Repositório RCAAP

“An Atlas of a fictional cloud: documentary-fiction through experimental publishing” aims to research how documentary practice can approach fiction, to re-enact current contestable realities, through design. For this reason, we have approached the documentary-fiction genre as a discursive mode to combine the methodologies of editorial design as a destituent practice in order to open a space for criticism and discussion around relevant social themes. The perception of the world and society is shaped by the construction of cognitive metaphors and, for this reason, the mechanisms for deconstructing these metaphors are relevant to bring to light other forms of interpretation of reality. On the other hand, the digital transformation brought with it the need to apply familiar concepts to complex scenarios, in order to simplify our interaction with digital interfaces. An Atlas of a Fictional Cloud, the projectual component of this dissertation, through the documentary-fiction genre in its intersection with editorial practice, proposes the production of a discursive space that is able to question and criticize the way we communicate and manage our individual and collective memory and action. As a powerful fiction that operates in reality, the 'Cloud', as a basic infrastructure that provides digital resources, is used as a conceptual motto. Through editorial practice, we seek to assess the relationship between the notion of immateriality arising from the metaphors that the term 'Cloud' carries and the negative aspects of its materiality in terms of social, political and environmental sustainability. The open nature of the editorial artifact, and the way in which it stimulates an organic reading, intends to verify the ability of communication design to contribute to the creation of new spaces and discursive methodologies in the context of documentary fiction.

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The present dissertation intends to inventory, contextualize and study the photographic collection of the Creative Office of the Teatro Nacional D. Maria II, and the author who initiated it – Jorge Afonso Garizo do Carmo –, characterizing the institution to which his production belongs. It was in this place, between 1978 and 1996, that this artist worked as a graphic designer and director of the respective office for ten years, in addition to having revealed to be a great figure in the field of Graphic Design and several arts, both nationally and internationally. After briefly presenting the history of the TNDM II and the institution characterization, an approach is made to its functioning, in particular to the Library | Archive and its collections. Then, the biographical career of Garizo do Carmo and his relationship with the TNDM II are deepened. In order to characterize the author's photographic profusion, an inventory of the collection was carried out that allowed the analysis and determination of its state of conservation. A total of 24 779 photographic species were identified, containing 23 806 species on photographic film, and 973 contact proofs, that are related to the time in which he photographed the rehearsals and shows performed in this theatre, which reveal the resident and guest cast that participated in these plays. These photographic records were intended to serve as a basis for the creation of posters and other promotional graphic materials of the TNMD II. It is also important to mention the unique character of this collection which, in addition of containing records of theatrical productions, moments and characters of Portuguese theatre, treasures part of the history of TNDM II, which is a legacy with artistic and documentary value. Finally, a risk analysis was carried out, which makes it possible to understand the characteristics and issues related to the preservation of this collection and to highlight the conservation conditions of the place where the TNDM II collections are stored

A tuberculose (TB) é uma doença infeciosa causada pelo Mycobacterium tuberculosis (Mtb) e é considerada uma das 10 principais causas de morte a nível mundial e a principal devida a um único agente. Em 2018 foram reportados 10 milhões de novos casos e 1,5 milhões de mortes. É considerada um perigo para a saúde pública devido ao contínuo aparecimento de novos casos, bem como ao crescimento da resistência antimicrobiana associada aos fármacos atualmente disponíveis. Em pacientes infetados com HIV (Vírus da Imunodeficiência Adquirida), a TB representa a principal causa de morte, sendo a probabilidade de desenvolverem a doença 19 vezes superior quando comparados com pacientes não infetados com HIV. A Organização Mundial da Saúde estima que cerca de 23% da população (1,7 mil milhões de pessoas) tem TB latente. Esta forma da patologia observa-se quando o sistema imunitário é capaz de controlar a propagação do Mtb. Contudo, não apresenta sintomas, o que torna difícil a sua deteção e, caso o sistema imunitário do hospedeiro seja comprometido, pode levar a uma reativação causando, consequentemente, TB ativa. Portanto, pessoas com TB latente representam uma fonte de contaminação e propagação da doença. Fatores como a ausência de uma vacina totalmente eficaz, a longa duração dos tratamentos e o lento desenvolvimento de novos medicamentos, torna difícil a erradicação da TB. O mecanismo de infeção começa com a inalação dos bacilos que, dada a sua reduzida dimensão, conseguem chegar aos alvéolos pulmonares. Seguidamente são fagocitados por macrófagos que têm a capacidade de recrutar outras células imunológicas para o local da infeção. Este recrutamento levará à formação de uma estrutura que impedirá a propagação dos bacilos, denominada granuloma. Esta é tão favorável para o bacilo quanto para o hospedeiro, uma vez que, se por um lado o granuloma impede que o Mtb se espalhe (causando lesões nos pulmões e outros órgãos), por outro lado, o Mtb dentro do granuloma consegue sobreviver, apesar de se encontrar num estado não-replicativo. Na maioria dos casos, o granuloma é suficiente para conter o bacilo, contudo, aquando de um enfraquecimento do sistema imunitário do hospedeiro, o Mtb pode ser libertado e levar ao desenvolvimento de TB ativa. O precoce diagnóstico e correto tratamento são as principais ferramentas para o controlo da doença. A deteção da TB latente pode ser feita in vivo, através do teste da tuberculina complementado com Raios-X ao tórax e análise da expetoração, ou in vitro, pelo ensaio de libertação de interferon-gama. De maneira a providenciar a terapia mais adequada, é realizado um teste de suscetibilidade aos fármacos, possibilitando a deteção de resistências. As várias resistências contra os fármacos atualmente disponíveis constituem um grande perigo na luta contra a TB. Atualmente, estão descritos quatro tipos de resistência, TB resistente à rifampicina; TB multi-resistente, quando resistente pelo menos à isoniazida e rifampicina; TB extensivamente-resistente, em casos onde se observa resistência a todos os fármacos de primeira linha, bem como a pelo menos uma fluoroquinolona e um injetável; e, por fim, TB totalmente-resistente, descrita como resistente a todos os fármacos de primeira e segunda linha. A resistência pode ser transmitida ou adquirida, sendo a primeira o resultado da transmissão direta de estirpes resistentes no momento da infeção, por parte de uma pessoa infetada com a estirpe resistente; e a segunda, consequência do aparecimento de mutações. Estas mutações são maioritariamente espontâneas e observadas em genes que codificam para as proteínas alvo dos fármacos. O atual tratamento da TB suscetível a fármacos inclui seis meses de tratamento, aplicando nos primeiros 2 meses uma terapia com isoniazida, rifampicina, pirazinamida e etambutol, seguidos de 4 meses com isoniazida e rifampicina. Estes fármacos de primeira geração têm como alvo enzimas essenciais ao funcionamento do bacilo, como por exemplo, enzimas envolvidos na síntese de componentes da membrana celular e na síntese proteica. A bedaquilina e a delamanida, fármacos recentemente aprovados, são usados para o tratamento da TB multi-resistente, sendo ambos ativos contra as formas replicantes e não-replicantes do bacilo e contra estirpes suscetíveis e resistentes aos fármacos. Através de um screening contra o Mtb (estirpe H37Rv) de uma biblioteca de compostos do nosso laboratório foi observado que a classe das azaauronas exibia atividade inibitória promissora. Contudo, estes compostos apresentavam problemas relativamente à solubilidade aquosa. Assim sendo, novos compostos foram sintetizados com o objetivo de melhorar a solubilidade aquosa, tentando manter a atividade antimicrobiana que apresentavam. A via sintética das azaaurones inclui quatro passos: (1) acilação de uma anilina usando cloroacetonitrilo, (2) proteção do grupo amina da anilina com grupos acetilo, carbamoilo e benzoilo, (3) ciclização intramolecular, e (4) condensação aldólica. Neste trabalho realizaram-se várias tentativas de otimização dos rendimentos obtidos no passo da ciclização (passo 3), tendo-se testado diferentes bases (com diferentes forças) e o número de equivalentes dos reagentes. Os melhores resultados foram conseguidos com trietilamina (3 eq, 69%) e K2CO3 (1.2 eq, 56%) para os derivados N-acetilo e N-carbamoilo, respetivamente. Foi possível sintetizar uma pequena biblioteca de novos compostos (4b-d, f), com rendimentos moderados a bons. Estes foram caraterizados por 1H NMR, 13C NMR, COSY, HSQC, HMBC e espectrometria de massa. O grau de pureza foi determinado por HPLC. Como mencionado anteriormente, as azaauronas iniciais não apresentavam bons valores de solubilidade o que representa uma grande desvantagem destes compostos dado que a solubilidade é umas das principais e mais importantes propriedades físico-químicas dos compostos na descoberta e desenvolvimento de fármacos. Compostos com reduzida solubilidade aquosa estão associados a problemas de má absorção, e consequentemente, reduzida biodisponibilidade, podendo também afetar os ensaios biológicos, SAR e atividade farmacológica. Assim sendo, é importante determinar este parâmetro o mais cedo possível, para evitar posteriores complicações em fases avançadas do processo de desenvolvimento do fármaco. Existem dois tipos de solubilidade, a termodinâmica e a cinética, que podem ser determinadas dependendo da informação pretendida. Essencialmente, a solubilidade termodinâmica reflete “Até que ponto o composto dissolve?”, e, inversamente, a solubilidade cinética representa “Até que ponto o composto precipita?”. A solubilidade cinética e a termodinâmica apresentam várias diferenças. Nos métodos de determinação da solubilidade cinética, o ensaio começa com o composto previamente dissolvido num solvente orgânico (normalmente, DMSO), ao contrário do que se verifica nos métodos termodinâmicos, que utilizam o composto no estado sólido. Os métodos cinéticos são normalmente utilizados na fase inicial da descoberta de fármacos, dada a facilidade e rapidez dos mesmos; contrariamente ao que se verifica para os métodos termodinâmicos, aplicados em fases posteriores. Neste trabalho foi desenvolvido um método analítico para determinar a solubilidade cinética. Este método consistiu na adição do composto (pré-dissolvido em DMSO) em tampão fosfato e, depois da incubação e centrifugação, o sobrenadante foi analisado por HPLC. As condições do HPLC foram otimizadas para todos os compostos bem como para o padrão utilizado (ácido salicílico). O valor de solubilidade foi determinado através de uma curva de calibração em DSMO. O objetivo de melhorar a solubilidade foi cumprido, quando comparado com o composto inicial 4a, apesar de ter sido observada uma diminuição da atividade para os compostos sintetizados. Esta redução da atividade pode estar relacionada com o perfil lipofílico da membrana celular do Mtb. Foi analisada a possibilidade de estabelecer uma correlação entre a solubilidade e a atividade, contudo não foi possível dado o reduzido número de compostos. Futuramente, deverá ser alargada a biblioteca de derivados de azaauronas, sintetizando compostos com diferentes grupos introduzidos na posição R2 (Figure 8). Tal deverá permitir estabelecer SAR e, também, uma correlação entre a atividade e a solubilidade aquosa para esta família de compostos.

The work presented here is an investigation that involves the pedagogical sector of the Bordalo Pinheiro Museum and proposes to develop three new activities of cultural mediation for children in the non-formal education environment, involving the theme of the museum. For the same, a study was made of the life, work of Rafael Bordalo Pinheiro and collections of the referred museum, bibliography, visits and participation in museum actions and also the contents of the institution's official website. As a result, three practical activities of cultural mediation were developed, through guided expeditions and divided into three different moments, involving appreciation, contextualization and practice. The Bordalo Pinheiro Museum presents a wide range of activities in this field and provided the good development of this work by supporting and assisting this research project. It was possible to verify the bold position of the museum in this pedagogical aspect and that it fulfills the needs and duties as a museum and also the detailed aspects of the formulation of new activities as well as the important results of the same to be able to continue improving the quality of educational activities in the field of museology and museography.

As espécies do género Euphorbia têm sido utilizadas na medicina tradicional, desde a Antiguidade, para o tratamento de verrugas, tumores, cancros e infeções intestinais, entre outras patologias. Nas últimas décadas, o estudo fitoquímico destas espécies tem merecido uma especial atenção, devido ao isolamento de um enorme número de compostos biologicamente ativos, dos quais se destacam os diterpenos policíclicos e macrocíclicos, com esqueletos do tipo jatrofano e latirano, triterpenos tetracíclicos e pentacíclicos e esteroides. Das diversas atividades biológicas demonstradas por estes compostos, são de salientar os resultados obtidos com os diterpenos macrocíclicos, que revelaram uma importante atividade moduladora da glicoproteína-P, uma das principais proteínas transmembranares envolvidas na multirresistência das células tumorais aos fármacos anti-neoplásicos. Esta dissertação teve como principal objetivo a pesquisa de novos compostos bioativos a partir de Euphorbia pubescens. Para tal, foram utilizadas duas abordagens: i) o isolamento de compostos a partir três frações do extrato metanólico; ii) derivatização molecular de compostos isolados em maior quantidade. O estudo fitoquímico foi realizado recorrendo a técnicas cromatográficas, nomeadamente cromatografia em coluna ou cromatografia preparativa em camada fina. Foram isolados e identificados onze compostos, incluindo cinco triterpenos pentacíclicos (taraxerona, taraxerol, acetato de taraxerol, isomultiflorenol e acetato de isomultiflorenol), um diterpeno macrocíclico do tipo jatrofano (euphopubescenol), três lactonas diterpénicas do tipo ent-abietano (helioscopinolidos A, B e E), um esteroide (β-sitosterol) e um composto fenólico (coniferaldeído). A taraxerona foi isolada em maiores quantidades, pelo que se procedeu à derivatização da função cetona em C-3 por condensação com a hidrazina, fenil-hidrazina e a 2,4-dinitrofenilhidrazina, obtendo-se três novos derivados. As estruturas químicas dos compostos foram deduzidas com base nas suas características físicas e espectroscópicas (IV, espectrometria de massa, ressonância magnética nuclear unidimensional - 1H-RMN e 13C-RMN - e bidimensional - 1H-1H-COSY, HMQC, HMBC) e por comparação com dados descritos na literatura. Futuramente, serão realizados estudos adicionais que permitirão avaliar a capacidade dos compostos obtidos como moduladores da glicoproteína-P em células tumorais resistentes.

Aim: To evaluate the evolution of the functional profile of older adults admitted to a health unit in Portugal; to relate the functional profile of these individuals with age, sex, education level and emotional state; and to evaluate the probability of the degree of dependence as a function of age and sex. Methods: longitudinal, retrospective study with a sample of 59,013 older adults admitted to convalescence units of the National Network of Integrated Continuous Care of Portugal. Results: In the first 75 days of hospitalization, activities of daily living, mobility and cognitive state improved, but there was a decline after 75 days of hospitalization. The ability to perform instrumental activities of daily living improved in the first 15 days of hospitalization, stabilized until 45 days and then began to worsen. Women had a higher probability of having a severe/complete dependence three years earlier than men (88 years to 91 years). A higher education level and stable emotional state were protective factors against functional decline. Conclusions: The functional profile of older adults improved during the length of stay recommended for hospitalization in convalescence units (30 days). It is critical for health systems to adopt strategies to prevent declines in the emotional state of frail individuals.

Introduction: Liver cirrhosis is a prevalent disease in Portugal. Recent changes in alcohol consumption, as well as the wide use of direct-acting antivirals for hepatitis C since 2015, may be contributing to changes in the national burden of liver cirrhosis in the last few years. Objectives: We aim to characterize the burden of cirrhosis in Portugal between 2010 and 2017. Patients and methods: We analyzed all hospital admission episodes due to cirrhosis in Portugal Mainland between 2010 and 2017, registered in the national Diagnosis-Related Group database, according to etiology of cirrhosis. We also analyzed data on mortality and potential years of life lost from liver cirrhosis and chronic liver disease, retrieved from Statistics Portugal (National Institute for Statistics). Results: Between 2010 and 2017, a total of 51,438 admissions for liver cirrhosis occurred in Portugal. The annual number of admissions decreased (p = 0.044) during the analyzed period. The most frequent cause of cirrhosis was alcoholic liver disease, present in 78.9% of all admissions (n = 40,595), followed by chronic hepatitis C virus infection, present in 11.3% (n = 5,823). A male predominance was identified in the admissions for every analyzed cause of cirrhosis. Annual admissions for alcoholic cirrhosis remained stable (p = 0.075) during the 8-year period. The same stable tendency was observed in the number of admissions for cirrhosis caused by hepatitis C virus (p = 0.861) and alcohol plus hepatitis C virus infection (p = 0.082), although these admissions for hepatitis C-related cirrhosis increased until 2014-2015 and steadily decreased thereafter. Annual deaths due to liver cirrhosis and chronic liver disease decreased from 1,357 in 2010 to 1,038 in 2017 (p = 0.002). The number of potential years of life lost decreased as well in the period (p = 0.001). Conclusion: The burden of cirrhosis, evaluated by hospital admissions, mortality, and potential years of life lost, decreased in Portugal between 2010 and 2017.

Pericardial cysts are rare and generally benign intrathoracic lesions, most frequently located in the cardiophrenic angles, but other locations have been described. We present a case of a pericardial cyst in a previously undescribed site. Our patient presented with a cyst in the interventricular septum which was discovered as an incidental finding. After surgical excision of the cyst, it was described pathologically as a simple mesothelial pericardial cyst. The explanation of this rare condition is uncertain, but some hypotheses can be outlined.

Introduction: In the last decade, the downgrading of indications for antibiotic prophylaxis for infective endocarditis caused an uncertain impact on the incidence of this condition. Since no data is available on the practice of infective endocarditis prophylaxis in Portugal, we aimed to characterize the pattern of antibiotic use for infective endocarditis prophylaxis and the compliance/awareness of scientific guidelines among physician members of the Portuguese Society of Cardiology. Material and methods: A cross sectional observational study was conducted. An online self-completed questionnaire with 12 items on infective endocarditis prophylaxis was sent to 1330 physicians, specialists and residents, members of the Portuguese Society of Cardiology. In addition, descriptive statistical analysis was performed. Results: Two hundred and fifty-three valid questionnaires were responded. Eighty-seven per cent of respondents were cardiologists (specialists or residents), mostly between 30 and 40 years old (26.7%) and 50 to 80 years old (44.3%). The majority (83.0%) follow the European scientific guidelines. Still, 61.0% had or may have had doubts regarding prophylaxis of infective endocarditis in certain patients. Variable adherence to scientific guidelines was noted. Further scientific evidence was required by 60.6% of respondents. Conclusion: Infective endocarditis prophylaxis was generally guided by European scientific guidelines among physicians of the Portuguese Society of Cardiology. There was, however, an evident discrepancy between the guidelines and real-world perception of the risk of infective endocarditis. This highlights the sensed gap in accessing more robust scientific evidence.

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Background: Automated systems for substrate mapping in the context of ventricular tachycardia (VT) ablation may annotate far-field rather than near-field signals, rendering the resulting maps hard to interpret. Additionally, quantitative assessment of local conduction velocity (LCV) remains an unmet need in clinical practice. We evaluate whether a new late potential map (LPM) algorithm can provide an automatic and reliable annotation and localized bipolar voltage measurement of ventricular electrograms (EGMs) and if LCV analysis allows recognizing intrascar conduction corridors acting as VT isthmuses. Methods: In 16 patients referred for scar-related VT ablation, 8 VT activation maps and 29 high-resolution substrate maps from different activation wavefronts were obtained. In offline analysis, the LPM algorithm was compared to manually annotated substrate maps. Locations of the VT isthmuses were compared with the corresponding substrate maps in regard to LCV. Results: The LPM algorithm had an overall/local abnormal ventricular activity (LAVA) annotation accuracy of 94.5%/81.1%, which compares to 83.7%/23.9% for the previous wavefront algorithm. The resultant maps presented a spatial concordance of 88.1% in delineating regions displaying LAVA. LAVA median localized bipolar voltage was 0.22 mV, but voltage amplitude assessment had modest accuracy in distinguishing LAVA from other abnormal EGMs (area under the curve: 0.676; p < .001). LCV analysis in high-density substrate maps identified a median of two intrascar conduction corridors per patient (interquartile range: 2-3), including the one acting as VT isthmus in all cases. Conclusion: The new LPM algorithm and LCV analysis may enhance substrate characterization in scar-related VT.

A escola é um local de grande diversidade cultural, o que possibilita que sejam aí promovidas estratégias para o desenvolvimento de um ambiente que proporcione uma maior inclusão. A presente pesquisa tem como problema principal: investigar se, com a implementação do Decreto-Lei nº 54/2018, houve mudanças na prática dos professores do primeiro ciclo no que tange à problemática da interculturalidade e da educação inclusiva e também reunir sugestões para uma formação de professores com abordagem na mesma problemática. Para isso, realizou-se uma pesquisa qualitativa, a partir de um estudo de caso exploratório, usando como instrumentos de recolha de dados, a observação participante e as entrevistas de grupo focalizadas. Participaram das entrevistas 8 (oito) professores do primeiro ciclo, de um colégio privado localizado na zona de Lisboa. Foram realizadas 4 (quatro) entrevistas em grupo através da plataforma Zoom. A análise dos dados foi realizada por meio da análise de conteúdo e com auxílio do software N-VIVO-12. Foram determinadas cinco categorias de análise de acordo com os objetivos da pesquisa: mudança, dificuldades, interculturalidade, educação inclusiva e formação de professores. Percebeu-se, com o desenvolvimento da pesquisa, que todos os professores estão disponíveis para uma formação baseada na inclusão e na interculturalidade. Como sugestões de temas, os professores ressaltaram estratégias para uma melhor inclusão com os alunos em sala de aula, materiais de trabalho inovadores, estratégias de intervenção com alunos que não dominam a língua portuguesa e trabalho específico com as famílias. Ao participar das entrevistas, os professores refletiram em relação à educação inclusiva e interculturalidade, ressaltando a importância da pesquisa para que, futuramente, possam participar de uma formação com base nos interesses e necessidades experienciados na prática.

O presente relatório de Iniciação à Prática Profissional III - Atitudes, Comportamento e Construção Social da Moral - Uma Reflexão centrada no Ensino da disciplina de História, realizado no âmbito do Mestrado em Ensino da História no 3º Ciclo do Ensino Básico e no Ensino Secundário, teve a orientação do Professor Doutor Miguel Monteiro, coordenador do respetivo Mestrado. O cerne estrutural deste relatório é duplo: procurar uma coerência moral com base na filosofia e na história e justificar a capacidade do autor de ensinar de forma ética, focada no desenvolvimento do aluno e do professor. Para tal, evidenciamos nobres pensadores que contribuíram para a definição da ética e didática, analisando-os brevemente na tentativa de criar máximas para a profissão de professor. Esta reflexão é informada pelas experiências vividas por parte do autor durante a Prática Letiva Supervisionada, onde este lecionou dez tempos (45 minutos cada) de História à turma do 9ºF da Escola Básica Alto dos Moinhos durante o decorrer do ano letivo de 2020/2021, dando continuidade ao trabalho realizado no ano anterior. É da visão do último que as disciplinas de História e de Filosofia estão intimamente interligadas e que a compreensão de uma facilita a compreensão da outra. Consequentemente, no âmbito de educar jovens para o mundo cívico, é necessário refletir sobre as bases da ética ao longo das eras, escutar os seus conselhos e construir um sentido de moralidade robusto e honesto dado ser impossível educar para a moral se não se possui tal robustez e honestidade.

Introdução: A trombose é uma patologia comum e complexa, referente à formação de um coágulo, que dificulta o normal fluxo sanguíneo. Sob condições normais, os mecanismos procoagulantes, anticoagulantes e fibrinolíticos regulam a hemostasia para evitar a formação patológica destes coágulos. No entanto, alterações nos genes de proteínas envolvidas direta ou indiretamente na regulação hemostática podem levar a um aumento anómalo da coagulação e a uma maior predisposição à formação de coágulos obstrutivos. Esta condição é conhecida como trombofília e descreve um estado de hipercoagulabilidade responsável pelo desenvolvimento de eventos trombóticos que comprometem a vida (como o enfarte do miocárdio, acidente vascular cerebral e embolia pulmonar) e que geralmente se desenvolvem na presença de um ou mais fatores de risco herdados (variantes genéticas) e ambientais (adquiridos). A trombose tem, portanto, uma origem multifatorial causada pela interação destes fatores de risco herdados e/ou outros adquiridos (tabagismo, gravidez, uso de contracetivos orais e terapia hormonal), que podem coexistir no mesmo indivíduo e conferir um risco contínuo ao longo da vida. Devido ao seu estado adquirido de hipercoagulabilidade, as grávidas apresentam ainda um risco acrescido à manifestação de tromboses, traduzido pela ocorrência de abortos espontâneos recorrentes. Através da eliminação de fatores de risco adquiridos é possível prevenir (até certo ponto) o desenvolvimento de trombose. É assim importante conhecer o perfil genético da população de forma a reunir dados que permitam a identificação de indivíduos de alto risco e antecipar a ocorrência destes eventos, bem como desenvolver medidas preventivas dirigidas aos mesmos. Os objetivos deste projeto são então estimar a prevalência das variantes trombogénicas FV G1691A (FV Leiden), FII G20210A, AT Cambridge II, PAI-1 4G/5G, MTHFR C677T e MTHFR A1298C na população portuguesa, estabelecer associações entre a presença destas variantes genéticas e outros fatores de risco adquiridos no desenvolvimento de eventos trombóticos e identificar grupos de indivíduos de alto risco em Portugal. Metodologia: 774 participantes do estudo e_COR, um estudo epidemiológico transversal, previamente desenvolvido no Instituto Nacional de Saúde Doutor Ricardo Jorge (INSA) com participantes das 5 regiões de Portugal Continental (Norte, Centro, Lisboa, Alentejo e Algarve), foram aleatoriamente selecionados para o presente estudo de forma a serem representativos da população portuguesa. A todos os participantes foi realizado um exame físico, bem como um questionário com informação clínica e pessoal necessária à realização do estudo. Após recolha das amostras de sangue, os parâmetros bioquímicos foram determinados e o ADN extraído, procedendo-se à genotipagem das variantes FV Leiden, FII G20210A, AT Cambridge II, PAI-1 4G/5G, MTHFR C677T e MTHFR A1298C pela tecnologia TaqMan® OpenArray™. As frequências alélicas e genotípicas das variantes foram determinadas de forma a estimar a sua prevalência na população portuguesa. Realizaram-se correlações entre os genótipos e a informação pessoal, bioquímica e clínica dos participantes, tendo sido também determinadas as frequências de subgrupos em risco acrescido de trombose. Resultados: Dos indivíduos estudados, apenas 2,2%, 4,1% e 0,6% apresentavam, respetivamente, as variantes genéticas FVL, FII G20210A e AT Cambridge II em heterozigotia, não sendo identificados casos de homozigotia para estas alterações genéticas. Por outro lado, as variantes PAI-1 4G/5G e MTHFR C677T e A1298C revelaram estar amplamente distribuídas pela população: 50,4% e 21,8% dos participantes eram respetivamente heterozigotos e homozigotos para o PAI-1 4G/5G; na mesma ordem, 43.2% e 12,8% eram heterozigotos e homozigotos para a MTHFR C677T; e 39,5% e 9,8% exibiam heterozigotia e homozigotia para a MTHFR A1298C. Apenas 3,6% dos participantes não apresentaram qualquer alelo de risco trombogénico para as variantes em estudo. A maioria dos Portugueses (69% da população) eram portadores de pelo menos 2 variantes genéticas – a combinação mais prevalente foi a variante PAI-1 4G/5G com as variantes MTHFR C677T (24%) ou A1298C (19,8%), englobando ambos os genótipos hetero- e homozigótico. No que diz respeito aos fatores de risco trombogénicos adquiridos, observou-se que: 64,7% dos indivíduos apresentavam excesso de peso, 19,4% hiperhomocisteinemia e 24,3% hábitos tabágicos. Estes fatores revelaram ser mais prevalentes entre o sexo masculino. As mulheres podem apresentar um risco acrescido pelo uso de contracetivos orais (29,5% da população feminina em estudo) ou tratamentos hormonais (12,3%). Foi também analisada a ocorrência de enfarte do miocárdio e acidente vascular cerebral na população, bem como de abortos espontâneos entre as mulheres. Comparando os indivíduos que não desenvolveram nenhum evento trombótico, com o grupo de indivíduos que sofreu de enfarte do miocárdio, verificou-se que estes englobavam, com maior frequência, portadores das variantes FVL (5,3% vs. 2,1%) e FII G20210A (15,8% vs. 3,7%), assim como de homozigotos para a variante PAI-1 4G/5G (31,6% vs. 21,6%). O grupo com diagnóstico de AVC apresentava maior frequência de heterozigotos para o FVL (13,0% vs. 1,9%), de heterozigotos para a MTHFR C677T (65,2% vs. 42,4%), bem como, de homozigotos para o PAI-1 4G/5G (30,4% vs. 21,6%). Por fim, entre as mulheres que sofreram de aborto espontâneo, observou-se uma maior frequência dos genótipos heterozigóticos para o FVL (4,5% vs. 2%) e PAI-1 4G/5G (56,8 % vs. 47%), assim como, para o genótipo homozigótico da variante MTHFR A1298C (15,9% vs. 9,2%, p=0,037). Por outro lado, as mulheres fumadoras que tiveram pelo menos um aborto espontâneo apresentavam maior frequência do genótipo homozigótico da MTHFR C677T (18,2% vs. 3%). Discussão: A variante genética mais prevalente neste estudo foi a PAI-1 4G/5G, seguida pelas variantes MTHFR C677T e A1298C. A prevalência estimada para as variantes FVL e FII G20210A é claramente menor que as anteriores e a AT Cambridge II revelou-se rara na população Portuguesa. Embora as prevalências estimadas para Portugal se encontrem de acordo com as frequências esperadas para populações Caucasianas, as frequências determinadas para o FVL e FII G20210A diferem entre países Europeus. As variantes FVL, FII G20210A e MTHFR C677T parecem influenciar a ocorrência de trombose arterial. Pela análise realizada neste estudo, 0,3% da população pode estar em risco uma vez que apresenta as três variantes em simultâneo. Apresentar o genótipo PAI-1 4G/4G pode também influenciar estas ocorrências, colocando 21,8% da população portuguesa em maior risco trombótico, particularmente aqueles que apresentam simultaneamente hipercoagulabilidade e hipofibrinólise: 1,9% e 2,8% da população que é também portadora das variantes FVL ou FII G20210A, respetivamente. 43,8% da população Portuguesa apresenta simultaneamente a variante genética PAI-1 4G/5G com uma das variantes da MTHFR, o que sugere um perfil trombofílico caraterizado por fibrinólise anormal, maior procoagulação, possível aumento da inflamação, bem como, disfunção endotelial. As mulheres podem ter ainda acrescido risco pelo uso de contracetivos orais e por serem portadoras de pelo menos um alelo de risco das variantes: PAI-1 4G/5G (presente em cerca de 20% da população feminina), MTHFR C677T (cerca de 15%) e MTHFR A1298C (cerca de 15%). Têm também um risco aumentado 6 a 10% da população feminina portadora de pelo menos um dos alelos de risco para cada uma dessas variantes referidas e sob tratamento hormonal. Verificou-se que as mulheres que tomam contracetivos orais e apresentam as variantes FVL (0,2%) e FII G20210A (0,7%), assim como, as que fazem terapia hormonal e são portadoras do FII G20210A (0,7%) estão em maior risco, especialmente se forem obesas e/ou fumadoras. As grávidas que apresentam a variante MTHFR A1298C correm maior risco de aborto espontâneo, apesar das variantes FVL e PAI-1 4G/5G poderem também influenciar o risco. As variantes FII G20210A e MTHFR C677T (isoladamente) não parecem influenciar a ocorrência de aborto; no entanto, a homozigotia para a MTHFR C677T juntamente com o tabagismo aparentam ter influência nessas incidências. A presença de pelo menos um alelo de risco de qualquer uma das variantes da MTHFR em fumadoras pode também favorecer a ocorrência de aborto. Conclusão: A população portuguesa apresenta vários fatores de risco genéticos e adquiridos que podem interagir e culminar na incidência de eventos trombóticos. Consciencializar para a trombofilia é crítico para a prevenção, quer seja pela redução de fatores de risco adquiridos (mudanças no estilo de vida) ou pela otimização da terapêutica, que pode melhorar o prognóstico destes indivíduos. Desta forma, os resultados obtidos no presente estudo são importantes para a elaboração de estratégias terapêuticas e diretrizes de saúde para a identificação dos grupos de maior risco trombótico.

No âmbito de Iniciação à Prática Profissional IV, do Mestrado em Ensino da Informática na Universidade de Lisboa, foi realizada uma Intervenção Pedagógica e consequentemente um relatório que procurará documentar esta experiência pedagógica. O tema da intervenção foi a Realidade Aumentada (RA). Esta intervenção decorreu entre fevereiro e março do ano de 2021, num total de 12 aulas. Este projeto de intervenção pedagógica foi realizado na sede do Agrupamento de Escolas Eça de Queirós, na Escola Secundária Eça de Queirós, na turma do 11º ano do Curso Profissional de “Técnicos de Multimédia”, na unidade curricular de “Produção de Multimédia”, mais especificamente “Média, Tecnologias Emergentes e Interação”, e, incidiu sobre o conteúdo de Realidade Aumentada. De acordo com o referencial de RVCC Profissional, com este módulo pretende se utilizar tecnologias emergentes para produzir produtos multimédia. Para tal procedeu se a uma análise de aplicações de RA, ao mesmo tempo que foram introduzidos os conceitos básicos de RA e se fez uma exploração do uso de plataformas de desenvolvimento de RA. Considerando a natureza dos conteúdos e a metodologia utilizada pela professora cooperante demonstrada na observação das aulas, foram aplicados alguns dos princípios da metodologia Project Based Learning, com o intuito de preparar os alunos deste curso para a vida profissional que, em breve, estarão prestes a iniciar. Em termos de conteúdos para os estudantes, neste projeto foram realizados: a introdução de conceitos elementares de RA; a tipificação de equipamentos e componentes de RA; a identificação dos problemas mais comuns em RA; a atividade em que os alunos experimentaram apps de RA e realizaram uma análise crítica de uma aplicação para telemóvel que continha elementos de RA; um miniprojecto, que consistiu em criar uma aplicação para telemóvel de RA, através da plataforma Unity e o SDK Vuforia e a apresentação à turma desta aplicação. Os métodos utilizados foram, principalmente, o método expositivo e o método ativo, conforme a decisão definida desde a fase inicial de planeamento e também devido ao facto de não me ter sido possível estar presencialmente no local das aulas. Este projeto incluiu também uma dimensão investigativa sobre a RA na Educação, dado que se centrou na investigação da contribuição do uso da RA em sala de aula para a satisfação dos alunos. Tendo-se concluído, de acordo com os resultados obtidos na investigação, que a maioria dos alunos considera que a utilização de RA pode contribuir para a sua satisfação em sala de aula

O princípio subjacente à legislação farmacêutica é a proteção da saúde pública e como tal, um medicamento antes de ser colocado no mercado da União Europeia tem de ter comprovada a sua segurança, eficácia e qualidade. O uso de medicamentos fora dos termos aprovados na autorização de introdução no mercado é considerado off-label- não conformidade com a rotulagem. As razões que motivam a utilização de medicamentos fora das especificações definidas na rotulagem são diversas e complexas. O uso off-label é particularmente motivado para colmatar as necessidades específicas dos pacientes e para responder a situações médicas insatisfeitas. Esta modalidade clínica é uma prática generalizada , representando uma realidade inevitável nos sistemas de saúde modernos. No entanto, devido à ausência de uma avaliação rigorosa do benefício- risco , a prescrição off-label levanta questões éticas, colocando riscos óbvios à segurança do paciente e, por essa razão, deve apenas ser considerada excecionalmente. Os vários intervenientes na área do medicamento- autoridades reguladoras, profissionais de saúde, empresas farmacêuticas, decisores na área da saúde e os pacientes -estão constantemente a ser desafiados pela necessidade de gerir situações que surgem do uso off-label. Assim, eles beneficiariam da existência de um enquadramento universal e harmonizado desta matéria. Atualmente, não existem normas harmonizadas ao nível da União Europeia. Várias abordagens para regular o uso off-label de medicamentos têm sido propostas nalguns estados membros. Contudo, a situação permanece insatisfatória e nenhuma destas medidas parece resolver adequadamente o problema. Tendo em conta a importância e a contorvérsia deste tema , é mais relevante do que nunca promover discussões para gerir eficazmente o uso off-label de medicamentos. Este trabalho pretende apresentar uma revisão narrativa da literatura deste tema, numa tentativa de descrever e caracterizar esta prática. Este visa ainda discutir as oportunidades e desafios inerentes a certas propostas de regulação , assim como as implicações e contradições mais evidentes que podem surgir do uso off-label de medicamentos.

Em 2019, o projecto “Vila Nova de São Pedro, de novo no 3º milénio – VNSP3000”, deu continuidade às campanhas de escavação em Vila Nova de São Pedro, retomadas em 2017 e 2018. Esta intervenção consistiu em quatros acções de distinta natureza: limpeza por meios manuais e mecânicos de novas áreas (na procura de possíveis futuros espaços de escavação arqueológica); manutenção das áreas onde se encontram estruturas associadas à fortificação; continuação da escavação manual das sondagens 1 da Área 1 e 3; início da escavação das sondagens 2 e 3 da Área 3; registo fotográfico, gráfico e topográfico de todas as realidades intervencionadas. O alargamento da Sondagem 1 da Área 1, bem como a escavação da Sondagem 1 da Área 3 permitiram a identificação de níveis arqueológicos preservados, integrados no Calcolítico, numa leitura confirmada pelos materiais arqueológicos recolhidos e pelas datações absolutas obtidas.

Os telómeros são estruturas nucleoproteicas compostas por heterocromatina que protegem as regiões terminais dos cromossomas lineares eucariotas. Em mamíferos, a estrutura telomérica é essencialmente formada por repetições consecutivas de sequências de DNA em cadeia dupla (5’-TTAGGG-3’), da qual a cadeia rica em guanosina estende-se para além do seu complemento para formar uma protrusão conhecida como G overhang, e por um complexo multiproteico denominado de “shelterin” que assegura a proteção, integridade e regulação dos telómeros. A shelterin humana inclui os seis fatores TRF1, TRF2, TIN2, TPP1, POT1 e Rap1. Em células terminalmente diferenciadas, os telómeros são encurtados a cada ronda de replicação semiconservativa de DNA devido ao seu processamento nucleolítico e à incapacidade da maquinaria convencional de replicação de DNA de processar por completo as regiões 3’ distais de moléculas lineares de DNA durante a síntese da cadeia atrasada. Esta limitação ficou conhecida como end-replication problem. A ausência de um mecanismo de manutenção telomérica resulta na acumulação de telómeros excessivamente curtos e disfuncionais, os quais são reconhecidos como quebras de cadeia dupla (DSBs, do inglês Double-Stranded Breaks). Estes, por sua vez, levam à ativação de uma resposta contra o dano de DNA (DDR, do inglês DNA Damage Response). A estimulação prolongada de DDR induz uma paragem irreversível do ciclo celular conhecida como senescência celular (ou replicativa), podendo progredir para a morte celular. Embora a senescência celular estabeleça um tempo de vida útil a células somáticas incapazes de conservar os seus telómeros, esta é também considerada como um mecanismo decisivo de supressão tumoral. O potencial imortal das células cancerígenas depende da capacidade das mesmas em impedir o desgaste progressivo dos telómeros. Este processo está dependente da ação da enzima telomerase, a transcriptase reversa que permite a adição de novas repetições teloméricas às extremidades dos cromossomas, ou numa menor fração da via alternativa de alongamento de telómeros (ALT, do inglês Alternative Lenghtening of Telomeres), que induz uma reparação dirigida por homologia (HDR, do inglês Homology-Directed Repair). Apesar dos telómeros de mamíferos terem sido considerados transcricionalmente inativos devido à sua constituição heterocromática e à ausência de unidades génicas, estudos realizados pelo nosso grupo revelaram que estes são de facto transcritos em moléculas longas de RNA não-codificante conhecidas como TElomeric Repeat containing RNA (TERRA). Na verdade, não existe ainda uma caracterização completa das funções de TERRA, mas um número crescente de dados sustenta o seu papel na proteção e replicação dos telómeros e na formação de heterocromatina. Adicionalmente, TERRA pode funcionar como um regulador da telomerase, promovendo a elongação telomérica mediada por telomerase in vivo, apesar de inibir a atividade da mesma in vitro. Adicionalmente, TERRA tem a capacidade de emparelhar com a sua cadeia de DNA molde e formar uma estrutura em tripla cadeia constituída por um híbrido de RNA-DNA e uma cadeia codificante deslocada, denominada como R-loop telomérico (telR-loop). Recentemente, o nosso grupo demonstrou que as funcionalidades de TERRA são em parte mediadas pela formação de telR-loops estimulada por TRF2. Observações adicionais em células de levedura telomerase-negativas e pré-senescentes e em células ALT também implicaram os telR-loops na extensão dos telómeros por HDR de modo a compensar parcialmente a erosão das regiões terminais dos cromossomas na ausência de telomerase. Por fim, os telR-loops são regulados pelas enzimas RNase H1 e RNase H2, as quais hidrolisam especificamente a fração de RNA de híbridos de RNA-DNA. Enquanto que a acumulação de telR-loops em células de levedura sem ambas as enzimas retarda a incidência de senescência ao promover HDR telomérico, a remoção de telR-loops através da sobrexpressão de RNase H1 debilita a capacidade de recombinação telomérica e, consequentemente, intensifica o encurtamento dos telómeros e a ocorrência prematura de senescência. Os mecanismos pelos quais a homeostase telomérica é mantida ainda não são inteiramente conhecidos, mas as descobertas recentes acerca da biogénese de TERRA e as novas abordagens direcionadas à sua função trouxeram algum esclarecimento a este tema. Apesar de ainda não ser claro o mecanismo pelo qual TERRA é regulada em concordância com diferentes dinâmicas e estados teloméricos, postula-se que os telR-loops desempenhem um papel central neste processo. Assim, este estudo pretendeu elucidar o papel dos telR-loops na estabilidade dos telómeros em células humanas que expressam, ou não, a telomerase, e caracterizar o mecanismo pelo qual os telR-loops participam na regulação do comprimento dos telómeros mediada por TERRA. Para tal, estabelecemos um sistema celular direcionado aos telómeros e baseado na sobrexpressão de RNase H1 com o intuito de remover especificamente os telR-loops e avaliar a integridade telomérica após a exclusão destas estruturas. Para promover a associação do transgene aos telómeros, o domínio catalítico de RNase H1 humana foi fundido na sua região N-terminal a myc e na região C-terminal a POT1 humana (myc-POT1-RH1 WT). Adicionalmente, três transgenes foram criados, incluindo uma variante de RNase H1 cataliticamente inativa (myc-POT1-RH1 D145G), uma outra constituída ainda pelo seu domínio de ligação a híbridos (HBD, myc-POT1-HBDRH1 WT), e uma versão contendo apenas o domínio POT1, também marcado por myc na região N-terminal (myc-POT1). Os transgenes foram expressos numa linha celular de fibrossarcoma telomerase-positiva (HT1080), em fibroblastos primários de pulmão humano (HLF), e numa linha celular HLF imortalizada através da sobrexpressão da subunidade de transcriptase reversa da telomerase humana (HLF-hTERT). Excecionalmente, myc-POT1-HBDRH1 WT foi incluído apenas em HLF-hTERT. A expressão ectópica controlada por doxiciclina (dox) dos transgenes foi validada por Western Blot e a localização telomérica mediada por POT1 confirmada através de experiências de imunofluorescência com marcação a myc. Os nossos resultados demonstraram que tanto myc-POT1 como myc-POT1-RH1 WT e myc-POT1-RH1 D145G co-localizaram, na sua maioria, com a fração telomérica de HT1080, HLF e HLF-hTERT. Pelo contrário, a deteção de myc-POT1-HBDRH1 WT foi bastante variável e a sua localização também reduzida em telómeros de HLF-hTERT quando comparado com os restantes transgenes. Seguidamente, confirmámos em células HT1080 que a sobrexpressão do domínio catalítico de RNase H1 dirigida aos telómeros induz a degradação de telR-loops no cromossoma 10q. Por outro lado, a variante inativa do transgene promoveu a acumulação dos mesmos. Demonstrámos ainda que a ausência de telR-loops compromete a integridade dos telómeros em todas as linhas celulares testadas devido a um aumento do número de foci induzidos por disfunção telomérica (TIFs, do inglês Telomere Dysfunction-Induced Foci). No entanto, o número de TIFs não continuou a aumentar, o que possivelmente ilustra uma ativação adequada dos mecanismos de reparação de DSBs que bloqueiam a progressão contínua dos danos no DNA telomérico. De notar que a formação de TIFs foi significativamente restringida em células de HT1080 e HLF-hTERT que expressavam myc-POT1-RH1 D145G, sugerindo que, quando desprovido da atividade catalítica, RNase H1 pode fisicamente limitar a dissolução de telR-loops ao protegê-los de possíveis fatores de degradação de R-loops. Finalmente, observámos um aumento da quantidade de cromossomas desprotegidos pela ausência de sinais teloméricos em células HLF que expressavam myc-POT1-RH1 WT, mas não em células HLF-hTERT e HT1080. Por outro lado, a acumulação de telR-loops através da sobrexpressão de myc-POT1-RH1 D145G diminuiu os níveis de fragilidade telomérica nestas linhas celulares telomerase-positivas. Estes resultados sugerem, assim, que os telR-loops sustentam a proteção contra a instabilidade telomérica, e que esta função se torna determinante para a manutenção dos telómeros em fibroblastos primários humanos. Nas células que expressam telomerase, a perda de telómeros parece ser compensada pela presença desta enzima, que estabiliza a erosão progressiva das extremidades dos cromossomas lineares e suporta a homeostase telomérica. Como tal, e de acordo com as descrições associadas à natureza recombinante dos telómeros de células ALT e de levedura telomerase-negativas, propomos que os telR-loops também estimulam a extensão telomérica de uma maneira dependente de HDR em telómeros humanos curtos e danificados, de forma a adiar a ocorrência prematura de senescência e morte celular descontrolada. Adicionalmente, os nossos resultados sugerem que a RNase H1 pode funcionar como um fator limitante de recombinação telomérica nestas células ao regular os níveis de telR-loops e assegurar um equilíbrio entre senescência, supressão tumoral e estabilidade telomérica ao longo do ciclo de vida celular. Finalmente, os nossos resultados indicam também que o HDR telomérico pode ser exercido através de replicação induzida por quebras (BIR, do inglês Break-Induced Replication), tal como já foi verificado na manutenção de telómeros dependentes de HDR em células eucariotas que não expressam telomerase.

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