RCAAP Repository

O Sistema Integrado de Informação e Gestão da Oferta Educativa e Formativa (SIGO) é indicado como a plataforma de registo das ações de formação desenvolvidas no âmbito do Catálogo Nacional de Qualificações (CNQ), nos termos previstos no ponto 2 do art.º 11º e art.º 16ª dos citados diplomas. A Plataforma SIGO não permite a gestão integrada de uma ação de formação, nomeadamente: o levantamento de necessidades formativas, atividade dos formadores, registo de assiduidade para pagamento aos intervenientes, determinação de volumes de formação, elaboração de contratos, gestão de horários, exportação do dossier técnico-pedagógico (DTP) que é obrigatório para todas as ações conforme o previsto no referencial de qualidade da certificação e deveres de entidade formadora certificada. A AlentApp lda. é uma empresa portuguesa sediada no Alentejo e concilia o Mundo das Tecnologias de Informação com a Formação e com a Transformação Digital, empresa esta de que faço parte como desenvolvedora de software, e na qual o trabalho de tese está inserido. O CEO da AlentApp é também um consultor privilegiado do serviço de formação profissional de Évora, no que diz respeito às ações de formação na áreas tecnológicas. Mesmo nesta organização, que é uma das principais entidades formadoras do país, existe uma lacuna na gestão da informação, apesar de existir uma plataforma própria da gestão da formação que permite estabelecer API’s de comunicação privilegiadas com o SIGO e com a Segurança Social (SS). Esta plataforma mencionada anteriormente apresenta algumas lacunas, não permite a gestão de todos os componentes relacionados com os formadores, horários, salas, entre outros. Daí nasceu uma parceria desenvolvida com a AlentApp, que tem em perspetiva criar uma ferramenta onde passe a ser possível uma gestão global de um projeto formativo. Pretende-se desenvolver uma plataforma integrada de gestão da formação que permita agilizar essa função numa perspetiva rentabilizar os esforços necessários para responder à exigências impostas pelos intervenientes internos (formandos e formadores), assim como aos diversos organismos estatais que detêm competências de acompanhamento da atividade ou de financiamento. Esta solução irá permitir uma centralização, à muito desejada, da informação e também uma redução drástica do uso de papel em ambas as entidades, serviço de formação profissional de Évora e AlentApp. Todos os documentos referentes a uma ação (inscrições, registos, formadores, avaliações, pagamentos, etc) tinham que ser compilados em dossieres e armazenados para futuras consultas (histórico), com o desenvolvimento desta ferramenta a impressão de papel será reduzida para mais de metade, ou seja, a informação fica para histórico e consulta digital, tornando o processo da formação mais tecnológico e sustentável.

Um dos mais prestigiados cirurgiões do seu tempo, a Marinha Grande, de onde é oriundo, recorda-o no nome de uma rua.

Foi colaborador de Lopo de Carvalho, a quem sucedeu na cátedra de doenças pulmonares. Teve intensa actividade em prol da pneumologia, tendo criado e desenvolvido diversas estruturas assistenciais e de investigação, nomeadamente a Consulta de Sarcoidose, o Laboratório de Imunologia Pneumológica, o Centro de Investigação INIC para o estudo das Doenças Pulmonares, o Departamento de Cinesiterapia Respiratória, o Departamento de Pletismografia e Endoscopia e o Departamento de Cancerologia Pulmonar.

Widowhood is one of the stressful life events in a life course. Adjusting may be difficult for older adults experiencing a decrease in social networks. This study aims to explore widowhood in old age - the experience of loneliness and subjective well-being. The attachment perspective (Bowlby, 1980), the relational model of loneliness (Weiss, 1973) and the subjective well-being construct (Diener, 2000) are the frames of reference. Sample consisted of 65 Portuguese community-dwelling men and women (65 to 96 years), married and widowed. Participants answered a socio-demographic questionnaire, the Satisfaction with Life Scale (Diener, Emmons, Larson, & Griffin, 1985), the reduced version of the Emotional and Social Loneliness Scale (Stroebe, Stroebe, Abakoumkin, & Schut, 1996) and the Instrumental and Expressive Social Support Scale (Ensel & Woelfel, 1986). Results of discrete discriminant analysis considering age group, gender, emotional loneliness, social loneliness, subjective well-being, emotional, practical and financial support variables showed good discrimination between widowed and married groups. All results were favourable to married participants as far as positive affects were concerned. Weiss theory, the association between loneliness and attachment, was supported, with the marital relationship being a means of emotional support, and widowhood having an impact on the experience of emotional loneliness.

O envelhecimento dos produtores agrícolas e o (des)povoamento rural são, reconhecida- mente, um problema português e europeu, levando-nos a questionar sobre a coesão, a soli- dariedade territorial e as diferentes condições de vida dos empreendedores jovens em espaço rural. É um tema complexo e atual na agenda europeia, que se inicia com a adesão de Portugal à cee, a partir da PAc (Política Agrícola comum), com a sua evolução no sentido do desenvolvi- mento rural baseado na coesão. Hoje, numa perspetiva mais sustentável de resposta às Altera- ções climáticas, ganha cada vez mais relevância. Vivemos uma fase de transição entre eras tecnológicas, em que se recriam novas relações e condições de produção, consumo, relação, entre outros. nos contextos rurais e urbanos, bem como entre eles, com uma grande consciência do desafio climático e na perspetiva de um per- curso de extinção de habitats e espécies com a proliferação de novas formas de renaturalização e artificialização. neste âmbito, a promoção do debate sobre o rejuvenescimento rural, vai para além do contexto agrário, e mesmo rural, integrando aspetos muito relevantes da emergência de novos paradigmas territoriais, societais e de governação. Assim, será preciso olhar por diferentes pris- mas, valorizar diferentes perspetivas, avaliar as condições para o desenho de políticas, instru- mentos, medidas, ações, agentes de revitalização dos espaços rurais e dos ecossistemas. Será preciso aprofundar um debate com base no passado, no presente e com os olhos num futuro muito desconhecido, social e tecnologicamente diferente. As políticas do futuro – eventualmente mais complexas, participadas e integradas – deve- rão ser capazes de gerir uma realidade mais digitalizada, de sistemas adaptativos complexos, com alta intensidade de ligação, sob fortes tensões climáticas, demográficas, tecnológicas, eco- nómicas e políticas, num horizonte em que a extinção de espécies é evidente em vários níveis da cadeia ecológica, alertando para o que possa acontecer à própria espécie humana. neste contexto, este Livro Branco poderá, acima de tudo, ser um contributo para abrir os horizontes de debate sobre o modo como poderemos desenhar «as políticas de fixação de jovens em meio rural» com a finalidade de promover a revitalização dos espaços rurais, princi- palmente dos que possuem baixa densidade populacional.

Tendo como cenário principal a figura legal Jovem Empresário Rural (JER), este documento pretende agregar informação, que possa ser útil a quem procure obter o estatuto JER, com foco: ➢ No empreendedorismo e apoios existentes à sua dinâmica; ➢ Nos modelos de negócio e às possibilidades existentes quanto à sua aplicação; ➢ Lista de Perfis preliminares JER, com base nas entrevistas realizadas; ➢ Recomendações para a transição digital, que já se manifesta, especificamente ao nível do Marketing Digital e estratégias associadas; ➢ Criação de Bolsas de Ideias. São expostas algumas notas e reflexões que possam contribuir para o estímulo e dinamização de modelos de negócio, de modelos de cooperação, de iniciativas locais e regionais que possam potenciar a valorização dos nossos recursos endógenos e da identidade própria de cada território rural, numa perspetiva integrada, no sentido de facilitar a integração do estatuto JER com os outros já existentes e promover as possibilidades associadas a esta figura legal.

Fez, na Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa, a transição da Matéria Médica para Farmacologia. É considerado o fundador da Farmacologia Experimental em Portugal. Dedicou-se à clínica, tornando-se especialista em doenças da tiróide. Foi também um poeta apreciado, actividade que interrompeu quando exerceu a regência de Farmacologia. Não atingiu a jubilação, tendo falecido aos 54 anos. O Município de Lisboa recorda o seu nome numa artéria do Bairro do Arco do Cego (Rua Sílvio Rebelo). Na FMUL, existe hoje o Anfiteatro Professor Sílvio Rebelo.

No presente projeto, caracterizam-se físico-quimicamente quatro protótipos de soluções concentradas (RD_A, RD_B, RD_C, RD_D) com o objetivo de verificar qual apresentava os resultados mais promissores de acordo com as especificações exigidas pelas entidades reguladoras, nomeadamente Organização das Nações Unidas para a Alimentação e a Agricultura, SANCO e a Comissão Europeia, e definidas pela Ascenza. Foram ainda aplicadas técnicas analíticas para a caracterização do produto técnico utilizado para formular os quatro protótipos. Numa primeira abordagem, para as caracterizações físico-químicas recorreu-se a métodos estabelecidos pelo Conselho Analítico Colaborativo de Pesticidas Internacionais, mas também a métodos desenvolvidos no laboratório de Deformulação, nomeadamente para obter o teor de substância ativa no formulado. No que se refere aos quatro protótipos, estes foram caracterizados quer à temperatura ambiente, quer após 14 dias em estufa (54 ºC), com o objetivo de simular o período de validade de dois anos, aplicando-se diferentes técnicas, designadamente a determinação do pH, persistência de espumas, tensão superficial, densidade, estabilidades de emulsão e solução diluída. À exceção dos protótipos RD_A, no qual os valores da espuma e pH foram superiores aos previstos, e RD_D em que a espuma foi superior ao estipulado pela Ascenza, os restantes valores dos quatro formulados estão de acordo com o previamente estabelecido. O teor de substância ativa presente em cada formulado, foi determinado por cromatografia líquida de ultra eficiência com detetor por rede de díodos, tendo sido possível verificar que para além do protótipo RD_C, todos os outros apresentaram as especificações exigidas tanto pelas entidades reguladoras, tanto pela Ascenza. Com base nesta técnica determinou-se o teor da substância ativa presente no produto técnico utilizado para produzir os protótipos, tendo sido de aproximadamente 95%, valor dentro do expectável. Em relação ao produto técnico, foi possível verificar através das diferentes técnicas, nomeadamente Espetroscopia de infravermelho com transformada de Fourier, Termogravimetria combinada com a calorimetria diferencial de varrimento e Cromatografia líquida acoplada a espetrometria de massa tandem, que este era constituído maioritariamente pela substância ativa em estudo. Através da Espetroscopia de infravermelho com transformada de Fourier constatou-se que havia uma correspondência de 0,9883 com o padrão analítico, e que as bandas existentes eram características da substância ativa. Na Termogravimetria combinada com a calorimetria diferencial de varrimento foi possível verificar que o ponto de fusão do produto técnico (98,6 ºC) se encontra próximo do valor referência (98,9ºC). Quanto à Cromatografia líquida acoplada a espetrometria de massa tandem, à energia de 15 eV, foi possível observar algumas das fragmentações características da molécula em estudo, reforçando, assim, que o produto técnico é composto maioritariamente por esta substância ativa. Em suma, com base nas técnicas desenvolvidas e aplicadas, foi assim possível concluir que o protótipo RD_B é o que evidencia resultados mais concordantes com as especificações estabelecidas pelas entidades reguladoras e pela Ascenza. No que diz respeito ao produto técnico, conclui-se ser constituído maioritariamente pela molécula em estudo.

Gymnastics clubs and federations need to register their members and teams in competitions and handle memberships in a more digitalized way. The goal of this project is to create a solution for this problem in Angular, following the reactive programming paradigm, and using a serverless architecture. This document will give a good comprehensive overview of the conceptual world of the organization of gymnastics events, and explain the architecture, and technologies used by the web application where the Membership and Registrations solution will be included. The solution will have to take into account functionality, security, and maintainability requirements. The solution’s development will be presented, from the planning phase, where the use cases were defined as well as the organization of the code, to the final implementation of those use cases. Finally a reflection on the impact of this new solution on gymnastics and what can still be improved will be presented.

The existence of crime-related racial stereotypes has been well documented. People tend to associate certain groups with specific crimes, which, in turn, impacts criminal-sentencing decisions through the perceptions of crime severity. This evidence calls for regular updating of rating norms combining these variables. With this objective, and given that most of the normative studies provide norms for a small number of crimes and/or with an insufficient number of participants, a new norming study was conducted. Furthermore, norms from European countries are absent, and the existing ones (mostly with USA-based populations) do not simultaneously examine crime stereotypicality and crime severity. The Crime Stereotypicality and Severity Database (CriSSD) presents normative ratings for a set of 63 crimes on three dimensions: White stereotypicality, Black stereotypicality, and crime severity. The crimes were selected according to a comprehensive procedure. A total of 340 Portuguese participants (72.6% female; Mage = 26.86, SD = 7.65) answered an online survey. Each crime was evaluated by a range of 46–60 participants. Data allowed us to identify a crime typology with three clusters. We present descriptive data (means, standard deviations, and 95% confidence intervals) for each crime. Crime evaluations were associated with sociodemographic characteristics. Additionally, this study gives input regarding the understudied link between crime stereotypes and crime severity, showing that crime severity is predicted by ratings of both Black and White stereotypicality. The CriSSD (available at osf.io/gkbrm) provides a valuable resource for researchers in the field of social psychology to conduct studies with controlled materials on potential disparities in criminal-sentencing decisions.

A utilização de Inteligência Artificial na área da saúde e a busca por algoritmos mais ´ eficientes tem vindo a crescer, estima-se que ate 2025 o seu valor no mercado aumente ´ 41,5%. [1] Paralelamente ao tema Inteligência Artificial há o tema saúde mental e física que também tem ganho cada vez mais prestígio. Em 2020, foi estimado que 825.7 milhoes de pessoas iriam usar aplicações de treino e de nutrição, um aumento de 26% num ano. [2] Este trabalho e desenvolvido no âmbito empresarial e o foco e juntar os dois temas mencionados e desenvolver uma plataforma Salesforce que ira tornar mais eficiente o trabalho de profissionais de treino e nutricionistas, facilitando algumas das suas funções e também dar ao utilizador comum uma plataforma simples e eficaz de registar os seus treinos e refeições de forma a obter resultados rápidos e sem complicações. Salesforce, e uma plataforma como serviço assente no conceito de Customer Relationship Management (CRM). E considerada uma plataforma low-code e o seu armazenamento encontra-se totalmente em nuvem. O ecossistema Salesforce e vasto e uma das tecnologias utilizada neste projeto e o Saleforce Einstein [3], que se traduz em Inteligência Artificial para um CRM.

No summary/description provided

Discípulo de Sílvio Rebelo, dedicou-se fundamentalmente à Bioquímica e à Terapêutica. Depois do falecimento do Professor Ferreira de Mira e da separação entre a Bioquímica e a Química Fisiológica, promoveu o desenvolvimento da Endocrinologia.

Desenvolveu actividades de dinamização do associativismo estudantil, no período anterior ao 25 de Abril, sendo um dos fundadores do movimento “Pró-Associação de Estudantes da FMUL”. Dedicou grande parte da sua actividade à divulgação, na comunidade e por todo o País, de temas relativos à sua especialidade, como a saúde da mulher e da criança, o planeamento familiar e outros, em parceria como Albino Aroso e Manuel Torrado.

O objecto deste estudo é o teatro na caricatura de imprensa de Rafael Bordalo Pinheiro entre os anos de 1870 e 1905. Analisa-se a obra gráfica bordaliana numa dupla vertente: enquanto criação artística que, num determinado contexto histórico e cultural, se serve da metáfora teatral para a modelização do real; e enquanto fonte documental relevante para o conhecimento da história do teatro na Lisboa de finais de oitocentos.Situa-se a iconografia de Rafael Bordalo Pinheiro na tradição satírica de representaçãodo teatro e interpela-se a teatralidade do universo imagético bordaliano, procurando compreender de que modo teatro e caricatura se intersectam na obra gráfica. Analisa-se um corpus de desenhos satíricos, na confluência de vários materiais: textos escritos (peças de teatro, críticas de imprensa a espectáculos, memórias de actores, crónicas e ensaios) e outros materiais iconográficos (fotografias, ilustrações de peças e caricaturas de outros artistas). De um volume em anexo constam três índices onde se inventariam as referências ao teatro (em palavra e imagem) nos periódicos de Rafael Bordalo Pinheiro o de peças/espectáculos, o de profissionais e o de autocaricaturas relacionadas com a arte teatral.

O Concelho de Castro Verde, região do Baixo Alentejo, visa o turismo como uma nova tendência mercadológica para a região, que tem na exploração mineira o principal responsável pela movimentação da economia local. A Liga para Protecção da Natureza, por sua vez, promove na região a exploração do ecoturismo, em particular o produto de birdwatching. Tal actividade, bastante específica, atrai turistas das mais diversas regiões do mundo, gerando, consequentemente, algum impacte social e económico no Concelho. O presente estudo busca analisar e evidenciar estes impactes e de que maneira contribuem para o desenvolvimento desta comunidade. Trata-se de uma análise exploratória, qualitativa, quantitativa e documental, onde foram levantados dados existentes nos organismos públicos e privados, a realização de inquéritos nos diversos níveis da sociedade, além de consultas a artigos, livros, dissertações, teses, entre outros. Tais análises trouxeram resultados que revelam a necessidade de uma maior aproximação por parte da LPN à comunidade e operadores turísticos locais, uma vez que o impacte gerado a nível económico ainda é bastante ténue, enquanto que socialmente a instalação da LPN e a exploração do ecoturismo significam um intercâmbio cultural positivo e uma valorização e orgulho do património natural local por parte de sua população.

Nos dias de hoje, as empresas têm cada vez mais consciência ecológica em relação às substâncias que utilizam, assim com os produtos produzidos. Essa consciencialização parte não só da própria empresa, mas também da legislação e normas em vigor que são cada vez mais restritivas no que toca ao uso de substâncias perigosas tanto ao nível da saúde como a nível ambiental. Com este cenário as empresas realizam cada vez mais análises e investem numa metodologia cujo objetivo é identificar, comparar e selecionar substâncias químicas consideradas preocupantes, tendo em conta os seus riscos para a saúde e meio ambiente, por outras substâncias alternativas. É um processo demorado, que inclui vários fatores, tanto a nível físico-químico como a nível económico e frequentemente, é compelido pela obrigação de cumprir a lei. Esta dissertação tem consequentemente, o objetivo de avaliar a necessidade de efetuar substituições de substâncias na indústria portuguesa que sejam consideradas perigosas de acordo com o regulamento REACH, Regulamento (CE) n.º 1907/2006, relativo ao registo, avaliação, autorização e restrição dos produtos químicos na união europeia. Recorreu-se à base de dados REACH IT, uma base de dados de acesso restrito que identifica empresas em Portugal que utilizem substâncias consideradas perigosas atualmente. Nesta base de dados realizou-se uma pesquisa sobre as empresas registadas a atuarem em Portugal que utilizam substâncias presentes no Anexo XIV (autorizações) e XVII (restrições) do REACH e que constam na lista de SVHC’s (substâncias que suscitam elevada preocupação), candidata a autorização da ECHA. Realizou-se um inquérito ao centro tecnológico das indústrias do couro (CTIC) e a empresas com alguma forma de ligação ao mesmo centro sobre a utilização de substâncias perigosas. Identificadas as empresas (informação confidencial) e respetivas substâncias, realizou-se uma pesquisa sobre as propriedades e utilização dessas substâncias e selecionou-se 1 substância para a execução de uma análise de alternativas. Em paralelo, foi feita uma pesquisa dos vários métodos e ferramentas disponíveis para a realização de análise de alternativas e avaliaram-se os parâmetros com maior importância e mais usados na realização de uma avaliação deste tipo. A partir deste estudo, preparou-se uma ficha modelo de substituição, onde se incluiu de uma forma geral e simplificada o que é necessário avaliar em cada substância, de modo a determinar a melhor alternativa existente.

O complexo Mediador (Med) é um co-activador de transcrição mediada pela enzima RNA Polimerase II (PolII). Este complexo está envolvido em mediar a conexão entre fatores de transcrição/ativadores, ligados a enhancers, e a PolII, sendo composto por múltiplas subunidades. Possui quatro domínios – cabeça, centro, cauda e cinase – que estão estrutura- e funcionalmente conservados nos eucariotas ainda que o número de subunidades varie de acordo com a complexidade dos organismos. Os módulos referentes à cabeça e centro são principalmente responsáveis por ligações com a PolII. A cauda está envolvida em contactos com fatores de transcrição/ativadores ligados a sequências específicas do DNA. O módulo da cinase está envolvido na regulação do complexo podendo ter um papel regulador positivo ou negativo na expressão génica, conseguindo associar-se de modo reversível a Med. A elevada quantidade deste complexo proteico está associada à presença de super-enhancers (SEs) que emergiram recentemente como reguladores críticos de crescimento e também de tumorigénese. Este subgrupo de enhancers é composto por extensos domínios de enhancers (em comparação com enhancers típicos), por estar associado a fatores de transcrição chave (e outros reguladores como Med) e por conduzir à elevada expressão de genes essenciais para a manutenção da identidade celular. Os SEs são altamente sensíveis a alterações na expressão de reguladores transcricionais associados como Med. Por esta razão, perturbação na regulação de SEs pode levar a transformação maligna. A formação de tumores assenta em grande parte na desregulação de transcrição, afetando a expressão de diversos genes e vias de sinalização. Devido ao seu papel essencial em regular vários processos biológicos como identidade celular, proliferação e crescimento, subunidades de Med têm vindo a emergir como estando associadas a diversos tipos de cancro. Além disso, a função de certas subunidades deste complexo parece variar de acordo com o tipo de célula e contexto (tipo de tumor, por exemplo) em que estão inseridas. Apesar de se saber que Med está envolvido em vários tipos de cancro, não se conhece completamente os mecanismos através dos quais age para influenciar o desenvolvimento/formação de tumores, nomeadamente tumores cerebrais, predominantes na infância. Tumores pediátricos são caracterizados por necessitarem de menor quantidade de mutações, em comparação com tumores em adultos, para serem formados. Vários estudos têm conectado a formação deste tipo de tumores com células precursoras neurais (do sistema nervoso em desenvolvimento) enquanto células originadoras de tumor, o que se deve provavelmente à elevada susceptibilidade destas células a transformação maligna. O papel de Med neste tipo de tumores não é conhecido ainda. A mosca da fruta Drosophila melanogaster é um bom sistema para estudar tumores derivados de células estaminais neurais, ou neuroblastos (NBs) devido à presença de linhagens de NBs tipo I e tipo II, que se assemelham às existentes em mamíferos. NBs tipo I dividem-se assimetricamente produzindo outro NB e uma GMC (“ganglion mother cell”) que se divide simetricamente originando neurónios/glia. NBs tipo II dividem-se assimetricamente para formar outro NB e uma célula progenitora neural intermédia. Esta célula é capaz de se autorrenovar e ao mesmo tempo produzir uma GMC que por sua vez produz dois neurónios/glia. Um dos mecanismos que contribui para a divisão assimétrica de NBs provém da segregação desigual de determinantes do NB para a célula-filha que se comete ao processo de diferenciação. Dois destes determinantes – Brat e Numb – são segregados para a célula precursora em ambas as linhagens de NBs. A linhagem tipo I segrega adicionalmente Prospero (Pros). Inativação de Brat ou Numb leva à formação de tumores derivados de NBs tipo II enquanto inativação de Pros leva à formação de tumores provenientes de proliferação descontrolada de NBs tipo I. Após inativação destes genes, as células precursoras são incapazes de se cometerem a uma identidade mais diferenciada, desdiferenciando-se em células semelhantes a NBs. O papel de Med na formação deste tipo de tumores (provenientes de NBs) não é conhecido. Assim, o primeiro objetivo deste estudo foi avaliar se Med (ou as suas subunidades) é necessário para o desenvolvimento de tumores derivados de neuroblastos tipo II. Para isso, o knockdown (KD) individual de subunidades pertencentes aos quatro módulos foi feito, usando o sistema UAS-Gal4, e o volume de tumores BratRNAi foi quantificado. Esta análise permite perceber (1) se Med é necessário para o desenvolvimento tumoral derivado de NBs (2) se existe um requerimento diferencial das subunidades testadas e (3) se os diferentes módulos têm a mesma relevância em contribuir para o desenvolvimento tumoral. KD da maioria das subunidades resultou em tumores BratRNAi significativamente mais pequenos que o controlo (BratRNAimcherryRNAi). Além disso, ao contrário dos outros módulos, foi demonstrado que a depleção da maioria das subunidades testadas do módulo cauda não alteraram o tamanho dos tumores o que indica que este módulo não é tão crítico como os outros módulos para este tipo de tumor. Ainda assim algumas subunidades deste módulo parecem ser essenciais para tumores BratRNAi indicando um requerimento diferencial das diferentes subunidades do complexo. Outra questão pertinente prende-se com a relevância de subunidaes específicas em diferentes contextos, especificamente em diferentes tipos de tumor. Assim, o segundo objetivo foi testar o KD de um pequeno grupo de subunidades cuja depleção originou diferentes resultados em tumores Brat RNAi, noutro tipo de tumor derivado de NBs, nomeadamente, tumores ProsRNAi. Estes tumores, como descrito anteriormente, formam-se a partir de neuroblastos tipo I após inativação de Pros. KD de várias subunidades foi feito neste tipo de tumor. A depleção de algumas subunidades do módulo da cabeça resultou em tumores BratRNAi mais pequenos, mas não alterou o tamanho dos tumores ProsRNAi indicando que a função deste módulo é específica consoante o tipo de célula/tumor em que se insere. Por outro lado, a depleção de uma subunidade do centro do complexo resultou em tumores BratRNAi e ProsRNAi mais pequenos em comparação com os tumores controlo, refletindo a importância deste módulo para o crescimento tumoral proveniente de NBs. A sua relevância vital pode dever-se ao facto de conferir estabilidade/integridade a Med e a sua depleção pode perturbar essa estabilidade afetando a transcrição de vários genes vitais à homeostasia celular. No caso das subunidades da cauda do complexo, os diferentes tumores responderam de forma distinta à sua depleção sugerindo um requerimento muito diferente destas subunidades nos dois tipos de tumor. No geral, estes resultados indicam funções específicas para as subunidades de Med que parecem atuar de forma diferente consoante o contexto em que se inserem. Ao todo, estes resultados demonstram a importância de Med no desenvolvimento tumoral provenientes de células estaminais neurais. Em adição, estes resultados também sugerem que o contexto transcricional de BratRNAi e ProsRNAi é distinto. O objetivo seguinte foi perceber como é que Med atua para promover o crescimento tumoral. Dada a disponibilidade de uma análise transcriptómica de NBs depletados de Med (versus neuroblastos wild-type), análise transcriptómica de tumores BratRNAi (versus neuroblastos tipo II wild-type) e análise de um dataset de Targeted DamID para algumas subunidades de Med, foi possível identificar alguns genes que são diferencialmente expressos. Mais especificamente, estes genes são considerados como potenciais genes que são ativados pelo Med para promover o crescimento de tumores BratRNAi. Experiências subsequentes de KD de uma seleção destes genes candidatos em tumores BratRNAi permitiu, de facto, identificar dois genes cuja depleção afeta negativamente o crescimento destes tumores. No entanto, continua a ser necessário confirmar que de facto a depleção de certas subunidades de Med em tumores BratRNAi leva a uma diminuição na ativação destes dois genes. Este estudo contribui para a compreensão da relevância e mecanismos por trás do papel de Med em suportar o desenvolvimento tumoral em tumores derivados de células estaminais neurais.

As florestas fornecem serviços de ecossistema hidrológicos importantes, como a provisão de água limpa, a regulação de fluxos de água, a prevenção de erosão e a conservação do solo. Os fogos florestais constituem grandes perturbações destes serviços, podendo, no limite, levar a problemas de saúde pública para as comunidades. As medidas de gestão florestal pós-fogo podem ser muito dispendiosas, e a sua efetividade depende de muitos fatores, isto é, depende das próprias medidas, extensão da sua aplicação e a seleção de áreas-alvo, bem como fatores físicos como a topografia, a precipitação, usos de solo, entre outros. Este trabalhou focou-se na averiguação de que medidas de conservação da água e do solo são as mais efetivas na restauração dos serviços de ecossistema, após perturbação causada pelos fogos florestais, nomeadamente em relação à prevenção da erosão do solo e da contaminação dos cursos de água, após um evento de precipitação. O modelo escolhido para este trabalho foi o modelo físico e hidrológico OpenLISEM, versão 5.97. A escolha deste modelo deveu-se, primeiramente, devido à sua capacidade de simular a escorrência, quantidade de sedimento e a erosão total para as condições antes e após o fogo. Para além disso, este modelo havia sido previamente calibrado e validado para a bacia hidrográfica de Odiáxere, no sul de Portugal, usando dados recolhidos das condições pré- e pós-fogo para os fogos florestais de 2003. Parametrizaram-se e testaram-se cinco medidas de conservação do solo e da água no modelo. Estas incluem espalhamento de palha/ estilha/ coberto de vegetação morta (mulching), barreiras de vegetação ripícola (riparian buffers) e barreiras à erosão, como barreiras de troncos caídos (contourfelled logs), barreiras de mangas de palha (straw wattles) e ainda barreiras de vala-e-cômoro (contour bunds). Destas, apenas as barreiras de vegetação ripícola se enquadram no grupo de medidas de prevenção, isto é, aplicadas/ instaladas antes da ocorrência de um fogo florestal. As restantes constituem medidas de remediação pós-fogo, agrupadas em medidas agronómicas (espalhamento de palha e de estilha de resíduos florestais) e medidas estruturais, designadas por barreiras à erosão, como barreiras de troncos caídos, barreiras de mangas de palha e barreiras de vala-e-cômoro. Todavia, todas as medidas foram estudadas de igual modo, num cenário pós-fogo, para facilitar a sua análise comparativa. O foco foi estudar a eficácia das medidas, usando uma tempestade de precipitação média-severa, após a ocorrência de um fogo de média severidade, na redução da escorrência, erosão do solo e contaminação da água da bacia em estudo. Os resultados obtidos pelo modelo foram gráficos do fluxo de sedimentos, gráficos da escorrência e mapas de erosão do solo. Estes resultados permitem avaliar as medidas relativamente à conservação da água (prevenção da sua contaminação), risco de cheias e conservação do solo, respetivamente. Estes resultados foram subsequentemente analisados, com recurso a análises multicritério (MCA). As análises multicritério contaram também com informações relativas aos custos dos materiais e às especificações de aplicação das medidas estudadas. Estas informações foram recolhidas de outros trabalhos e junto de peritos, facilitando a elaboração de estimativas de preços praticados atualmente, para os diversos critérios. Para esta componente, consultaram-se peritos na aplicação das medidas estudadas no campo, engenheiros florestais, outros investigadores, viveiros, trabalhadores agrícolas/ florestais e empresas de transportes. Por fim, é possível trabalhar os resultados de maneira a apresentar informação mais prática, para os governantes locais, gestores florestais, e responsáveis/ partes interessadas na conservação da qualidade da água e proteção do solo. Os resultados mostram que a medida mais eficaz, tanto em termos de custo-eficácia como na proteção do solo é o espalhamento de palha (straw mulching), seguido da aplicação de estilha de resíduos florestais (forest residue mulching) sobre o solo. Relativamente à conservação da água, as medidas que obtiveram as maiores classificações foram as barreiras de troncos (contour-felled logs) e as mangas de palha (straw wattles). Neste último critério, a eficácia das barreiras da encosta apresentou valores superiores aos valores encontrados na literatura. Relativamente à perspetiva de conservação da água, a performance do modelo não replicou resultados de trabalhos anteriores, mostrando uma eficácia na retenção de sedimentos muito mais elevada do que na realidade acontece com as barreiras de troncos e mangas de palha. Contudo, os resultados foram considerados fiáveis para as comparações efetuadas, havendo sensibilidade nas análises efetuadas. Para além disso, estas barreiras à erosão só são eficazes em condições de precipitação pouco severa e têm de estar muito bem construídas, para conseguirem reter sedimentos e cinza que escorrem pela encosta. Para além disso, a elevada eficácia destas barreiras pode dever-se a uma simulação um pouco errónea das medidas no modelo, por exemplo, se as medidas forem aplicadas sobre cursos de água na encosta. Em contrapartida, a técnica do espalhamento de palha/ estilha de madeira é algo de muito mais fácil aplicação, sendo possível ainda cortar custos, com recurso ao trabalho de voluntários. Em trabalhos futuros, seria importante testar mais medidas pré-fogo, de modo a poder comparar a efetividade não só das medidas de remediação após a ocorrência de fogos florestais, mas também a efetividade das medidas pré-fogo na prevenção de fogos florestais e, consequentemente, da degradação dos solos e contaminação dos cursos de água, resultantes dos mesmos. Relativamente ao risco de cheias, decorrente de eventos de precipitação média-severa após fogos florestais, seria também importante calibrar o modelo para este critério. Deste modo, mais informação poderia ser recolhida e analisada, fornecendo ferramentas úteis, sobretudo para administradores locais, de modo a zelarem pela proteção das populações e infraestruturas. Finalmente, testar modelos diferentes para simular e analisar as medidas estudadas neste trabalho permitirá comparar resultados e performance dos modelos, bem como adquirir mais informação sobre a efetividade das medidas, e ainda estar medidas em conjuntos, estudando possíveis sinergias. Este trabalho ajuda a ter uma perspetiva também dos custos de implementação destas medidas. É possível ver que, de modo a reestabelecer os serviços de ecossistema providenciados pelas florestas, após a ocorrência de fogos florestais, seguidos de eventos de precipitação, é preciso haver investimento e uma resposta rápida. Contudo, é também importante evitar estas catástrofes e custos associados para a sua resolução, direcionando os esforços para a prevenção dos incêndios florestais, através da criação de florestas mais resilientes.

A matriz extracelular (MEC) é uma complexa rede acelular presente em todos os tecidos e fornece um suporte físico para as células. Embora a sua composição seja variável e especifica dependendo do tecido, os principais constituintes são água, glicoproteínas (como colagénios, fibronectina e laminina), elastina, proteoglicanos e hialurano, que conjuntamente com outros componentes se designam de matrissoma. Existem dois tipos principais de MEC, a matriz intersticial de estrutura fibrosa ou semelhante a gel e a membrana basal que está em contacto com as células. A MEC tem a função de estabilização de células e tecidos, fornecendo substratos de adesão celular em fase sólida e ligando a MEC ao citoesqueleto das células via recetores transmembranares. A MEC desempenha também um papel chave como reservatório de fatores de crescimento e moléculas bioativas que controlam os comportamentos e características fundamentais das células como sinalização, proliferação, adesão, migração, polaridade, diferenciação e apoptose. Mutações nos componentes da MEC, nas proteínas transmembranares ou em proteínas que liguem a MEC ao citoesqueleto das células musculares esqueléticas podem levar a distrofias musculares. As distrofias musculares congénitas representam um grupo de doenças que causam fraqueza (hipotonia) e atrofia muscular, sendo detetadas logo, ou pouco após a nascença. Estas são doenças geralmente hereditárias e associadas a mutações autossómicas recessivas. A distrofia muscular associada ao gene LAMA2 (LAMA2-CMD) é a distrofia muscular congénita mais comum e esta doença neuromuscular, tal como o nome indica, é desencadeada por mutações no gene LAMA2, que codifica para a cadeia α2 das lamininas 211/221, levando à redução da força muscular e a constrangimentos na regeneração muscular, sendo que atualmente não existe cura para esta doença. A ausência desta proteína leva a danos nas miofibras e a tentativa de reparação deste dano por regeneração, através das células estaminais musculares adultas (células satélite), não ocorre com sucesso. As fibras musculares entram em degeneração através da indução de apoptose, que é seguida de regeneração e inflamação crónica, e como consequência o tecido muscular é substituído por tecido fibrótico e adipócitos. Estudos anteriores do laboratório utilizando a estirpe de ratinho dyW, a qual é um dos modelos mais utilizados para o estudo de LAMA2-CMD, sugerem que a laminina 211 desempenha um papel importante durante o desenvolvimento e crescimento muscular normais durante o período fetal. Em particular, os resultados mostraram que entre os dias embrionários (E)17.5 e E18.5, portanto durante o período fetal, o número de células musculares estaminais (células Pax7 positivas) e mioblastos diferenciados (células miogenina positivas) torna-se reduzido em fetos dyW, em comparação com os controlos e verifica-se um atraso no crescimento muscular. Contudo, desconhece-se que mecanismos causam esta redução no crescimento muscular, que vias de sinalização são afetadas e se a proliferação e/ou diferenciação das células estaminais musculares esqueléticas e mioblastos são afetadas. Um dos objetivos deste projeto é compreender se a diferenciação de mioblastos está afetada na ausência de Lama2, e quais as vias envolvidas. Para tal foi utilizada uma linha celular de mioblastos, C2C12, na qual o gene Lama2 se encontra mutado, com o objetivo de estabelecer um modelo in vitro para LAMA2-CMD que pudesse ser utilizado para responder a esta questão. A análise de células mutadas para Lama2 permitiu revelar que a formação de miotubos fica comprometida nesta linha celular em comparação com a linha celular selvagem. Tendo feito esta observação, fulcral para o projeto, seguiu-se então o estudo de quais as vias responsáveis pelo defeito na diferenciação. Conhecida por ser responsável pela transição entre a miogénese embrionária e fetal, a via do Nfix foi um dos focos da análise das vias que afetam a diferenciação dos mioblastos, assim como a via da miogenina, que leva à diferenciação terminal dos mioblastos e a via Jak-Stat3, a qual desempenha um papel duplo na proliferação e diferenciação dos mioblastos. Os dados obtidos in vitro sugerem um aumento significativo dos níveis de expressão da proteína Nfix e uma diminuição dos níveis de expressão do gene Myog, que codifica para a miogenina, bem como uma desregulação na expressão génica dos genes alvo de ambas as proteínas. Os dados in vivo sugerem uma tendência para uma diminuição da expressão do gene Myog em amostras de musculo epaxial de ratinhos dyW e uma tendência para um aumento da expressão do gene Nfix no estádio E17.5, assim como uma desregulação na expressão dos seus genes alvo. No estádio E18.5 os dados sugerem uma tendência para uma diminuição da expressão do gene Nfix em amostras de músculo epaxial de ratinhos dyW. O eixo de sinalização RhoA/ROCK-Erk foi descrito como sendo importante na ativação do Nfix, e a proteína FAK como sendo importante para a diferenciação dos mioblastos através da ativação do fator regulatório miogénico MyoD e por isso estes fatores foram igualmente alvo de análise in vitro. Os níveis de expressão de P-FAK e P-Erk mostram uma tendência para aumento in vitro na ausência do gene Lama2, assim com in vivo, em amostras de musculo epaxial de ratinhos dyW, no estádio E17.5. Tendo em conta estudos recentes e os resultados obtidos de aumento da expressão de Nfix na ausência de Lama2, coloca-se a hipótese de que o aumento dos níveis de Nfix se deva a uma tentativa de controlo da sobrexpressão da proteína miostatina, a qual inibe a miogénese através da inibição da expressão de Myf5, um fator miogénico importante para o processo de diferenciação. Coincidente com a diferenciação comprometida nas linhas celulares C2C12 com o gene Lama2 silenciado, verificou-se uma retenção significativa de Myf5 no citoplasma comparando com as células musculares C2C12 selvagens. Contudo é necessário validar no futuro os níveis de expressão génica e proteica da miostatina. Como mencionado, a via Jak-Stat tem um papel importante na diferenciação dos mioblastos e os resultados obtidos mostram um aumento significativo da expressão da proteína de P-Stat3 in vitro, assim como uma tendência para um aumento in vivo no estadio E.17.5. Tal está de acordo com estudos anteriores do laboratório que mostraram um aumento de P-Stat3 no musculo fetal de ratinhos dyW, no estádio E17.5. Os dados obtidos indicam que a laminina 211 desempenha normalmente um papel na modulação da diferenciação dos mioblastos e a sua ausência leva á desregulação de algumas das vias importantes para a proliferação e diferenciação dos mioblastos. Os resultados sugerem também que a linha celular de mioblastos C2C12 sem o gene Lama2, pode ser um bom modelo in vitro para LAMA2-CMD, tendo em conta a semelhança com os resultados obtidos in vivo, em particular para as amostras de ratinho dyW, no estádio E17.5. Um outro objetivo deste projeto foi verificar o impacto da ausência de LAMA2 em linhas celulares tumorais de melanoma e cancro colorectal, uma vez que ambas foram descritas como tendo alterações na expressão de LAMA2. Tendo sido descrito como significativamente expresso em melanoma e cancro colorectal e promover a proliferação e migração, o gene ENO1 que codifica para a enolase alfa foi analisado e verifica-se uma tendência para diminuição de expressão nas linhas tumorais de melanoma, o que poderá indicar que na ausência de LAMA2, há uma diminuição na proliferação e migração. Tendo em conta os resultados obtidos nas células musculares esqueléticas verificou-se também os níveis de expressão da proteína P-Stat3 para a linha tumoral colorectal e verifica-se igualmente uma tendência para um aumento da sua expressão, na ausência de LAMA2. Os dados sugerem um ponto chave na ausência de LAMA2 nas MEC, sendo que independentemente do tipo celular e da doença há um aumento da expressão da proteína P-STAT3 quando há ausência da Laminina 211/221. Identificar estas vias e mecanismos é essencial para o desenvolvimento de terapias que tenham como alvo direto o início destas doenças.