas vivências formativas destes licenciandos e a composição de interesses relativos à rede identitária docente dos mesmos. Para esta investigação, o Programa Institucional de Bolsa de Iniciação à Docência (PIBID) foi eleito como a vivência formativa que rastreamos. Inicialmente realizamos um levantamento quantitativo junto aos formandos do curso de licenciatura em Ciências Biológicas da universidade estudada, com o objetivo de mapear o seu perfil e identificar se suas expectativas profissionais se modificaram ao longo do curso. Utilizamos o conceito latouriano de translação para descrever os desvios ou associações realizados pelos atores para fortalecer ou não a identidade docente. Percebemos a formação de poucas associações engendradas a favor da identidade docente e vários desvios durante a trajetória de formação inicial que culminam com a construção de uma rede contraidentitária em relação a docência. Em um segundo momento, conduzimos dois grupos focais, um com pibidianos e outro com não pibidianos, a fim de identificar, de forma comparativa, quais atores agiram durante a trajetória acadêmica dos licenciandos, no sentido de fortalecer sua identificação com a docência. Os resultados apontam que o curso de licenciatura realiza mais desvios que associações quanto à identidade docente e que o PIBID realiza várias associações em favor desta identidade. Baseados no conceito de performance, argumentamos que em geral os não pibidianos performam uma identidade-instituição, que emerge a partir do curso, estimulando-os a serem biólogos e professores de biologia. Por outro lado, os pibidianos geralmente performam uma identidade-afinidade, que emerge a partir do PIBID, pelo sentimento de pertença a um grupo colaborativo de trabalho. No entanto, como o programa atinge apenas uma parte dos licenciandos, problematizamos a necessidade de se estender a rede destas associações a todos os estudantes da licenciatura. Além disso, defendemos o uso da Teoria Ator-Rede e da cartografia de controvérsias como uma metodologia para mapear problemas complexos e traçar novos cenários possíveis de mundo.

Com base num modelo de escola que propõe que o estudante tenha liberdade de expressão, e cuja metodologia esteja pautada numa ação educativa de ordem social e cultural, esse estudo propõe o desenvolvimento de uma metodologia para trabalhar uma das etapas do ensino por investigação que é a resolução de problemas tendo como objetivo analisar a capacidade dos alunos do 9º ano do ensino fundamental de detectar e resolver problemas do seu cotidiano. A consciência de seu papel em relação a sua inserção e permanência no ambiente em que vive será fundamental no momento de visualizar e categorizar a importância de uma determinada situação como problema. Neste contexto a resolução de problemas demanda pensar em estratégias de resolução, hierarquização de etapas, capacidade de lidar com o inesperado, persistência e disciplina. Os estudantes foram convidados a pensar em alguma situação que, para eles, seria um problema, o mais próximo do seu cotidiano, e desenvolver estratégias para a sua resolução. Essa proposta foi fundamentada no aluno, e o professor foi o mediador. Os resultados mostraram que os estudantes são capazes de desenvolver estratégias capazes de resolver os problemas, no entanto a participação e o aconselhamento dos familiares foram altamente significativos. Os dados sugerem que, quanto mais cedo for possível propiciar aos estudantes a oportunidade de discutir sobre os acontecimentos do seu cotidiano e selecionar aqueles que, para eles, são considerados problemas, mais esses estudantes desenvolverão habilidades para resolvê-los mesmo que se aumente o grau de complexidade. Essa capacidade poderá ser um importante instrumento para a implementação e o sucesso do ensino por investigação, que permitirá, cada vez mais o avanço desse estudante como um cidadão.

A presente pesquisa teve como objetivo avaliar as potencialidades de uma abordagem metodológica alternativa para o estudo da argumentação em salas de aula de Ciências, baseada na Pragma-dialética. Pretende-se também analisar em que aspectos essa abordagem pode integrar elementos da Etnografia em Educação. Para contextualizar e fundamentar esse problema de pesquisa foi apresentada uma revisão não exaustiva da literatura, que evidenciou a importância da linguagem e da argumentação para os processos de ensino-aprendizagem em Ciências. Explicitou-se também a necessidade de mais estudos descritivos e de utilização de outras teorias do campo da argumentação para a análise das interações discursivas argumentativas em salas de aula de Ciências. Para construir essa abordagem metodológica alternativa, foi realizada uma profunda seleção e adaptação da teoria Pragma-dialética, buscando integrá-la a elementos da Etnografia em Educação. Nesse sentido, apresentamos as contribuições da Etnografia em Educação e caracterizamos a teoria Pragma-dialética, considerando essas adaptações. Além disso, como essa teoria não é uma amplamente utilizada no campo da Educação em Ciências, exemplificamos seu potencial de uso através da caracterização e análise exploratória dos dados empíricos relacionados às duas salas de aula de Ciências: EJA e 8º ano. Esses exemplos foram utilizados como evidências para sustentar uma reflexão, em construção, sobre: i) em que aspectos essa abordagem metodológica possibilita a caracterização da argumentação em diferentes salas de aula de Ciências; ii) em que aspectos essa abordagem metodológica possibilita a integração entre elementos da Pragma-dialética e elementos da Etnografia em Educação; iii) em que aspectos essa abordagem metodológica possibilita o diálogo com o campo de pesquisa em Educação em Ciências. Nossos resultados indicam que essa abordagem metodológica alternativa agrega novos aspectos à caracterização do discurso em sala de aula de Ciências. Nesse sentido, essa abordagem torna visíveis: i) as formas como as pessoas em uma sala de aula de Ciências discordam e que aspectos desses desacordos são recorrentes; ii) o que as pessoas em uma sala de aula de Ciências precisam saber e prever para participar de eventos de desacordos; iii) quais recursos são utilizados para a resolução de desacordos e como, ao longo da história da turma, os recursos foram sendo construídos; iv) a diversidade de formas de se discordar em cada uma das turmas; e v) como as pessoas aprendem Ciências ao participarem de eventos de desacordos. Apesar de esses resultados serem coerentes com vários elementos da Etnografia em Educação, deparamo-nos com alguns desafios, como por exemplo, até que ponto essa abordagem metodológica possibilita adotarmos uma perspectiva êmica? Esses resultados também sinalizaram em que aspectos as pesquisas, que utilizarem essa abordagem, podem contribuir em discussões mais amplas do campo da Educação em Ciências, como, por exemplo, a definição de argumento e argumentação, a qual estabelece diálogos com pesquisas sobre sense maker e com pesquisas sobre questões. Na presente pesquisa, apresentamos alguns possíveis caminhos de discussão que precisam ser estudados com maior profundidade em pesquisas futuras.

O presente trabalho propõe investigar os indícios tecnológicos, sociais e ambientais na avaliação do Exame Nacional do Ensino Médio (Enem). Uma das propostas que guia essa monografia é a identificação de como é tratado o assunto Química Ambiental nas questões do Enem com ênfase na abordagem em Ciência, Tecnologia, Sociedade e Ambiente (CTSA). Outro ponto é refletir sobre a preparação dos alunos para a avaliação do Enem. O exame tem como objetivos avaliar o desempenho do estudante ao fim da escolaridade básica e selecionar estudantes para ingresso em diversas universidades. Foi abordada Química Ambiental e realizada uma análise critica das questões do Enem de 2009, 2010 e 2011 selecionando aquelas que abordavam CTSA. Aplicou-se o questionário do primeiro momento, com as questões selecionadas, para alunos do 3º ano do Ensino Médio. Foi orientado aos estudantes que preparassem e apresentassem um seminário sobre os temas relevantes com condução e debates em sala de aula e logo após submeteu-se os estudantes a um segundo questionário, a fim de comparar os resultados com o do primeiro momento. Para um terceiro momento foi apresentado um vídeo com o título Defendendo os Rios da Amazônia e proposto um questionário aberto. Ainda realizou-se uma leitura de todas as questões selecionadas a fim de identificar a existência total ou parcial das habilidades exigidas na avaliação e analisaram-se os resultados dos questionários, nos 1º, 2º e 3º momentos, de forma a reconhecer quais as habilidades exigidas dos alunos em cada da questão. Através dos questionários aplicados foi reconhecido, nas questões do Enem selecionadas, um enfoque que nos possibilitou compreender no período analisado, especificamente na área de Química, como esta avaliação se aproxima a perspectiva curricular em CTSA. Os resultados desta monografia apontou que o trabalho favoreceu a melhoria de habilidades por parte dos alunos o que poderia ser aplicado em outras séries e de forma interdisciplinar. Espera-se que, este trabalho seja um início de mudanças de posturas de outros colegas professores de ciências.

Esta pesquisa teve por objetivo principal conhecer aspectos relacionados às condições do trabalho docente no contexto do Programa Reinventando o Ensino Médio da Secretaria de Estado de Educação de Minas Gerais, iniciado em 2012 e suspenso em janeiro de 2015. Buscou-se descrever e interpretar as mudanças na organização do ensino médio com a implantação do Programa; investigar e analisar as condições de trabalho docente em escolas que participaram do Programa, em Belo Horizonte, em diferentes fases; contextualizar e interpretar a concepção dos sujeitos da pesquisa - diretores, coordenadores e docentes - em relação ao Programa. Para a apresentação da situação atual do ensino médio no País e em Minas Gerais, foi realizado um levantamento das estatísticas educacionais: matrículas segundo dependência administrativa, tipos de curso e aspectos gerais sobre os docentes. As hipóteses da pesquisa foram as seguintes: a implantação do Programa permite supor um processo de valorização do ensino médio, que redefine parte do currículo, criando disciplinas específicas organizadas em áreas de empregabilidade; que o Programa contribui para a melhoria das condições do trabalho docente; que o Programa propicia maior interação dos docentes contribuindo para o trabalho coletivo, levando, ao mesmo tempo, a uma intensificação do trabalho docente. A legislação de âmbito nacional e estadual sobre o tema (leis, decretos, portarias e pareceres/resoluções), documentos e estudos produzidos pela Secretaria de Estado de Educação de Minas Gerais, complementados com a realização de entrevistas semiestruturadas junto aos trezes sujeitos participantes - dirigentes estaduais, dirigentes escolares e docentes das denominadas áreas de empregabilidade, das duas escolas amostradas nesta pesquisa, se constituíram nas fontes da pesquisa. Ademais foram aplicados dois questionários somente aos docentes. Os dados permitiram concluir sobre a existência de uma visão crítica dos docentes e também de alguns respondentes em relação ao Programa, sobretudo em relação ao aumento da carga de trabalho, percebida como intensificação do trabalho sem o reconhecimento formal medido em termos de remuneração adequada à jornada exercida. Uma visão eficienticista do Programa por parte de alguns dos entrevistados também foi evidenciada. Percebeu-se, por outro lado, a valorização do ensino médio, a melhoria de alguns aspectos das condições de trabalho docente com os recursos tecnológicos disponibilizados, bem como a necessidade de investimentos na formação dos docentes para assumirem as áreas de empregabilidade.

Esta dissertação analisa a capacitação continuada de gestores escolares no Curso de Especialização em Gestão Escolar integrante do Programa Escola Nacional de Gestores da Educação Básica no Polo Montes Claros na modalidade de Educação a Distância. A problemática da investigação era verificar as condições objetivas e subjetivas para a realização do curso e do seu trabalho proporcionado pelas Secretarias Municipais de Educação aos gestores escolares. Os principais objetivos da pesquisa foram analisar as implicações da formação continuada em serviço na modalidade Educação à Distância, na rotina administrativa e na prática pedagógica dos gestores escolares do curso de Especialização em Gestão Escolar e ainda identificar e analisar as possíveis dificuldades na implementação do Curso de Especialização em Gestão Escolar encontradas nas Secretarias Municipais de Educação do polo Montes Claros. O objeto de estudo foram os Gestores Escolares e os Dirigentes Municipais de Educação envolvidos nesse processo no polo Montes Claros que abrange cerca de 20 municípios. Foram entrevistadas gestoras egressas do curso oferecido pela UFMG nos anos de 2008, 2010, 2012, 2014 e Dirigentes Municipais de Educação: três dirigentes municipais de educação e quatro gestoras. Os dados resultantes da pesquisa estão distribuídos ao longo de três capítulos, nos quais são abordadas as políticas públicas educativas no intuito de compreendermos o conjunto das políticas públicas educativas adotadas em nosso país e as ações governamentais que nortearam o desenho e a formação do Curso de Especialização em Gestão Escolar e sua implementação. Abordou-se ainda a formação continuada dos gestores escolares numa perspectiva de gestão democrática, os fatores que facilitam e ou dificultam essa formação na modalidade EaD e os espaços e tempos dos gestores escolares em seus processos de formação continuada. Compreender os problemas à luz dos princípios que regem a gestão democrática, o papel do Estado e as responsabilidades dos entes federados na oferta da formação continuada dos gestores escolares, especialmente tendo como suporte as novas tecnologias de informação através da Educação a Distância é primordial para aperfeiçoar o trabalho dos profissionais que trabalham como líderes no processo educacional.

Esta dissertação analisou o processo de reordenamento da Rede Federal de Educação Profissional e Tecnológica (REFT), no contexto da expansão da educação superior (ES) e sua repercussão sobre o trabalho dos docentes dos cursos superiores, tomando, como campo do estudo, o Instituto Federal do Norte de Minas Gerais (IFNMG). A problemática da pesquisa pautou-se em identificar o que interferia no exercício da docência nos cursos superiores do IFNMG, no contexto das alterações postas pela política de expansão da ES. A investigação de caráter qualitativo contou com pesquisa documental, observação e entrevistas, como instrumentos de coleta de dados. O estudo evidenciou que a oferta de ES em meio às Reformas da Educação Profissional e Tecnológica vem se consolidando na REFT desde 2008, por meio dos Institutos Federais (IF), que atuam como agentes de expansão da ES. No IFNMG essa expansão ocorre em processo acelerado, no que se refere ao aumento da oferta de cursos superiores, mas lento quanto à adaptação da instituição às regulamentações e normatizações, à implantação da infraestrutura necessária e à contratação de servidores em número suficiente. O modelo de instituição implantado é marcado pela otimização de espaço, infraestrutura, recursos humanos e materiais; oferta de cursos flexíveis e diversificados, tanto em nível quanto em modalidade de ensino; pelas inúmeras finalidades a cumprir; e pela relação íntima da instituição com o mercado. A forma como a expansão da instituição e de seus cursos ocorre submete os docentes a condições de trabalho precárias, já que não lhes são possibilitadas todas as condições materiais necessárias. Não obstante, espera-se dos docentes um perfil multifuncional, com vistas a desenvolver múltiplas atividades e cobrir as lacunas institucionais. Em geral, os docentes percebem as alterações no IFNMG e em seu trabalho, além disso, relatam dificuldades impostas pela rápida expansão e exigência de cumprimento de metas. Pôde-se depreender que a natureza e complexidade da educação ofertada no IFNMG sujeitam os docentes à intensificação do trabalho e que a falta de condições mínimas de trabalho constitui uma reivindicação recorrente dos docentes, inclusive nas pautas de reivindicações de seu sindicato.

Este trabalho analisou práticas de leitura e de escrita no uso do computador e da internet em um Telecentro da comunidade quilombola de Paineiras situada ao norte de Minas Gerais/Brasil. Foram observados aspectos como o letramento no contexto digital, os significados, os valores e as finalidades que membros dessa comunidade conferem ao uso do computador e da internet no telecentro, problematizando alguns conceitos e ideias pertinentes aos estudos sobre inclusão digital. O objetivo, portanto, foi investigar como os jovens da comunidade quilombola integraram Tecnologias Digitais de Informação e Comunicação (TDIC) ao seu cotidiano, à medida que frequentavam o curso de inclusão digital no telecentro, construído nessa comunidade como parte do programa de Inclusão Digital do Governo Federal. Tal proposta situou-se no contexto das discussões sobre o impacto das novas tecnologias na vida dos indivíduos e as consequências culturais e sociais da propagação de novos recursos tecnológicos digitais para a sociedade como um todo. Assim, tomando por objeto de estudo o telecentro como espaço de inclusão digital, investiguei o seguinte problema de pesquisa: quais os significados e as finalidades que alunos de um curso de inclusão digital da comunidade quilombola Paineiras conferem às práticas de leitura e de escrita no uso do computador? Para analisar as práticas de letramento em contexto digital embasamo-nos, principalmente, nos Novos Estudos do Letramento NLS (STREET, 1984, 2003) e, ainda, nos estudos sobre a análise multimodal do letramento (KRESS, 2003; STREET, B. et al., 2009; JEWITT, 2009). Como eixo metodológico, optei pela abordagem etnográfica com o intuito de verificar como as práticas de letramento se instauram em tal contexto, possibilitando observar quem são esses sujeitos que usam o computador na comunidade, que ações passam a executar e as interações que se estabelecem com a implantação do telecentro. A base de dados inclui notas de campo, vídeos e gravações em áudio das aulas no telecentro e entrevistas com os participantes da pesquisa. A análise tornou visível como, quando, onde e para que fins os alunos do curso de inclusão digital utilizam as novas tecnologias e seu significado associado às práticas de letramento locais. Busquei descrever e analisar as práticas de leitura e escrita dos alunos do curso de inclusão digital e seus usos voluntários durante a realização do curso. O contraste entre esses momentos evidenciou que as práticas de leitura e escrita dos alunos do curso foram redirecionadas para práticas locais, em função dos usos sociais. Os dados mostraram também que, embora um curso de informática para uso da tecnologia possa conter em sua programação um conteúdo prescrito para a inclusão do aluno no ambiente digital, essa inclusão pode estar mais relacionada à forma como os usuários se organizam e se envolvem em atividades usando computadores e a internet do que com o uso operacional da tecnologia como meio de inclusão digital.