Repositório RCAAP

The techniques used to assess usability, user experience, emotions, etc., perceived by users when using applications are predominantly based on questionnaires. Although these questionnaires yield solid results, they can become monotonous, tiresome, and even demanding, potentially triggering negative feelings in users and consequently affecting the reliability of the questionnaires. One way to overcome these issues would be to infer usability, user experience, and perceived emotions from users’ physiological signals while they use the applications. To achieve this inference, it is necessary to have reliable information that allows for a correlation between physiological signals and usability and user experience measures. This work represents a first step in this direction, and our goal is to create a dataset composed of users’ physiological signals and the results of standard questionnaires while they interact with interactive applications. To accomplish this, we conducted two user experiments in which participants performed a set of tasks in interactive applications while we collected their physiological signals and their responses to standard questionnaires. At the end of the study, we validated the data through statistical analysis, which revealed that there was no statistical differences between the two experiments. Based on this validation, we constructed a dataset that includes physiological signals (electroencephalography, photoplethysmography, accelerometer, gyroscope) and scores from standard questionnaires (System Usability Scale, User Experience Questionnaire Short, Single Ease Question, NASA Task Load Index, Usability Metric for User Experience Lite, Self-Assessment Manikin). This dataset will enable future research to investigate the relationship between these two types of data and subsequently create models to infer perceived usability from physiological signals, eliminating the need for questionnaire completion, improving user testing sessions, and reducing their duration.

This paper aims to explore the association between over-indebtedness and two facets of well-being – life satisfaction and emotional well-being. Although prior research has associated over-indebtedness with lower life satisfaction, this study contributes to the extant literature by revealing its effects on emotional well-being, which is a crucial component of well-being that has received less attention. Besides subjective well-being (SWB), reported health, and sleep quality were also assessed. The fndings suggest that over-indebted (compared to non-over-indebted) consumers have lower life satisfaction and emotional well-being, as well as poorer (reported) health and sleep quality. Furthermore, over-indebtedness impacts life satisfaction and emotional well-being through different mechanisms. Consumers decreased perceived control accounts for the impact of overindebtedness on both facets of well-being (as well as on reported health and sleep). Financial well-being (a specifc component of life satisfaction), partly mediates the impact of indebtedness status on overall life satisfaction. The current study contributes to research focusing on the relationship between indebtedness, well-being, health, and sleep quality, and provides relevant theoretical and practical implications.

The presented dissertation explores the manufacturing process of a vacuum chamber designed for the purpose of evaluating and comparing the performance of two avalanche photodiodes operating in both linear and Geiger-mode regions for single photon counting across various temperature states and NIR1 optical emission power modes. The research encompasses the design, construction, and comprehensive testing of a mini-test chamber capable of accommodating two sensors simultaneously, covering mechanical, optical, and electrical aspects. Throughout the conducted experiments, the chamber demonstrated its ability to maintain a stable vacuum environment of up to 9.4 Pa while offering precise temperature control within the range of 333 K to 244 K, safely supplied with up to 15 A and 200 V. This setup facilitated the characterization and comparison of one of the photodiodes under four distinct temperature conditions: 291.95 K, 270.15 K, 253.95 K, and 249.55 K, with the injected optical power varied in both continuous wave and pulsed modes. To directly assess the response of the sensors, two readout circuits were chosen as optimal solutions. The first was a transimpedance amplifier2 circuit, which facilitated the study of the photodiode’s behavior in the linear mode, below the breakdown voltage. By leveraging its gain, current values in this region could be accurately measured, allowing for detections as low as 3 × 10−9 A and achievable gains of up to 300 with a signal-to-noise ratio of 112 dB. The second was a passive quenching circuit, focused on examining the photodiode’s operation in the Geiger-mode region, above the breakdown voltage. By operating the sensor within the entire workable reverse bias range, the impact of the quenching resistor could be investigated. This circuit achieved gains of up to 600 and a photon detection rate (PDR) of up to 5.6 MHz with a minimum terminal capacitance of 3.7 × 10−12 F. Additionally, AC/DC polarization was applied to the sensor to explore the impact of a wave time-changing biasing.

This paper addresses whether overindebted and non-overindebted consumers differ in their attitude toward money (specifically, the degree to which consumers care about money and feel difficulties keeping track of their money) and how this attitude impacts three different financial behavior categories: record keeping (e.g., recording spending in writing), adjusting balance (e.g., trying to find ways to decrease one’s expenses to match income), and monitoring balance (e.g., monitoring one’s spending to see if it is in line with what is expected). Overindebted consumers were recruited via an NGO for consumer defense and were categorized (whenever possible) into two subgroups: consumers who became overindebted due to internal causes (e.g., bad financial management) and consumers who became overindebted due to external causes (e.g., unemployment). Non-overindebted consumers were a convenience sample. Non-overindebted consumers showed more positive attitudes toward money than both groups of overindebted consumers and overindebted due to external causes showed more positive attitudes than overindebted consumers due to internal causes. All groups share similar financial management behaviors except for monitoring balance, which was more frequent among non-overindebted consumers. Furthermore, a regression analysis indicates that money attitudes helped explain financial behavior differences between consumers above and beyond their indebtedness status. Consumers’ attitude predicted financial behaviors, even when controlling for relevant socioeconomic variables (education, income, age, and gender). Further analyses comparing money attitudes and financial behavior for the three subgroups (non-overindebted, overindebted due to internal causes, and overindebted due to external causes) showed no differences.

The present document describes the creation and implementation of a dynamic seat selection algorithm in the Unity game engine, designed with the aim of being used in simulations involving realistic autonomous virtual humans. This is the start of a project whose final goal is a 3D Simulation of a Roman Theatre with virtual humans visually representative of the historical era and capable of adapting their behaviour based on whether they are individuals or part of a group. In the current project, virtual humans can enter the theatre, choose their seats, and exhibit individual realistic behaviours. To dynamically assign seats, the algorithm incorporates contextual information, such as virtual human preferences and environmental factors, for instance, the best seat in a location and seat proximity to the virtual human. The algorithm is able to adapt and update seat assignments as the simulation progresses. Simulations in Unity were created to test and evaluate the algorithm’s effectiveness. To create these simulations, a model of a Roman amphitheatre was edited to use the algorithm and to create a more realistic experience. Multiple simulations with different numbers of virtual humans and seats were executed with hundreds of virtual humans with a realistic body model and animations. The results demonstrate that the developed dynamic seat selection algorithm creates an experience of a crowd entering the amphitheatre and choosing their seats, showcasing its potential for enhancing user experiences in various contexts, such as cultural heritage.

Embora vários (poli)fenóis tenham sido identificados como inibidores de agregação de proteínas associadas a doenças neurodegenerativas, como a doença de Parkinson (DP), os mecanismos adjacentes levantam dúvidas relacionadas com a sua relevância terapêutica. Neste estudo, usámos simulações de dinâmica molecular e métodos de amostragem melhorada para investigar a agregação de péptidos de 11 resíduos do segmento non-amyloid-beta component (NAC), uma região propensa à agregação da proteína α-sinucleína (α-sin) associada à DP e a outras sinucleinopatias. A agregação dos péptidos foi investigada em água e em soluções aquosas de resveratrol (RSV) e ácido gálico (AG). Estudou-se ainda a solvatação da proteína completa em água e em soluções aquosas de ureia, RSV e AG. Os resultados mostram que nenhum dos compostos inibe a agregação dos péptidos estudados. Apesar de induzirem a desidratação dos péptidos a altas concentrações, os (poli)fenóis preservam as regiões ricas em folhas β, características da agregação da α-sin. Assim, a existir algum efeito, o RSV e o AG parecem apenas poder retardar a agregação de péptidos, estabilizando conformações separadas pelo solvente. A análise da proteína inteira revela que os (poli)fenóis induzem conformações menos compactas da α-sin, semelhantes à ureia, potencialmente afetando a propensão à agregação. Contudo, ao contrário da ureia, os (poli)fenóis reduzem o espaço conformacional da α-sin, possivelmente devido a efeitos estéricos e à diminuição da dinâmica do solvente. Estes efeitos são dependentes da concentração e não deverão ocorrer a concentrações terapêuticas relevantes. Os nossos resultados sugerem assim que a atividade de inibição de agregação do RSV e do AG deverá envolver antes ligações não covalentes a intermediários oligoméricos ou a estabilização do monómero e/ou oligómeros através de ligações covalentes entre a α-sin e as respetivas quinonas. O aumento da tendência de agregação dos péptidos pode também estar relacionado à formação de oligómeros não tóxicos, como relatado para alguns (poli)fenóis.

A altercação entre dois sujeitos que visam um objecto estético comum, tem sempre por perto a sombra projectada pelo homo aestheticus (ambulante, bulímico e disruptivo) que percorre os respectivos ânimos, instaurando a suspeita sob as conquistas da actividade comunicacional por ambos desenvolvida, devido à conjugação específica de orientações estéticas, interesses cognitivos e implicações éticas. É por este motivo que quando falamos da “gravidade” do consenso, obtido ou a obter numa interlocução estética, este estado intersubjectivo nunca é a última palavra do telos da comunicação e do lance judicativo partilhado. Se chegar o momento da transformação da comunicação - que produziu o consenso - em discussão e troca de argumentos para disputar a validade e adequação dos mesmos aos objectos estéticos visados, e discutir directa ou indirectamente a expressão da autenticidade dos estados interiores dos participantes, então a suspeita, nos seus movimentos implícitos e súbitas aparições, vai “destronar” o acordo obtido e provocar o surgimento de dificuldades de coordenação entre a vida espontânea da faculdade de julgar e a reflexão que é necessária à manutenção da promessa de não colocar em risco a emancipação estética do outro. A questão da assimetria e a exigência da reciprocidade entre dois sujeitos que se envolvem numa discussão estética; a simultaneidade da reivindicação de uma ética do discurso para a expressão das emoções estéticas pessoais, e a tendência para a préassimilação dos juízos do outro ao nosso juízo numa disputa que é ambivalente («dramatúrgica» e proposicional), são problemas tratados nesta tese em conexão com autores (Kant, Feuerbach, Husserl, Herbert Mead, Habermas) que nos deixaram legados decisivos sobre problemas tais como: o abismo interior e o abismo intersubjectivo; a sociabilidade insociável (ungesellige Geselligkeit); a alteridade; o mundo da vida (Lebenswelt) a intersubjectividade e o «Eu poroso»; os actos comunicacionais, entre outros. Esta dissertação pretende demonstrar que a forma particular de cada um filtrar o mundo da vida, a correlação deste com os actos comunicacionais que dão forma proposicional e «dramatúrgica» às reivindicações estéticas daquele que julga, e o conflito das interpretações dos símbolos estéticos, são um conjunto de condições que nos esforçamos continuamente por reunir de maneira co-funcional.

This research examines how artifcial intelligence may contribute to better understanding and to overcome overindebtedness in contexts of high poverty risk. This research uses Automated Machine Learning (AutoML) in a feld database of 1654 over-indebted households to identify distinguishable clusters and to predict its risk factors. First, unsupervised machine learning using Self-Organizing Maps generated three over-indebtedness clusters: low-income (31.27%), low credit control (37.40%), and crisis-affected households (31.33%). Second, supervised machine learning with exhaustive grid search hyperparameters (32,730 predictive models) suggests that NuSupport Vector Machine had the best accuracy in predicting families’ over-indebtedness risk factors (89.5%). By proposing an AutoML approach on over-indebtedness, our research adds both theoretically and methodologically to current models of scarcity with important practical implications for business research and society. Our fndings also contribute to novel ways to identify and characterize poverty risk in earlier stages, allowing customized interventions for different profles of over-indebtedness.

O movimento permite ao indivíduo interagir e reagir ao ambiente envolvente: desde cílios em bactérias, aos estomas em plantas, e finalmente, redes neurais complexas em animais. Durante o processo evolutivo, o desenvolvimento de um sistema nervoso central - um avanço significativo desde a rede neural difusa nos cnidários - serviu não apenas para integrar informação recolhida por órgãos sensoriais cada vez mais sofisticados, mas também para gerar comportamentos complexos que permitissem uma vantagem adaptativa ao indivíduo. No seu dia a dia um animal depara-se com numerosas situações, por vezes repetidas, e noutras inesperadas, pelo que a capacidade de aprendizagem de comportamentos distintos é vantajosa para a sua sobrevivência. Adquirir e aprender estas acções intencionais é conseguido através da integração de circuitos sensoriais e motores que permitem a modulação e evolução dinâmicas dessas acções, com base nas suas consequências (rácio custo-benefício). Após a exposição e prática repetidas deste processo de aprendizagem, o resultado obtido é a criação de repertórios de acções que serão depois usadas no desempenho da tomada de decisões: a selecção da acção. Ao seleccionar uma acção, para qualquer circunstância e dentro de certos contextos, este repertório de informação é utilizado para salientar a acção a executar mais apropriada de uma variedade de alternativas possíveis. Contudo, uma mesma acção pode ter diferentes resultados a si associados, e recompensas com diferentes valores, dependendo do contexto em que é aplicada. Daí, a capacidade de reconhecer contextos diferentes é fundamental para a implementação de comportamentos bem sucedidos. Pensa-se que esta contextualização é levada a cabo por áreas do cérebro tais como o hipocampo e o córtex orbitofrontal, assim como por outros circuitos presentes nos gânglios da base. Ainda assim, aprender e seleccionar as acções apropriadas para determinados contextos são apenas os primeiros passos na produção motora. É necessário que o sistema nervoso central opere de modo a implementar as acções selecionadas - a execução da acção - através de padrões de contracção muscular específicos, e com precisão temporal e espacial. A produção de movimento é obtida através da ligação de sequências (chunks (pedaços) ou “frases”) de elementos de movimentos mais simples (primitivas motoras ou “sílabas”), de modo a atingir um programa motor unificado - uma acção - e a executar uma tarefa. Pensa-se que diferentes circuitos e grupos de células estarão implicados nas diferentes fases da produção de um movimento. Os gânglios da base são um grupo de estruturas que estabelecem ligações com áreas que incluem o córtex, o tálamo e outras regiões motoras descendentes, e desempenham um papel na acção da selecção e na produção motora. Estas estruturas, que se localizam abaixo do córtex, são conservadas em todos os vertebrados e têm uma posição privilegiada para integrar informação e de seguida a retransmitir para vias motoras descendentes. Os gânglios da base estão organizados em áreas diferentes que possuem entradas e saídas axoniais distintas, assim como padrões de expressão génica específicos (ex. receptores dopaminérgicos D1/D2) - que permitem a integração e o processamento de informação relevante necessária à selecção e execução de movimentos específicos. No estriado - a mais proeminente estrutura nos gânglios da base - as vias estriadonigral e estriado-palidal trabalham em conjunto para, respectivamente, facilitar ou suprimir uma acção com base no contexto e aprendizagens passadas. Em específico, a região anterior do estriado ventro-lateral (aVLS) foi implicada no controlo do movimento orofacial. O modo como este controlo é obtido e qual é o papel das vias estriado-nigral e estriado-palidal no movimento orofacial voluntário é ainda pouco compreendido. Neste estudo, investigámos como os inputs estriatais na substância nigra pars reticulata (via estriado-nigral) afectam o movimento orofacial em murganhos com recurso à técnica de manipulação optogenética e utilizando uma tarefa comportamental operante de cabeça fixa dependente do olfacto. A técnica utilizada, desenvolvida por Karl Deisseroth por volta do ano 2005, permite manipular alvos com especificidade ao nível celular - quer em tecido como em animais vivos - e controlar a actividade eléctrica celular com precisão espaço-temporal. A utilização deste procedimento em neurociência significa que é possível despolarizar ou hiperpolarizar um conjunto de neurónios específicos, numa determinada localização do cérebro, com grande precisão temporal, e em circuitos neurais intactos de animais vivos e com comportamento livre. Para a aplicação da técnica de neuromodulação optogenética, injectámos bilateralmente 8 murganhos da linha transgénica D1-Cre com um vector viral para a expressão de uma opsina na região aVLS, e de seguida implantámos fibras ópticas no mesmo local. Depois, os animais foram treinados na tarefa comportamental, em 4 ensaios, nos quais aprenderam a associar 4 odores diferentes com as suas respectivas consequências: a) o odor “go”, associado à acção de lamber para receber uma recompensa, b) o odor “nogo” associado à supressão da acção de lamber para evitar uma punição, c) o odor “wait” associado à supressão da acção de lamber para receber uma recompensa mais atrasada e d) o odor “neutral”, ao qual não foi associada nenhuma consequência, independentemente do comportamento do animal. Após 25-45 sessões de treino para aprendizagem dos 4 tipos de ensaio, os animais foram submetidos a manipulação optogenética com diferentes frequências de estimulação (2Hz, 5HZ e 10Hz) e foi medida a frequência de lambidelas (protrusões de língua). Confirmámos que a estimulação optogenética das populações estriado-nigrais desta área do estriado provocam movimentos orofaciais. Verificámos que a estimulação nas várias frequências utilizadas tem maior efeito na iniciação da acção de lamber, e não tanto no prolongamento da acção. Vimos também que, para a frequência de estimulação de 10Hz, o animal lambe para beber água em todos os ensaios, mesmo naqueles em que aprendeu a reprimir o comportamento de lamber. Para o ensaio “go”, foi observado que a estimulação das células estriado-nigrais reduz a velocidade de reacção e aumenta o comportamento antecipatório dos murganhos. Mais ainda, foi detectada uma diferença entre os ensaios “nogo” e “wait” - nos quais o animal aprende a reprimir a acção de lamber -sendo que para os ensaios “nogo” é necessária uma frequência de estimulação mais elevada para despoletar a iniciação da acção (10Hz) enquanto que no ensaio “wait” as frequências de 2Hz e 5Hz foram suficientes para aumentar a iniciação da acção. Em suma, a modulação optogenética da população neural estriado-nigral da região aVLS conduziu à produção de movimento orofacial em murganhos, de um modo que é dependente da fase de execução movimento e do contexto em que a acção é aplicada. Sendo que há muito ainda desconhecido sobre a anatomia dos circuitos dos gânglios da base e a sua respectiva funcionalidade, mais estudos serão necessários para compreender a conectividade entre estes diferentes núcleos cerebrais, e o seu papel na selecção de acções, aprendizagem, contextualização e função motora. Uma vez que neste estudo mostrámos que este circuito pode ser modulado por contextos aprendidos, seria interessante estudar a actividade desta população ao longo do processo de aprendizagem de uma tarefa, e compreender se esta população neuronal - que parece estar implicada na iniciação de uma acção - estará mais activa numa fase mais cedo da aprendizagem. Este estudo teve como foco a produção de movimentos orofaciais. Porém, é possível que outros movimentos paralelos estejam a ser produzidos durante a estimulação optogenética desta região, tanto a nível corporal como a nível facial, pelo que se poderia investigar esta possibilidade para, potencialmente, compreender se existe um gradiente de funcionalidade motora nestas regiões, e os seus movimentos distintos associados.

Objectives: The process of reporting child maltreatment may be vulnerable to judgment bias, which may, in turn, affect the various stages of the child protection system continuum. In this study, we examine the role of child (gender, race/ethnicity, and age) and family characteristics (family structure and socioeconomic status) in laypeople’s severity assessment and probability of referral of child maltreatment (abuse or neglect). Method: Participants responded to a questionnaire presenting vignettes of abuse or neglect (based on Portuguese legal standards) that varied in the characteristics of the child and the family and assessed either the severity of abuse or severity of neglect, and the probability of referral of each situation. Results: Results indicated pervasive bias. Despite acknowledging the severity of both abuse and neglect situations, the likelihood of reporting maltreatment was higher (a) for female, younger, White, and Black children compared with male, older children and children of Roma ethnicity; and (b) for families with economic difficulties, divorced, single parent, and stepfamilies compared with nuclear families. Conclusions: These results emphasize the importance of studying the referral process of child maltreatment at a community level. We suggest that public awareness may facilitate the referral of maltreatment, minimizing the overreporting and underreporting of cases and encouraging early and preventive intervention.

A Fibrose Quística (FQ) é a doença autossómica recessiva mais comum em caucasianos. É causada por variantes no gene CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator). Este gene codifica uma proteína transmembranar, a CFTR, que está envolvida no transporte de cloreto (Cl- ) e bicarbonato (HCO3 - ) através da membrana plasmática apical das células epiteliais. A CFTR disfuncional provoca uma anomalia no transporte destes aniões, que por sua vez afetam a secreção de fluidos. Isto leva a um desequilíbrio na homeostase dos fluidos em vários órgãos e tecidos epiteliais, tais como as vias respiratórias, o sistema digestivo, as glândulas sudoríparas e o aparelho reprodutivo (sobretudo o masculino). No entanto, a doença das vias respiratórias é a principal causa de morbilidade e mortalidade nos indivíduos com FQ. Esta é marcada por uma insuficiente limpeza mucociliar que resulta em ciclos recorrentes de infeção, inflamação e cicatrização, conduzindo gradualmente ao declínio da função pulmonar. A proteína CFTR pertence à superfamília dos transportadores ABC (ATP binding cassette), cujos membros são responsáveis pelo transporte de substratos através das membranas celulares, normalmente contra um gradiente de concentração, utilizando para tal a hidrólise do ATP. A CFTR é constituída por cinco domínios: dois domínios transmembranares (TMD1 e TMD2), dois domínios de ligação ao nucleótido (NBD1 e NBD2) e um domínio regulador (RD). Os domínios TMD1 e TMD2 criam o canal da proteína CFTR e os domínios NBD1 e NBD2 ligam-se ao ATP e regulam a abertura e o fecho do canal. Como o canal da CFTR é dependente do ATP, requer a fosforilação do RD pela proteína cinase A (PKA) e ligação do ATP aos domínios NBD, o que causa a sua dimerização e permite o fluxo dos iões Cl- /HCO3 - através da membrana apical das células epiteliais. O canal fecha quando ocorre a hidrólise do ATP, o que resulta na separação do dímero NBD e na recuperação da conformação dos domínios TMD. Mais de 2.000 variantes foram já identificadas até ao momento no gene CFTR e agrupadas em sete classes com base no seu impacto na expressão/função da proteína CFTR. As variantes que pertencem à classe I são nonsense resultando assim num defeito na produção de proteína, causado pela introdução de um codão stop prematuro. A classe II contém variantes que causam um processamento e tráfego anormal da proteína CFTR, o que leva a uma proteína com um folding incorreto que é degradada prematuramente. A classe III é constituída por variantes que influenciam a regulação da abertura do canal da CFTR, afetando a sua ativação por ATP. As variantes da classe IV diminuem o fluxo de iões no canal, reduzindo assim a sua condutância. A classe V é composta por variantes que reduzem a quantidade de canais da CFTR na membrana plasmática, principalmente por causa de splicings alternativos, mas ainda apresentam alguma função residual da CFTR. A classe VI está relacionada com uma desestabilização da CFTR na membrana plasmática, reduzindo a quantidade de proteína na membrana. As variantes da classe VII não produzem RNA mensageiro (mRNA) funcional da CFTR e não se conseguem recuperar farmacologicamente. Variantes pertencentes às classes I, II, III e VII normalmente resultam em fenótipos mais graves enquanto que variantes das classes IV, V e VI permitem alguma função residual, originando formas atípicas de FQ. As variantes que são raras também se chamam variantes órfãs. Estas apresentam uma previsão difícil da doença porque os seus defeitos funcionais não foram definidos. Por serem raras, o desenvolvimento de novas terapias não é direcionado para a sua correção. Na última década, foi aprovado o uso de pequenas moléculas na clínica para o tratamento de indivíduos com FQ com variantes da CFTR específicas. Estes compostos incluem o VX-770, também conhecido como ivacaftor (Kalydeco®), que atua como potenciador do canal CFTR. Além deste fármaco, existem outros que são combinações deste potenciador com corretores (como o VX-661 e o VX-445) concebidos para tratar os defeitos de folding e de tráfego associados à variante mais comum, p.Phe508del. O VX-661 (tezacaftor) combinado com o ivacaftor é conhecido como Symkevi® (Symdeko® nos EUA). A combinação tripla, aprovada mais recentemente e conhecida como Kaftrio® (Trikafta® nos EUA), consiste no potenciador ivacaftor (VX-770) com dois corretores, tezacaftor (VX-661) e elexacaftor (VX-445). No entanto, estas terapias altamente eficazes como moduladoras da CFTR foram desenvolvidas para indivíduos com FQ com as variantes mais comuns da CFTR. Por isso, os indivíduos com FQ portadores de variantes raras (ou órfãs) não são elegíveis para estes tratamentos, apesar de poderem beneficiar clinicamente dos mesmos. Por este motivo, é necessário disponibilizar terapias personalizadas para indivíduos com FQ com variantes raras (órfãs) da CFTR. Para tal, têm sido criados alguns modelos que ajudam a prever a eficácia dos moduladores, como os organoides intestinais 3D, que são obtidos através do isolamento de criptas de biópsias retais. Estes modelos de organoides 3D são fundamentais para o desenvolvimento de tratamentos personalizados, pois permitem que muitas pessoas possam usufruir das terapias que já se encontram no mercado, mas que não foram originalmente desenhadas para os seus genótipos. As criptas intestinais contêm vários tipos de células, incluindo células estaminais. Estas encontram-se usualmente na base das criptas e têm a capacidade de se diferenciarem noutras células. Quando as criptas intestinais são mantidas em cultura nas condições apropriadas, podem gerar organoides intestinais, estruturas 3D que imitam a composição e o comportamento do intestino. Quando os organoides intestinais são gerados a partir de biópsias de indivíduos com variantes raras da CFTR, podem ser usados para testar compostos num contexto personalizado para esse indivíduo. As respostas clínicas às terapias com moduladores podem ser previstas em organoides intestinais derivados de indivíduos com FQ utilizando o ensaio FIS (Forskolin Induced Swelling), que mede a função da CFTR através do inchamento dos organoides quando estimulados por forscolina, que é um agonista da CFTR. Os corretores, VX-445 e VX-661, são adicionados no dia anterior à experiência enquanto que o potenciador, VX-770, é adicionado no próprio dia. A forscolina aumenta o cAMP intracelular, pois ativa a PKA, que fosforila a CFTR, abrindo o canal e permitindo a passagem de água e de iões, ativando assim a CFTR, que estimula a secreção de fluido para o lúmen do organoide. Consequentemente, os organoides incham pela entrada de fluido. Quando a CFTR está ausente ou disfuncional não induz o inchamento dos organoides, pois este é dependente da atividade da CFTR. Este teste pode ser usado para testar o efeito dos moduladores nas variantes CFTR. Este projeto de Mestrado teve como objetivo ajudar a trazer terapias personalizadas para indivíduos portugueses com variantes raras da FQ, que não são elegíveis para receber os medicamentos moduladores da CFTR atualmente aprovados. Para tal, a atividade intrínseca da CFTR de organoides intestinais previamente gerados a partir de biópsias retais desses indivíduos com FQ com variantes órfãs foi estudada. Os organoides intestinais são um ótimo material para este tipo de estudos porque conseguem replicar a morfologia e a fisiologia do intestino, incluindo os vários tipos de células e as interações entre elas. De modo a se poder prever a resposta clínica dos moduladores aprovados, estes foram testados em organoides intestinais de indivíduos com variantes raras utilizando o ensaio FIS para determinar a melhor terapia para cada indivíduo, numa abordagem de medicina personalizada. Para isto, organoides de oito indivíduos com as variantes p.Gly85Glu/p.Gly85Glu, p.Ala561Glu/p.Ala561Glu I, p.Ala561Glu/p.Ala561Glu II, c.3140-26A>G/p.Tyr1014ThrfsTer9, c.3140-26A>G/p.Gln1100Pro, p.Gln1100Pro/p.Ser4Ter, p.Tyr1092Ter/p.Tyr1092Ter e p.Gly542Ter/p.Gln220Ter foram analisados. Os resultados dos ensaios FIS demonstraram que a função da CFTR foi recuperada em seis dos organoides (p.Gly85Glu/p.Gly85Glu, p.Ala561Glu/p.Ala561Glu I, p.Ala561Glu/p.Ala561Glu II, c.3140-26A>G/p.Tyr1014ThrfsTer9, c.3140-26A>G/p.Gln1100Pro e p.Gln1100Pro/p.Ser4Ter) enquanto que dois dos organoides (p.Tyr1092Ter/p.Tyr1092Ter e p.Gly542Ter/p.Gln220Ter) não apresentaram resposta significativa aos moduladores testados. Assim, conseguimos prever que estes seis indivíduos portugueses poderão obter benefício clínico dos moduladores aprovados atualmente, o que irá certamente melhorar significativamente a sua qualidade de vida. Em suma, os resultados obtidos confirmam a utilização da quantificação da CFTR funcional em organoides intestinais 3D para a previsão da eficácia destes moduladores, numa abordagem personalizada.

Todos os homens têm uma tendência natural para um bem transcendente e absoluto e nesta inclinação fundamenta-se o seu desejo natural de felicidade que se apresenta como algo necessário, quer dizer, o homem é naturalmente vocacionado para a felicidade. O presente trabalho tem como objetivo principal investigar a possibilidade do ensino da felicidade por parte de um mestre (humano) a um discípulo. Partindo do pensamento de São Tomás de Aquino (1224/25-1274), no que diz respeito à teoria e prática da educação, a partir da sua teoria do conhecimento, bem como no caminho da felicidade ou bem-aventurança humana, pretende-se compreender qual o papel do mestre e do discípulo, assim como a relação entre ambos no processo de aquisição do conhecimento e no caminho para a bem-aventurança humana, identificada como o fim último da vida humana. Deus inscreveu no homem as sementes do conhecimento ou princípios universais do conhecimento, as sementes das virtudes e um desejo natural de felicidade, razão pela qual é possível justificar uma ligação entre o ensino, a virtude e a felicidade.

Os queijos são alimentos bastante estudados, uma vez que são propícios a contaminações por falta de boas práticas de higiene e por diversos fatores que influenciam o desenvolvimento de microrganismos potencialmente patogénicos. Este trabalho está enquadrado num estudo metagenómico que visa avaliar a resistência a antibióticos em queijos com e sem Denominação de Origem Protegida (DOP). As amostras analisadas de queijos feitos com leite cru de ovelha (4 DOP e 4 não-DOP) mostraram-se microbiologicamente conformes, cumprindo os critérios legais de segurança, não tendo sido detetada Listeria monocytogenes nem Salmonella spp. Quarenta e seis isolados foram identificados e foi avaliada a resistência a antibióticos, por antibiogramas e pesquisa de genes de resistência; e a presença de genes de virulência. Foi determinada a multirresistência como a resistência a pelo menos três antibióticos de grupos diferentes e, no caso de Staphylococcus, basta apresentar resistência ao antibiótico meticilina. No geral, os isolados de Enterococcus e E.coli foram os que apresentaram mais perfis de resistência, tendo sido verificado nos primeiros, resistência a eritromicina, tetraciclina e vancomicina e nos segundos, resistência a amoxicilina, imipenem, tetraciclina. Dos 46 isolados em teste, 16 apresentaram multirresistência, sendo que 13 eram de Enterococcus e 3 de E.coli. Relativamente à presença de genes de resistência a antibióticos, em Staphylococcus, encontram-se em abundância, os genes vancA, blaZ e ermB. Nos isolados de Enterobacteriaceae, destacam-se os genes blaTEM, MOX e tetA e em relação aos Enterococcus, a presença de genes vancA, ermC e pbp5 é a mais comum. Este último gene, pbp5, foi o único encontrado em isolados de Lactobacillus plantarum. Estes resultados não permitem apontar para diferenças concretas entre a microbiota de queijos DOP e não-DOP e realçam a importância da vigilância da resistência antimicrobiana em produtos lácteos e a necessidade de medidas de controlo para garantir a efetiva segurança dos alimentos.

As emoções são fundamentais nas nossas vidas. Elas influenciam a forma de nos comportar, de reagir, de interagir com os outros e de ver o mundo. Por exemplo, em filmes são uma ferramenta eficaz para contar histórias, criar empatia e gerar impacto. Os filmes são um veículo poderoso para a cultura e educação devido à uma enorme carga de emoções que são capazes de transmitir, tanto positivas como negativas. Tornam-se num grande influenciador do estado de espírito, saúde, felicidade e senso de bem-estar, até porque o sucesso depende, em parte, da forma as essas emoções são recebidas e percebidas pelo espetador. Tendo esta preponderância, torna-se relevante considerar a dimensão emocional envolvida no acesso a filmes e representá-la de uma forma apelativa e eficaz. Para além disto, há que ter em conta a variação ao longo de um filme, contemplando uma dimensão temporal que levanta desafios relevantes quando se adota modelos de emoções baseados em valência e intensidade que não a têm em conta, tais como a sequência temporal das trajetórias emocionais e a distinção de quando as mesmas emoções são sentidas por um certo tempo ou em momentos diferentes. Apesar do modelo base adotado ser o circumplexo de Russel, é relevante considerar a diversidade de modelos na parte da configuração de uma roda de emoções por flexibilização e personalização. Este trabalho enquadra-se na aplicação As Movies Go By, no âmbito do projeto AWESOME. Apresenta o estudo e desenvolvimento de mecanismos interativos de visualização de emoções dominantes e ao longo do tempo; as visualizações são sincronizadas com os filmes, permitindo que sejam analisados e navegados com base no seu impacto emocional. Realizaram-se avaliações com utilizadores em duas fases, de modo a aferir a utilidade, satisfação e facilidade de uso, bem como a eficácia das diferentes visualizações, identificando direções para trabalho futuro.

Going beyond the origins of cognitive biases, which have been the focus of continued research, the notion of metacognitive myopia refers to the failure to monitor, control, and correct for biased inferences at the metacognitive level. Judgments often follow the given information uncritically, even when it is easy to find out or explicitly explained that information samples are misleading or invalid. The present research is concerned with metacognitive myopia in judgments of change. Participants had to decide whether pairs of binomial samples were drawn from populations with decreasing, equal, or increasing proportions p of a critical feature. Judgments of p changes were strongly affected by changes in absolute sample size n, such that only increases (decreases) in p that came along with increasing (decreasing) n were readily detected. Across 4 experiments these anomalies persisted even though the distinction of p and n was strongly emphasized through outcome feedback and full debriefing (Experiment 1– 4), simultaneous presentation (Experiments 2– 4), and recoding of experienced samples into descriptive percentages (Experiment 3– 4). In Experiment 4, a joint attempt was made by 10 scientists working in 7 different institutions to develop an effective debiasing training, suggesting how multilab-collaboration might improve the quality of science in the early stage of operational research designing. Despite significant improvements in change judgments, debiasing treatments did not eliminate the anomalies. Possible ways of dealing with the metacognitive deficit are discussed.

O cancro é uma doença multifatorial que afeta os seres humanos em todo o mundo com taxas de incidência crescentes ao longo dos anos. O melanoma é um tipo de cancro de pele causado pelo crescimento descontrolado de melanócitos. Em condições saudáveis, os melanócitos produzem melanina, pigmento responsável pela cor da pele e proteção dos efeitos do sol. No entanto, a exposição elevada à radiação solar ultravioleta (UV), alguns fatores genéticos como os genes responsáveis pela cor da pele, cabelo, cor dos olhos e outros podem levar a um crescimento descontrolado dos melanócitos. Neste tipo de cancro, a tirosinase, uma proteína envolvida na produção de melanina, encontra-se sobreexpressa nas células de melanoma. Este facto torna esta enzima um alvo de interesse no desenvolvimento de novos fármacos para melanoma metastático. Embora o melanoma seja um dos cancros de pele menos comuns, é muito mais agressivo do que os outros cancros de pele uma vez que pode metastizar facilmente para os gânglios linfáticos, pulmões, fígado, cérebro e ossos. Atualmente, o melanoma metastático é tratado através de diferentes estratégias tais como terapia molecular direcionada, quimioterapia, e terapia combinada. No entanto, os efeitos secundários e o eventual desenvolvimento de resistência levaram à procura de novas estratégias, tais como os compostos híbridos. A hibridação molecular é uma das estratégias mais recentes e promissoras no desenvolvimento de novos compostos anticancerígenos. Os compostos híbridos são formados através da combinação de duas ou mais moléculas ou farmacóforos numa única molécula. Este tipo de compostos permite melhorar a potência e diminuir os efeitos secundários quando comparados com os seus compostos originais, testados individualmente ou em terapia combinada. Nesta dissertação procedeu-se à síntese e estudo das moléculas híbridas 57 e 62a-e. Estes compostos híbridos são formados pela união de duas moléculas de interesse: o 4-(2-hidroxietiltio)fenol que é um agente melanocitotóxico que atua como substrato da tirosinase e os monometiltriazenos, agentes alquilantes do DNA. Os triazenos são uma classe de compostos com interesse farmacológico sendo a dacarbazina e o temozolomide fármacos usados atualmente no tratamento de melanoma metastático e glioma. A síntese dos híbridos foi realizada por acoplamento entre o 4-(2-hidroxietiltio)fenol e os carbamatos intermédios derivados de triazenos 59. Neste trabalho, o composto 4-(2-hidroxietiltio)fenol e os carbamatos de triazenos intermédios 59 foram sintetizados satisfatoriamente e caracterizados através de RMN. A partir do mesmo processo de síntese foram obtidos dois tipos de híbridos: O híbrido 57 resultou da ligação entre o carbamato intermediário 59 e o OH alquilico do 4-(2-hidroxietiltio)fenol, enquanto os híbridos 62a-e resultaram da ligação entre os carbamatos intermediários 59 e o fenol do 4-(2-hidroxietiltio)fenol. Todos os híbridos, excepto o 62e, foram obtidos com rendimentos superiores a 50%. A estabilidade dos híbridos 57 e 62a,d foi estudada em solução tampão fosfato salina (PBS) e em plasma humano (80% v/v) a 37°C. A reação foi monitorizada por HPLC. Nas condições de estudo em PBS, o híbrido 57 mostrou maior estabilidade do que os híbridos 62a,d com tempo de semi-vida de 4,78 dias. Os compostos 62a,d tiveram tempos de semi-vida de 42 horas e 32 horas, respetivamente. Em plasma humano, o híbrido 57 teve um t1/2 de 6,9 horas enquanto os híbridos 62a,d tiveram um t1/2 de 8,37 minutos e 18,78 minutos respectivamente. Estes resultados indicam que o híbrido 57 é muito menos suscetível à degradação por enzimas plasmáticas do que os híbridos 62a,d. Tendo então maior probabilidade de atingir os melanócitos sem sofrer degradação. Todos os compostos foram mais estáveis em PBS do que em plasma humano. A capacidade dos híbridos 57 e 62a,d de atuarem como substrato de tirosinase também foi avaliada. Para este ensaio usou-se 100U/mL de tirosinase de cogumelo. Os resultados mostraram que o composto 57 é um excelente substrato para tirosinase apresentando um tempo de sem-vida de 1,53 minutos. A análise por HPLC permitiu observar o aparecimento de um pico correspondente à orto-quinona confirmada por espectrometria de massa. A orto-quinona é uma molécula produzida pela hidroxilação e posterior oxidação de monofenois na presença de tirosinase. No caso dos híbridos 62a,d não se observou diminuição significativa da concentração dos mesmos quando estiveram em contato com a tirosinase e também não foi possível observar o aparecimento da orto-quinona, assim, os híbridos 62a,d mostraram não ser substratos da enzima e confirmaram a necessidade de ter disponível o hidroxilo do grupo fenol para interagir com a tirosinase. As propriedades moleculares de todos os híbridos foram calculadas teoricamente. Os híbridos 57 e 62a-e mostraram estar de acordo com as regras de Lipinski com os respetivos pesos moleculares inferiores a 500g/mol, log P ≤5, menos de 5 átomos doadores de ligações de hidrogénio e menos de 10 átomos aceitadores de ligações hidrogénio. Além disso, todos tiveram um log P maior do que 2 pelo qual entende-se que os híbridos estudados têm carater hidrofóbico. A atividade biológica dos híbridos 57 e 62a,d foi avaliada em duas linhas celulares de melanoma, uma de melanoma murino (B16F10) e outra de melanoma humano (A375) e numa linha de queratinócitos normais (HaCat). O ensaio foi realizado através do método MTT que quantifica a viabilidade celular. Os compostos 62a-c mostraram ser citotóxicos para a linha B16F10 com IC50 entre 61 e 74µM, sendo mais citotóxicos que o temozolamide (usado nos ensaios como controlo positivo). Estes resultados demostram que os compostos híbridos são promissores para o tratamento do melanoma metastático.

O queijo coalho, é um dos derivados de leite mais produzidos em Cabo Verde, no entanto não possui um regulamento técnico de identidade e qualidade, possui características físico-químicas variadas. As empresas do setor alimentar têm como principal objetivo assegurar a segurança e a qualidade dos géneros alimentícios, garantindo desta forma a confiança dos consumidores. Foi com base nesta premissa que surgiu o interesse de realizar a minha tese na área de Qualidade e Segurança Alimentar, com foco no controlo de qualidade na produção de queijo de coalho. Assim, o presente estudo tem como objetivo avaliar os métodos de produção e conservação de queijo de diferentes regiões da ilha do Fogo, em Cabo Verde. Foram realizadas, no laboratório de química e de biologia do Ministério da Saúde (Inpharma), análises físicas, físico-químicas e sensoriais do queijo coalho tendo como matéria-prima principal o leite de cabra. Foram determinados parâmetros físico-químicos relevantes como pH, acidez, humidade, proteína, cinzas e gordura. Também foram realizadas análises microbiológicas como pesquisa de E.coli, salmonella e coliformes. O teste de aceitação sensorial foi realizado por 23 provadores, onde todos os queijos apresentaram índice de aceitabilidade superior a 70% relativamente a todos os atributos estudados. De acordo com a norma cabo-verdiana para queijo, todas as amostras estudadas foram caracterizadas como queijo fresco e queijo magro. Em relação ao teor de humidade, o queijo A é classificado como queijo semi-mole e os queijos B e C são classificados como queijo macio. O intervalo de pH encontarado foi de 5,68 a 6,19 e acidez titulável de 6,4 a 11,1 mLNaOH1N/100g. Não foi detectada Salmonella e os níveis de E. Coli foram inferiores ao valor máximo aceite e estabelecido pelo Regulamento (CE) n.º 2073/2005 da Comissão e pelo Regulamento (CE) n.º 1441/2007 da Comissão. No entanto, os níveis dos coliformes fecais encontrados nos queijos B e C foram superiores ao estabelecido pelo Regulamento da Comissão (CE). De modo geral, este estudo pode auxiliar no melhor processo de controle de qualidade do queijo de coalho com base nos parâmetros sensoriais, microbiológicas e físico-químicas.

Current data assimilation systems aim at produce the best possible estimate of the atmospheric state to be used as initial conditions by a forecasting model. This estimate is called the model analysis. In the formalism of the Three-Dimensional Variational Data Assimilation (3D-Var), the analysis should minimize a quadratic cost function that measures the distance between the estimate and the available information, namely the observations and the background, taking into account their respective precisions. Observation error covariances contain information about errors in the observation process (measurement and representativeness uncertainties). Background error covariances are used to filter and propagate the observational information in a spatial multivariate way. They compose the gain matrix that determines how the analysis increments (that is to say, the analysis corrections to the background) are obtained from the innovations (i.e., the differences between observations and background at the observation locations). However, since the true atmospheric state can not be exactly known, background error covariances (in particular) can only be estimated. Nowadays, Numerical Weather Prediction (NWP) centers often use an off-line specification of background error covariances. This relies on running an ensemble of perturbed assimilation cycles during a past period, to simulate the error evolution during the successive analysis/forecast steps. Moreover, as the full background error covariance matrix is far too large to be handled explicitly, sparse covariance models are usually employed, and they are calibrated by using ensemble forecast perturbations. These sparse covariance models are often based on simplifications such as horizontal homo geneity and temporal stationarity. This is the case of the ALADIN/France regional system which has been used in this study. The impact of seasonal and daily variations are studied. Results indicate that specifying background error covariances corresponding to a one-day sliding average (preceding each each analysis date) has a positive impact on the short-range forecast quality, compared to the currently operational static covariances. This positive impact arises to a large extent from the update of the monthly component of covariance variations. The update of the daily component contributes to additional positive impacts, which are however relatively localized and modest during this period. These impacts are illustrated by case studies for humidity during an anticyclonic situation, and for wind during a cyclonic event. These results support the idea to consider an on-line updated specification of background error covariances.

A tuberculose, apesar de ser uma doença evitável e curável, mantém-se como uma epidemia global. Estima-se que em 2021, a tuberculose tenha sido a décima terceira maior causa de morte global e a segunda maior causa de morte induzida por um agente infecioso e que determinou, aproximadamente, 1,6 milhões de mortes. No mesmo ano, 10,6 milhões de pessoas terão contraído a doença e estimativas recentes indicam que um quarto da população mundial está infetado com o Mycobacterium tuberculosis (Mtb), o seu agente etiológico. O Mtb é um agente patogénico humano obrigatório, com várias características distintivas que o tornam um agente infecioso de excelência. Esta bactéria aproveita a resposta imunitária do hospedeiro para aumentar o grau de transmissão. Para além disso, possuí um arsenal metabólico extenso capaz de metabolizar os xenobióticos e uma parede celular única, com um elevado número de bombas de efluxo, que lhe confere uma alta impermeabilidade, permitindo-lhe adaptar-se às múltiplas pressões ambientais criadas pelo hospedeiro, adquirindo assim uma elevada resistência natural a fármacos. Por fim, esta micobactéria possui uma capacidade única de permanecer no hospedeiro num estado latente, caracterizado por uma fisiologia e metabolismo distinto, crescimento reduzido, tolerância a fármacos aumentada, e uma capacidade de não se deixar detetar pelo sistema imunitário. Um regime terapêutico anti-tubercular tem como objetivo diminuir a severidade da doença, evitar reincidências e o desenvolvimento de resistência, e para tal, necessita eliminar todas as populações de bacilos do hospedeiro. Devido às características próprias das bactérias latentes, os regimes terapêuticos anti-tuberculares têm durações bastante prolongadas e características de polimedicação, apresentando por isso efeitos adversos cumulativos. Consequentemente, os regimes terapêuticos anti-tuberculares têm baixa adesão e tolerância por parte dos doentes, podendo resultar na emergência de tuberculose resistente a fármacos, que está associada a uma maior letalidade, e a um sucesso terapêutico inferior. Desta forma, o desenvolvimento de um regime terapêutico curto, potente, e eficiente em todas as formas de infeção é uma prioridade no controlo da tuberculose. Para tal, é essencial desenvolver novos fármacos que sejam eficientes, seguros, e bem-tolerados, e que preferencialmente atuem por novos mecanismos de ação, de forma a evitar a emergência de resistência. Esta premência não foi considerada nos últimos anos, sendo que apenas três fármacos anti-tuberculares (bedaquilina, delamanida e pretomanida) foram aprovados nos últimos quarenta anos, todos com efeitos secundários que comprometem a sua utilização prolongada. Assim, é crucial investir na descoberta e desenvolvimento de novos fármacos ativos contra a tuberculose latente e resistente, preferencialmente com novos mecanismos de ação e alvos diferentes. A cadeia de transporte de eletrões do Mtb surgiu recentemente como um alvo promissor para novos fármacos anti-tuberculares. Atualmente, cerca de 30% dos novos fármacos em ensaios clínicos têm como alvo um elemento da cadeia de transporte de eletrões, e cerca de 65% dos regimes farmacológicos em ensaios clínicos de fase III incluem um fármaco que inibe a cadeia de transporte de eletrões. Como ambas as formas bacterianas, latentes e replicantes, requerem um fornecimento contínuo de ATP, o metabolismo energético é um alvo apelativo, já que a sua inibição e consequente disrupção do fornecimento de ATP permite eliminar eficientemente as populações replicantes e latentes, e consequentemente, diminuir a duração dos regimes terapêuticos e a emergência de resistência. Este projeto inclui a síntese e caracterização de uma pequena biblioteca de ferramentas farmacológicas híbridas, capazes de inibir o citocromo bc1-aa3, a oxidase principal do Mtb, e, em simultâneo, o citocromo bd, uma oxidase alternativa que o bacilo utiliza em situações de hipoxia. Deste modo, pretende-se que estes compostos consigam inibir eficientemente a produção de ATP, e eliminar ambas as populações bacterianas replicantes e latentes. Os compostos híbridos têm uma estrutura comum, com um esqueleto de pirroloquinolona, provavelmente capaz de inibir o citocromo bc1-aa3 uma vez que é inibidor do citocromo bc1 do Plasmodium falciparum, uma proteína com alta homologia com o citocromo bc1-aa3 do Mtb; e um esqueleto de nitrofurano, que podendo ser reduzido in vivo pelas nitroreductases do Mtb, liberta óxido nítrico capaz de inibir o citocromo bd. As duas estruturas serão ligadas por um braço de ligação, que será a porção variável da biblioteca de compostos. Os compostos foram sintetizados por uma estratégia de síntese divergente, iniciada com a síntese do esqueleto da pirroloquinolona, com rendimentos elevados. De seguida, vários braços de ligação foram acoplados, com rendimentos moderados. Quando necessário, foi efetuada uma redução das funções químicas do braço de ligação (grupos nitro e nitrilo), por forma a garantir a presença de um grupo amina livre. Por fim, o esqueleto de nitrofurano foi acoplado, com rendimentos baixos, através de dois tipos de ligação: ligações amida (7a – 7d) e ligações imina (8a – 8c). Todos os compostos foram obtidos puros, exceto o composto 7d, cujas tentativas de purificação não foram bem sucedidas. Na síntese do composto 7c, isolou-se um produto de degradação – uma nitrofuranilamida (composto 7c’) – que foi caracterizado. Como o composto 7c foi somente obtido puro posteriormente, por restrições temporais não foram efetuados os ensaios subsequentes para este composto. A solubilidade aquosa dos compostos foi determinada por HPLC para os compostos 7c’ e 8c. Este ensaio não foi efetuado com os restantes compostos ((7a), (7b), (8a) e (8b)) por se ter verificado que tinham sofrido degradação extensiva. Ambos os compostos 7c’ e 8c demonstraram ter boa solubilidade aquosa, que juntamente com as propriedades físico-químicas previstas indicam que estes compostos, provavelmente, terão uma boa biodisponibilidade oral. Também se avaliou a estabilidade química (em tampão PBS), em plasma, e metabólica (em microssomas de ratinho), por HPLC para os compostos 7c’ e 8c. Ambos demonstraram ter um bom perfil farmacocinético, sendo que o composto 7c’ demonstrou ser mais estável que o composto 8c nos três meios testados. Comparando a estabilidade do composto 7c’ com outros compostos híbridos, nenhuma correlação foi identificada entre a ausência do esqueleto da pirroloquinolona e uma melhoria no perfil farmacocinético. A atividade anti-micobacteriana dos compostos 7c’, 8c, e de alguns intermediários foi testada contra duas estirpes de M. tuberculosis (uma estirpe nativa, H37Rv, e uma estirpe mutante, cydKO). Os resultados estão de acordo com o mecanismo de ação proposto em que os compostos híbridos têm como alvos ambos os citocromos, bc1-aa3 e bd, e a necessidade do grupo nitro ser substituinte num ciclo heteroaromático. O composto 8c apresentou atividade anti-micobacteriana com valores de MIC na gama micromolar, demonstrando que estes compostos híbridos são agentes anti-tuberculares promissores. O composto 7c’ foi o composto mais ativo, apresentando atividade anti-micobacteriana com valores de MIC na gama sub-micromolar, podendo indicar um mecanismo de ação distinto, uma vez que esta molécula não contém a subunidade pirroloquinolona. A toxicidade dos compostos 7c’ e 8c, tal como do percursor 6c, foi testada contra a linha celular HEK293. Os compostos 7c’ e 6c não apresentaram citotoxicidade, enquanto o composto 8c apresentou citotoxicidade superior, apesar de demonstrar alguma seletividade para as células bacterianas. Deste modo, os próximos passos deste projeto incluem a realização de ensaios de atividade dos compostos 7c’ e 8c em outras bactérias, de forma a avaliar a seletividade destes compostos; a avaliação biológica e farmacocinética dos restantes compostos híbridos; e o aumento da biblioteca de compostos híbridos.

Questions of spatial segregation and over-representation of ethnic minority groups with weak connections to the labour market are central to the political and policy agenda across Europe and academic studies in the fields of housing and urban regeneration. In some countries, the spatial concentration of ethnic minorities is considered in itself an indicator of socio-spatial disadvantage, accentuating pathological discourses related to ethnic communities but in turn providing more resources for these areas. In other countries, where policies have a less preventive character and only intervene during phases of advanced urban decline, the existence of ethnic enclaves and concentrated poverty has led to housing demolition and rehousing, in many cases with controversial results. The relevance of the link between ethnic segregation and integration is known. On the one hand, people create and modify places, on the other hand, spaces in which people live and work affect their social relations, and individual fortunes (eg educational attainment, income levels, reputation). The over-representation of ethnic groups in some areas has been considered a problem where it hinders opportunities of social integration, and when it amplifies processes of stigmatization and the inter-generational transmission of disadvantage. However, it has also been recognized that the concentration of ethnic communities may actually be an advantage for developing relationships of solidarity and the preservation and affirmation of cultural identities. This paper aims to contribute to this debate. It focuses upon the ethnic housing segregation of the Gypsy/ Roma population in Portugal, and asks if ethnic clustering on a number of housing estates is the result of a voluntary impulse towards aggregation (therefore perceived positively by residents), or the result of a lack of choice (thus an ‘institutionalized’ or deliberate political choice to put the Gypsy/Roma people at distance). In the first part, I review the literature on the factors that underlie the social construction of ethnic segregation; in the second part, I review literature that presents the empirical results of research conducted in different locations of Portugal but has in common processes of rehousing of the Gypsy/Roma population in urban areas. I compare these results with those I obtained in field work in Porto where I interviewed Gypsy/Roma people regarding their preferences given models of concentrated housing relocation or more dispersed neighbourhoods. Focusing upon the Portuguese case, I offer some answers to the following research questions: Is the spatial segregation and concentration of the Gypsy/Roma population on a number of housing estates a voluntary choice or a of lack of choice given institutionalized political decisions taken by local authorities or bureaucrats? How does the Gypsy/Roma population feel about segregation and concentration? Do they wish to live in segregated areas, have they been able to choose between more concentrated or dispersed patterns? What are the consequences? Do they believe that spatial segregation reproduces inequality and separation?