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O presente estudo volta-se à investigação das marcas renovadoras da “literatura exigente” em quatro de seus romances, Outros nomes, sopro (2004), de André Queiroz; A história dos ossos (2005), de Alberto Martins; Ó (2008), de Nuno Ramos; Procura do romance (2011), de Julián Fuks. Para tratar das mutações propostas por essa safra da prosa brasileira contemporânea, objetiva-se verificar como suas peculiaridades se estabelecem no corpo textual, bem como examinar sua relação de retomada e ruptura com obras da literatura convencional. A radicalização da linguagem e heterodoxia já notadas em autores da chamada modernidade são discutidas na análise, que se desdobra no exame dos elementos ficcionais sobre a morte, tão presente na referida prosa, e na discussão sobre o declínio da literatura já anunciada por outros autores da literatura do século anterior. A análise do corpus pretende mostrar de que maneira a seleção temática, a forma de narrar e a estrutura textual auxiliam na compreensão dos rumos da literatura da contemporaneidade. Nesse sentido, o resultado do estudo prevê um panorama reflexivo da complexidade da crise literária no século XXI.

Este trabalho teve como objectivo contribuir para o isolamento de novos diterpenos macrocíclicos bioactivos a partir da espécie Euphorbia boetica, com vista a aumentar o número de análogos e proceder futuramente a estudos de relação estrutura-actividade. A planta inteira foi seca e seguidamente extraída com metanol. A fracção solúvel em acetato de etilo do referido extracto metanólico foi fraccionada recorrendo a várias técnicas cromatográficas, tais como: cromatografia em coluna e cromatografia em camada fina analítica e preparativa. Foi ainda utilizada a técnica de recristalização. Foram isolados três novos diterpenos macrocíclicos com o esqueleto do latirano. As estruturas dos compostos foram estabelecidas recorrendo a métodos físicos e espectroscópicos (infravermelho, espectrometria de massa e técnicas de ressonância magnética nuclear que incluíram técnicas monodimensionais – 1H-RMN, 13C-RMN, DEPT – e bidimensionais – COSY, HMQC e HMBC).

O tumor de células gigantes do osso é uma neoplasia benigna que representa cerca de 4% de todas as neoplasias primárias ósseas. Apesar de benigna é localmente agressiva e pode provocar destruição dos tecidos circundantes e eventualmente metastizar, habitualmente para os pulmões. O tratamento desta patologia baseia-se na eliminação e contenção do crescimento do tumor, com recurso a diferentes terapêuticas como a abordagem cirúrgica, a radioterapia ou fármacos. Sabe-se que o método mais eficaz é a resseção em bloco do tumor, contudo nem sempre é possível fazê-lo e nesses casos deve recorrer-se à terapêutica farmacológica com bisfosfonatos, interferão α ou, mais recentemente, o denosumab. Este fármaco é um anticorpo monoclonal anti RANKL, usado em diversas situações sendo particularmente útil em contexto de irressecabilidade tumoral mas também no contexto neoadjuvante ou adjuvante, para controlo da doença e posterior abordagem cirúrgica. O caso clínico em discussão retrata a evolução desta patologia nos últimos 20 anos, num doente com diagnóstico feito aos 18 anos. Este doente tem um tumor de células gigantes da coluna cervical e apesar de, atualmente, a doença estar controlada já teve períodos de agravamento, com evidência de malignização na loca primária – osteossarcoma e posterior metastização pulmonar do tumor primário. O objetivo será refletir sobre as intervenções já feitas neste doente e, com base na literatura mais atual, perceber quais serão as opções terapêuticas num futuro próximo.

Eukaryotic RNA polymerase II is a complex enzyme composed of 12 distinct subunits that is present in cells in low abundance. Transcription of mRNA by RNA polymerase II involves a phosphorylation/dephosphorylation cycle of the carboxyl-terminal domain (CTD) of the enzyme's largest subunit. We have generated stable murine cell lines expressing an alpha-amanitin-resistant form of the largest subunit of RNA polymerase II (RNA Pol II LS). These cells maintained transcriptional activity in the presence of alpha-amanitin, indicating that the exogenous protein was functional. We observed that over-expressed RNA Pol II LS was predominantly hypophosphorylated, soluble and accumulated in the cytoplasm in a CRM1-dependent manner. Our results further showed that the transcriptionally active form of RNA Pol II LS containing phosphoserine in position 2 of the CTD repeats was restricted to the nucleus and its levels remained remarkably constant. We propose that nucleo-cytoplasmic shuttling of RNA Pol II LS may provide a mechanism to control the pool of RNA polymerase subunits that is accessible for assembly of a functional enzyme in the nucleus.

Esta tese pretende desenvolver um percurso analítico e crítico através de um conjunto de obras de temática judaica do escritor brasileiro Moacyr Scliar, focando-se principalmente nas construções e desconstruções identitárias que advêm no processo imigratório. Moacyr Scliar dedicou-se durante sua vida a uma prolífera carreira literária que abrange diferentes temáticas, bem como gêneros. Para atingir nosso objetivo selecionamos um corpus restrito, mas representativo de dez romances e, a partir de um estudo comparativo, pretendemos demonstrar como, por meio de uma escrita irónica, é possível fundar uma descrição histórica que visa manter uma memória cultural do povo judeu imigrante no âmbito da ficção brasileira contemporânea, de modo lúcido e original, suscitando o riso do leitor: um riso grave que leva à reflexão. De maneira complementar, pretendemos analisar o processo de assimilação ou de estranhamento cultural para verificar se é condicionado ou discriminado pela própria origem. Os romances analisados no presente trabalho são: A guerra no Bom Fim, O exército de um homem só, Os deuses de Raquel, O ciclo das águas, Os voluntários, A estranha nação de Rafael Mendes, Na noite do ventre, o diamante, Os leopardos de Kafka, A Majestade de Xingu e Eu vos abraço, milhões, ou seja, as obras que retratam o desconforto das personagens diante de situações que ferem a dignidade humana. Neles, a recriação paródica e irónica de eventos trágicos relevantes na história europeia ao longo dos séculos – como a Inquisição Ibérica, o tráfico de prostitutas e de seres humanos, o pogrom ou o nazismo – e eventos relevantes da História do Brasil, são procedimentos literários utilizados para filtrar a perspectiva histórica, propondo uma dessacralização, um distanciamento e uma distorção da história oficial. Scliar cria uma visão crítica dos fatos e do mundo, voltada para situações que desrespeitam os direitos prioritários da humanidade e sente a necessidade de expô-los ao leitor, cuja missão é refletir, sorrindo, sobre a tragicidade de tais eventos. As experiências da autocrítica judaica, da automutilação e da sabotagem dos próprios protagonistas são manifestações de humor e, simultaneamente, processo de diminuição de dor que eles vivem constantemente. Trata-se, portanto, de um humor crítico, ácido, usado com a intenção de agredir as duas sociedades, a de origem e a de chegada. Ao mesmo tempo, propor-nos-emos, também, uma reflexão acerca da importância da memória, particularmente presente nos relatos das personagens como meio para refletir sobre o passado, criando uma ligação especialmente afetiva com as próprias ascendências.

The European climate during the Holocene period is characterised by frequent changes of temperature and precipitation. The North Atlantic plays a major role as a driver for European climate and is a dominant precipitation source, particularly for the western European and north African realm. Atmospheric pressure gradients over the Atlantic (North Atlantic Oscillation, NAO), Atlantic circulation patterns (Atlantic Multidecadal Oscillation, AMO) or positioning of the Atlantic jet stream have been suggested to be responsible for precipitation patterns across western Europe. However, proxy data provide an inconsistent picture on how precipitation responds to changes in the Atlantic realm such as changes of Atlantic temperature (IRD), atmospheric pressure (NAO), water circulation (AMO) or the jet stream. Here we present a record of speleothem-based winter precipitation amount from Portugal. The record covers most of the Holocene and demonstrates that wetter conditions were synchronous in western and southern Iberia during early and mid Holocene. The record also shows a correlation between increased winter precipitation amount in western Iberia and Atlantic cooling, evidenced by Bond events, between 10 and 4 ka.

O presente trabalho tem como objetivo investigar a aquisição de elipse de VP (VPE) por parte de falantes nativos de chinês mandarim (CM) que aprendem o português europeu (PE) como língua segunda. As condições de legitimação de VPE são diferentes em PE e em CM. Os verbos principais não legitimam VPE em CM, o que significa que a estrutura que Goldberg (2005) designa V-stranding VP ellipsis não existe em CM. No entanto, em CM, a construção de objeto nulo (NOC) é superficialmente idêntica a V-stranding VPE em PE. Depois de Huang (1994a, b) propor que em CM há movimento de V para v, Li (2002) e Cheung (2008) baseiam-se nesta proposta e propõem que, em CM, NOC é um caso de elipse do VP enquanto VPE é um caso de elipse do vP. Em VPE, todos os modificadores adverbiais são recuperados, enquanto em NOC, segundo Li (2002), assumimos que em CM os modificadores adverbiais temporais e locativos são recuperados, mas os de modo e causa não. Neste trabalho, adotámos a Tarefa de Juízo de Valor de Verdade como método para aferir a aquisição dos aprendentes chineses do PE como L2, testando a recuperação do modificador adverbial de tempo e de modo em VPE no PE. O resultado do teste mostra que os aprendentes chineses têm, como esperado, maior dificuldade na recuperação de um modificador adverbial de modo quando a elipse é legitimada por um verbo principal, embora essa dificuldade seja esbatida muito cedo, mesmo entre falantes no grupo B2. Segundo a Hipótese de Transferência Completa e Acesso Completo ( Schwartz & Sprouse, 1994, 1996) e a Hipótese de Reconfiguração de Traços (Lardiere, 2007, 2008, 2009), assumimos que a gramática de L1 dos falantes de CM tem efeitos relevantes na aquisição do PE como L2 e os participantes chineses têm, consequentemente, dificuldade na reconfiguração dos traços associados à legitimação da V-stranding VPE em PE, podendo tratar a V-stranding VPE do PE como um caso de estrutura equivalente a NOC em CM. Contudo, mostramos também que a gramática dos falantes de CM converge rapidamente com a gramática alvo no que diz respeito à elipse de VP, o que relacionamos com a rápida aquisição de movimento generalizado do verbo para T em PE.

O presente trabalho visa perceber qual o papel dos valores temporo-aspetuais na distribuição dos dois principais operadores de negação oracional – bu 不 e mei(you) 没（有）– em chinês mandarim (CM), fazendo uma análise contrastiva com o português europeu (PE), em que os dois operadores negativos correspondem tipicamente apenas a um elemento adverbial – não. Assume-se que o entendimento desta interação entre tempo e negação pode ajudar na tradução entre não em PE e estes operadores chineses. Para atingir este objetivo, são feitas (i) uma análise contrastiva de alguns subsistemas de valores temporo-aspetuais e aspetos principais de negação oracional em PE e CM e (ii) uma discussão sistemática da interação entre a distribuição de bu/mei(you) e valores temporo-aspetuais, com base na literatura e em dados dos corpora. De forma não exatamente coincidente com estudos anteriores, o presente estudo defende que a distribuição de bu e mei(you) é determinada essencialmente por dois fatores principais – nomeadamente (i) a Aktionsart (mais especificamente o valor de homogeneidade total que distingue as predicações estativas das predicações de outras classes aspetuais) e (ii) a localização temporal relativa a pontos de perspetiva temporais (mais especificamente os valores de posterioridade, por oposição aos de não posterioridade, e de futuro não anterior, que alinha com os valores de posterioridade) – e descreve pormenorizadamente os mecanismos bifatoriais para estabelecer uma equivalência entre não e bu/mei(you) em casos diferentes. Segundo se descreve, o valor de homogeneidade total parece determinar se a descrição de uma situação coocorre sempre com bu ([+ HOMOGENEIDADE TOTAL]) ou permite a ocorrência de bu ou mei(you) ([– HOMOGENEIDADE TOTAL]) em função de valores de localização temporal. Neste último caso, os valores de anterioridade e sobreposição não futura parecem determinar o uso de mei(you), enquanto os valores de posterioridade e de futuro não anterior parecem determinar o uso de bu.

O meu relatório de estágio reflete sobre a influência da implementação dos Leilões online na Cabral Moncada Leilões, e como toda essa gestão de negócio reconfigurou o dia a dia de trabalho na leiloeira em comparação com o tipo de gestão anterior, que era mais conservador e menos abrangente que o atual. Este relatório terá como base o período em que estagiei na Cabral Moncada, que se estendeu entre Fevereiro e Março de 2020, tendo completado as horas requeridas com o apoio da instituição, devido à Pandemia da COVID 19. O relatório irá centrar-se nas tarefas por mim desempenhadas na empresa, que envolveram a interação diária com a base de dados da Cabral Moncada, onde inseria dados específicos sobre peças que eram , por norma, catalogadas para leilões online, as suas respetivas fotografias, a verificação dos lotes e recontratados, e também do acompanhamento em avaliações, com o Luís Costa Brandão, que resultavam numa ida a casa dos clientes, na dita avaliação das peças artísticas que dispunham e com o dito inserção das informações , tanto do cliente, como da peça, na base de dados da empresa. Irei apresentar dados de contextualização, que expliquem a dita instituição, a sua organização e estrutura profissional, tal como uma análise sucinta sobre a base de dados que é fulcral para o bom funcionamento da empresa. O ponto principal do relatório irá focar-se, como referido em cima, na influência que a introdução dos leilões online teve sobre a gestão diária da empresa, reconfigurando por si só, as abordagens e contactos com os clientes e possíveis clientes . Irei analisar e comparar os processos entre o pré e pós Leilões online, com o intuito de justificar a necessidade que os dias de hoje acarretam sobre uma maior abordagem online, o que se traduz numa maior rede de contactos e possíveis negócios. Este tópico do relatório, irá servir também, invariavelmente, para que eu exponha a minha opinião detalhada e critica sobre os Leilões online, sempre com o intuito de sugerir possíveis melhorias na abordagem do negócio e comparações com outras leiloeiras.

A presente dissertação debruça-se sobre a aquisição de estruturas clivadas do português europeu (PE) por aprendentes que têm chinês mandarim (CM) como L1 e inglês como L2. Foi realizado um estudo experimental, com base numa tarefa de juízo de aceitabilidade, sobre a aquisição das seguintes estruturas em PE: clivadas de é que, clivadas canónicas, semipseudoclivadas e pseudoclivadas; foi ainda testada uma estrutura superficialmente idêntica à clivada canónica mas sem C preenchido, agramatical em PE. As questões de investigação que guiaram o presente trabalho são: (i) que diferenças estruturais apresentam as clivadas do PE e as do CM? (ii) as diferenças sintáticas levantam obstáculos à aquisição de clivadas do PE por sujeitos que têm o CM como L1? (iii) em caso afirmativo, os alunos podem superar os obstáculos potenciais? (iv) que tipo de clivadas do PE colocam mais dificuldade na aquisição por falantes L1-CM? (v) outras línguas previamente adquiridas pelos alunos influenciarão a aquisição destas estruturas do PE? Têm sido avançadas propostas diversificadas da sintaxe das estruturas clivadas em PE. Discutindo se todos tipos de clivadas têm por base uma estrutura sintática idêntica, as análises sintáticas prévias dividem-se em dois tipos: análises unificadas (Ambar, 1999; Costa e Duarte, 2001, 2005) e análises não-unificadas (Lobo, 2006; Soares, 2006). No tocante à aquisição da linguagem, atestou-se uma escala de emergência e diferente frequência de diferentes estratégias de clivagem (Lobo, Santos e Soares-Jesel, 2016), o que forneceu argumentos para a análise não-unificada. Em linha com Lobo (2006), Soares (2006) e Lobo, Santos e Soares-Jesel (2016), assume-se que: i) as clivadas canónicas envolvem movimento do constituinte clivado para uma posição periférica associada a um traço [+foco] na oração encaixada; ii) uma estrutura mono-oracional é proposta para as clivadas de é que, em que esta expressão lexicaliza uma categoria funcional na periferia esquerda da frase, a que se associa um traço [+foco]; iii) as pseudoclivadas são estruturas identificacionais em que o verbo “ser” seleciona uma Oração Pequena composta por uma oração clivada que é semelhante a uma relativa livre e um constituinte focalizado externo à oração tipo CP; iv) nas semipseudoclivadas, o verbo “ser”, reanalisado como um marcador de foco contrastivo, marca a fronteira da periferia esquerda de vP, e o constituinte clivado está in situ, sob escopo do marcador de foco. No que respeita à aquisição de língua não materna, prediz-se que o desenvolvimento da gramática das diferentes estruturas clivadas de aprendentes não ocorre de forma homogénea. Para as estruturas clivadas do CM, comparando as diferentes análises (Huang, 1988, 1998; Simpson e Wu, 2002; Cheng, 2008; Paul e Whitman, 2008; Hole, 2011, etc.), propomos que: i) as pseudoclivadas do CM e do PE partilham na base uma estrutura sintática semelhante, i.e. uma estrutura identificacional; ii) nas clivadas de shì simples, está envolvido foco prosódico, não sendo a posição de focalização associada à periferia esquerda ou a uma projeção de foco interna; iii) nas clivadas shì...de, à luz de Belletti (2004), o traço [+foco] é associado a uma projeção abaixo de vP, FocP, para a qual sobe o sujeito ou adjunto clivado, e o objeto, quando recebe o foco, fica na posição final de frase, de acordo com a Regra do Acento Nuclear (Nuclear Stress Rule), em linha com Cinque (1993). É de notar que, no CM, o objeto não pode ser clivado nas clivadas de shì simples ou nas clivadas shì V O de, ao contrário do que acontece com sujeito. Em suma, o facto de o português dispor de categorias que marcam foco contrastivo e a associação do traço [+foco] a diferentes categorias funcionais nas duas línguas determinam as diferenças entre as clivadas do CM e a sua contrapartida portuguesa. No que diz respeito à aquisição de língua não materna (ALNM), dado que estes aprendentes geralmente adquiriram inglês como L2 antes do PE, levou-se também em consideração a influência potencial da L2 inglês. À luz da Hipótese de Reconfiguração de Traços (Lardiere, 2008, 2009), assume-se que, para adquirir as estruturas clivadas do PE, um aprendente L1-CM teria de desassociar o traço [+ foco] do Foc0 baixo no CM e associá-lo a categorias diferentes, mais especificamente, uma categoria funcional na periferia esquerda nas clivadas de é-que e nas clivadas canónicas; nas semipseudoclivadas, deve ser associado ao verbo “ser” na fronteira da periferia esquerda de vP; nas pseudoclivadas, assume-se que a configuração do PE é idêntica à do CM, e nesse caso, o simples mapeamento dos traços na L1 e na L2 poderá assegurar a aquisição da gramática-alvo, pelo que não se espera que haja problemas para os aprendentes. No entanto, considera-se também que a aquisição de clivadas canónicas pode ser facilitada pela L2 inglês, conforme predizem os modelos da aquisição de L3 como o Modelo da Melhoria Cumulativa (MMC, e.g., Flynn et al. 2004) e o Modelo de Primazia Tipológica (MPT, e.g., Rothman, 2011). Para testar a aceitação, pelos falantes de L3, de diferentes estruturas clivadas do PE, foram aplicadas duas tarefas de juízo de aceitabilidade, um teste centrado em diferentes clivadas de sujeito e objeto (de é que, canónicas, estruturas superficialmente idênticas às clivadas canónicas sem C preenchido, semipseudoclivadas e pseudoclivadas), e outro centrado na concordância sujeito-verbo em clivadas com sujeito plural. Foi usada uma escala de Likert com quatro pontos. Os testes foram aplicados a três grupos de falantes do CM (N = 60), subdivididos por nível de proficiência (B1-23; B2-20; C1-17), e a um grupo de controlo de 21 falantes nativos do PE. Adicionalmente, foram aplicados dois testes centrados em clivadas do inglês para examinar a transferência eventual da L2. A observação global dos resultados mostra que os aprendentes não rejeitam clivadas de objeto. As clivadas canónicas de sujeito e objeto são aceites pelos participantes independentemente da sua proficiência, seguidas pelas pseudoclivadas. Ao contrário, as clivadas de é que de sujeito parecem problemáticas para os grupos dos níveis intermédios por contraste com o grupo de controlo; no caso das clivadas de é que de objeto, ainda que os aprendentes em geral rejeitassem a estrutura, a surpreendente baixa aceitação por parte do grupo de controlo torna a comparação mais complexa. As estruturas sem C preenchido e as semipseudoclivadas foram uniformemente rejeitadas por todos os aprendentes. Quanto às questões de concordância, analisadas no teste 2, a aceitação de clivadas canónicas sem concordância é sobretudo observada no grupo do nível mais baixo testado, B1. Contudo, a aceitação de pseudoclivadas com concordância não esperada é persistente em todos os níveis, sendo também atestada no grupo de controlo, embora de forma reduzida. Assim, embora os falantes aceitem no teste 1 as clivadas canónicas e pseudoclivadas, não adquiriram completamente a gramática-alvo. Os resultados apresentados não questionam um possível efeito facilitador da L2, esperado de acordo com modelos como o MMC ou o MPT, uma vez que não se atesta rejeição generalizada de clivadas de objeto nem aceitação de C vazio em clivadas, o que implica que a associação do traço [+foco] à periferia esquerda está adquirida. No caso das clivadas de é que e das semipseudoclivadas, explorámos a hipótese de que a dificuldade dos falantes possa ser associar um traço [+foco] à expressão é que e a “ser” nas semipseudoclivadas. Quanto à concordância em pseudoclivadas e em clivadas canónicas, a persistência dos problemas pode sugerir uma influência da concordância semântica. O presente estudo realizou uma análise comparativa da sintaxe das estruturas clivadas do PE e do CM, e evidenciou uma escala de dificuldade na aquisição de L3 de estruturas clivadas do PE por falantes de L1-CM: clivadas canónicas > pseudoclivadas > clivadas de é-que > semipseudoclivadas. Não obstante, as estruturas sintáticas dos vários tipos de estruturas clivadas do PE, CM e inglês e a natureza de tais estruturas na interface sintaxe-discurso requerem uma análise mais aprofundada. A sensibilidade mostrada pelos falantes nativos aos diferentes padrões de clivadas e às diferentes funções sintáticas dos constituintes clivados também despertou a nossa atenção e pode levar a uma investigação mais aprofundada. Além de testar clivadas de sujeito e de objeto, mais testes poderão ser conduzidos sobre a clivagem de outros constituintes com diversas funções sintáticas. Os contrastes nas respostas dos falantes nativos e dos aprendentes no trabalho experimental deixam questões em aberto. Por exemplo, na área do processamento linguístico, seria interessante averiguar se os falantes nativos e os falantes L2 avançados processam certas estruturas distintamente. No que diz respeito a questões mais gerais no âmbito dos estudos em ALNM, embora não seja o objetivo deste estudo corroborar nenhum modelo de SLA, estudos futuros poderiam concentrar-se em discernir os potenciais efeitos de L1 ou/e de L2 na aquisição de L3 da sintaxe do PE.

The white‐clawed crayfish (Austropotamobius pallipes) is globally endangered due to the impacts of habitat modification and fragmentation, water pollution, climate change, and invasive species, particularly the signal crayfish (Pacifastacus leniusculus). These pressures have caused the decline of A. pallipes populations in Europe, demonstrating the importance of predicting the species' potential distribution under current and future conditions. Focusing on the watercourses of mainland France, we aimed to identify suitable areas for A. pallipes to guide the conservation of current populations and future introduction actions or protection measures. 2. We applied ecological niche modelling to model the potential distribution of both A. pallipes and P. leniusculus and identified locations suitable for A. pallipes only. We also assessed the potential distribution of the species under two representative concentration pathway (RCP) scenarios: RCP 2.6 and RCP 8.5, respectively describing low‐warming and high‐warming conditions. 3. We found that A. pallipes and P. leniusculus exploit equivalent niches in France. Despite this, under current conditions, about 5% of the study area simultaneously records a high suitability for A. pallipes and a low suitability for P. leniusculus and is therefore of significant conservation interest. This percentage remains relatively stable under RCP 2.6 for 2050 and 2100, but decreases to 2% under RCP 8.5 for 2100. 4. Ecological niche modelling can supply crucial guidance for conservation actions aimed at protecting endangered species at a national scale by identifying sites most suitable for protection and sites where climate change and invasive species constitute a threat.

Emerging pollutants such as pharmaceuticals are continuously released to aquatic environments posing a rising threat to marine ecosystems. Yet, monitoring routines and ecotoxicity data on biota worldwide for these substances are lacking. Non-steroidal anti-inflammatory drugs are among the most prescribed and found pharmaceuticals in aquatic environments. The toxicity effects of environmentally relevant concentrations of ibuprofen on primary productivity, oxidative stress and lipid metabolism of the diatom Phaeodactylum tricornutum were assessed. Diatom cultures were exposed to 0, 0.8, 3, 40, 100 and 300 μg L-1 ibuprofen concentrations, usually found in the vicinity of wastewater treatment plants and coastal environments. Higher concentrations (100 and 300 μg L-1) had a negative impact in P. triconutum growth, inhibiting the chloroplastic energy transduction in the electron transport chain resulting in lower energy reaching the PS I (r2 = -0.55, p < 0.05). In contrast, the mitochondrial electron transport and available energy increased (r2 = 0.68 and r2 = 0.85, p < 0.05 respectively), mostly due to enhancements in lipid and protein contents as opposed to reduction of carbohydrates. A general up-regulation of the antioxidant enzymes could contributed to alleviate oxidative stress resulting in the decrease of lipid peroxidation products (r2 = 0.77, p < 0.05). Canonical analysis of principal components was performed and successfully discriminated exposure groups, with optical data excelling in classifying samples to different ibuprofen concentrations, being potentially used as environmental indicators. Finally, the identified mild to severe effects of ibuprofen on diatoms are likely to be exacerbated by the sustained use of this drug worldwide, underpinning the urgency of evaluating the impacts of this pharmaceutical on coastal and marine trophic webs.

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Angelman syndrome (AS) is a rare neurodevelopmental disorder with no cure, characterized by a severe developmental delay, speech impairment, motor dysfunction, and a characteristic happy behavior. AS is caused by the loss of functional UBE3A protein, an E3 ubiquitin ligase that targets proteins for degradation by the ubiquitin-proteasome system. Disruption of UBE3A activity in neurons impairs ubiquitination leading to accumulation of UBE3A-specific targets which results in neuronal dysfunction. The UBE3A gene undergoes tissue-specific genomic imprinting, an epigenetic phenomenon that leads to parent-of-origin-specific monoallelic expression. Thus, UBE3A is exclusively expressed from the maternally inherited allele in mature neurons, since the paternal allele is silenced upon neuronal differentiation due to transcriptional interference of an antisense RNA called UBE3A-ATS. Loss of maternal UBE3A allele results in complete absence of UBE3A protein ultimately leading to AS. Most of what we know about AS has been studied in animal models, however, this pre-clinical model has several limitations for direct translation to the human disease. Recently, somatic cell reprogramming technology and neuronal differentiation protocols have contributed to overcome such difficulty and establish in vitro models using patient-derived induced pluripotent stem cells (iPSCs). These models enable the generation of disease-relevant cells in limitless amounts while faithfully recapitulating neuronal developmental hallmarks, which allows the detailed elucidation of the disease mechanisms responsible for the clinical features observed in patients. In this project, we submitted healthy control and AS-derived iPSCs to a neuronal differentiation protocol for 80 days to obtain fully mature neurons. Our data suggest AS-derived neuronal cultures display increased neuronal apoptosis, enhanced gliogenesis and persistence or progenitor-like neural rosettes at the final stages of differentiation. We hypothesize that loss of UBE3A function impairs neuronal viability and consequently prompts neural progenitors to continue proliferating and differentiating, causing a precocious neuro-to-glia switch. Our results show the suitability of patient-derived iPSCs to be used as a disease modelling approach to study Angelman syndrome and future works will use this system to tackle the pathophysiological mechanisms at the molecular level that causes AS.

Um dos avanços médicos de maior sucesso na história da medicina moderna é, sem dúvida, a vacinação, que tem contribuído enormemente para a saúde humana e animal nos últimos 200 anos. No entanto, ainda enfrentamos muitas doenças para as quais nenhuma vacina eficaz ou segura pôde ser desenvolvida. A compreensão de como o sistema imunitário pode ser modulado para um tipo específico de resposta e como desenvolver estratégias imunomoduladoras para direcionar a localização específica de linfócitos são desafios atuais em imunologia. A conjugação de antigénios com ligandos de recetores de reconhecimento de padrões (PRR) é uma estratégia promissora para a modulação da imunidade específica e o TLR2 tem emergido como um recetor-chave para a indução de imunidade na mucosa. Nos últimos anos, o nosso grupo de investigação desenvolveu um sistema de clonagem em Escherichia coli para produzir antigénios em fusão com um ligando de TLR2, a lipoproteína OprI. Neste projeto, investigámos se a ativação TLR2 em células dendríticas (DCs) por OprI, sozinha ou combinada com outros estímulos, pode ser usada para determinar o tropismo de imunidade específica para a mucosa. A capacidade que as DCs de mucosa apresentam para induzir a localização de linfócitos na mucosa intestinal resulta da sua capacidade em converter vitamina A em ácido retinóico. Este processo depende da atividade de enzimas aldeído desidrogenase (ALDH), as quais são expressas em níveis baixos nas DCs extra-mucosa. Por PCR quantitativo em tempo real, observámos que a OprI induz a expressão de Aldh1a2 em DCs que não são de mucosa e mostramos, através de ensaios de Aldefluor, que esta expressão se traduz numa atividade ALDH funcional. Demonstramos ainda, através da co-cultura ex vivo de DCs de baço de ratinhos C57BL/6 com células T CD4+ específicas para ovalbumina (OVA) obtidas de ratinhos OT-II RAG2-/-, que a estimulação de células dendríticas com OprI converte de forma efetiva a vitamina A num sinal que imprime nas células T ativadas os recetores de tropismo para mucosa CCR9 e α4β7. Quando usada como adjuvante, a lipoproteína OprI induz um perfil Th misto e experiências preliminares desenvolvidas pelo nosso grupo mostraram que a sua associação com MPLA (um ligando de TLR4) é uma estratégia promissora para ativar DCs com potencial polarizador Th1. Através da estimulação ex vivo de DCs de baço de ratinho e de co-cultura com células OT-II, podemos confirmar, por ELISA de IFN-γ, o favorecimento de uma polarização Th1 induzido pela combinação de OprI com MPLA. Mais importante, os ensaios de Aldefluor e a avaliação por citometria de fluxo da expressão superficial dos recetores CCR9 e α4β7 nas células OT-II em co-cultura mostram que a OprI, quando combinada com MPLA, não perde a capacidade de equipar as DCs com propriedades indutoras de respostas de mucosa. Os nossos resultados evidenciam a OprI como um adjuvante promissor para indução de respos tas imunitárias na mucosa intestinal desencadeadas por inoculação parentérica. Estas descobertas poderão contribuir para o desenvolvimento de vacinas mais eficazes contra agentes patogénicos que utilizam a mucosa intestinal como porta-de-entrada no organismo.

The flower thrips Frankliniella occidentalis (Pergande), the leaf-dwelling thrips Echinothrips americanus Morgan and the most recent thrips invader Thrips setosus Moulton are currently amongst the most concerning pests in Dutch greenhouses. Although F. occidentalis is now successfully controlled by generalist predators of the genus Orius in vegetable crops, E. americanus and T. setosus still lack an efficient biological control agent, especially in ornamental crops where these pests are particularly problematic. In the first part of this study, we evaluated the predation capacity, predation behaviour, prey preference and life history traits of the two commercial anthocorid predators, Orius laevigatus (Fieber) and Orius majusculus (Reuter) on these key pests, in laboratory trials at 25 °C. Female adults of O. laevigatus and O. majusculus fed on 18 and 20 F. occidentalis adults, 30 and 42 E. americanus adults and 36 and 38 T. setosus adults per day, respectively. Complementarily, we observed that F. occidentalis showed a very agile behaviour in contrast to the low mobility levels observed for T. setosus and E. americanus. This suggests that prey’s mobility was one of the factors influencing the predation capacity of Orius. All development and reproductive parameters were more favourable on the prey E. americanus, including intrinsic rates of increase, averaging 0.1662 and 0.1538 females/female/day for O. laevigatus and O. majusculus, respectively. Additionally, slightly superior fecundities and longevities were scored by O. laevigatus in comparison to O. majusculus. Overall O. laevigatus reared on E. americanus had the best performance with values of fecundity (169 eggs/female), longevity (23.6 days for females) and intrinsic rate of increase, approaching what has previously been reported on the high-quality prey Ephestia kuehniella Zeller eggs. Contrastingly, O. majusculus reared on F. occidentalis registered an inferior performance with the lowest intrinsic rate of increase (0.1320). Regarding the second part of the study, we investigated the effects of supplemental foods on life history traits of T. setosus. This species has been recently introduced in Europe and little is known about its biology. We found that the addition of E. kuehniella eggs, Artemia franciscana Kellogg cysts, pollen or honey to a bean leaf did not influence the oviposition rate or longevity of T. setosus females. We thus conclude that these common commercial foods can be used to benefit populations of natural enemies without the risk of at the same time increasing densities of T. setosus. So far, this species have not shown omnivorous habits. Additionally, based on progeny production of unmated adult females we conclude that T. setosus reproduces through haplodiploid arrhenotoky (unfertilized eggs produce haploid males and fertilized eggs produce diploid females). Altogether our findings add to the understanding of the reproductive biology and feeding habits of this unstudied species. Furthermore, we show evidence of the potential of O. laevigatus and O. majusculus as biological control agents of F. occidentalis, E. americanus and T. setosus. Particularly, we discuss E. americanus as a high-quality prey for Orius.

Confronted with the centrality of the body for trans-masculine individuals interviewed in the United Kingdom and Portugal, we explore how bodily-reflexive practices are central for doing masculinity. Following Connell’s early insight that bodies needed to come back to the political and sociological agendas, we propose that bodily-reflexive practice is a concept suited to account for the production of trans-masculinities. Although multiple, the journeys of trans-masculine individuals demonstrate how bodily experiences shape and redefine masculinities in ways that illuminate the nexus between bodies, embodiments, and discursive enactments of masculinity. Rather than oppositions between bodily conformity to and transgression of the norms of hegemonic masculinity, often encountered in idealizations of the medicalized transsexual against the genderqueer rebel, lived bodily experiences shape masculinities beyond linear oppositions. Tensions between natural and technological, material and discursive, or feminine and masculine were keys for understanding trans-masculine narratives about the body, embodiment, and identity.

Em todo o mundo, são diagnosticados anualmente 1.8 milhões de casos de cancro colorretal, uma doença consideravelmente heterogénea e em muitos casos fatal. Este tipo de cancro divide-se em vários subgrupos sendo que um deles se caracteriza pela instabilidade de microssatélites, localização do tumor no cólon proximal, pólipos com morfologia serreada, metilação frequente de ilhas CpG, mutações no gene BRAF e sobreexpressão de RAC1B. A expressão de RAC1B resulta de um processo de splicing alternativo do gene RAC1, uma pequena GTPase com um papel importante no controlo de várias vias de sinalização celular. A existência de vários locais de splicing nos pré-mRNAs permite a existência de processos de splicing alternativo para além do constitutivo, ou seja, a partir do mesmo mRNA percursor, diferentes exões ou intrões podem ser incluídos ou excluídos do mRNA final, levando, por exemplo, à produção de diferentes isoformas de determinada proteína. Este mecanismo envolve as sequências consenso que são reconhecidas pela maquinaria de splicing, mas também a ação de proteínas trans que interagem com elementos cis presentes no RNA, atuando como repressoras ou ativadoras para os diversos tipos de splicing alternativo. A variante RAC1B resulta da inclusão de um exão alternativo no mRNA maduro do gene RAC1. Este denomina-se exão 3b, possui 57 nucleótidos que se traduzem em 19 aminoácidos adicionais na proteína resultante, e confere a esta variante diferentes propriedades relativamente a sinalização celular. A regulação da proteína RAC1 é feita através de vários fatores que modulam o seu estado de ativação pela ligação a GTP ou GDP e que, consequentemente, afetam a sua localização e atividade. Sabe-se que a regulação de RAC1B é semelhante, mas esta isoforma tem uma menor afinidade para GDP, menor capacidade de hidrolisar GTP e incapacidade para interagir com inibidores de dissociação de GDP, o que resulta numa predominância desta proteína nas células na sua forma ativa. Apesar de o processo de splicing alternativo ser comum a todas as células, a sua desregulação está muitas vezes associada ao desenvolvimento de doenças. A sobreexpressão de RAC1B, para além de associada a este subtipo de cancro colorretal onde promove a sobrevivência das células tumorais e a sua progressão no ciclo celular, foi também identificada em cancro pancreático, da mama, do pulmão e da tiroide. Esta proteína poderá então ser um alvo terapêutico para o tratamento de pacientes com algumas formas de cancro, o que enaltece a importância do estudo da sua regulação nas células humanas. Tendo em conta que os processos de splicing são modulados por diferentes proteínas, é importante identificar e descrever aquelas que influenciam a expressão de RAC1B neste contexto. Os fatores SRSF1 e SRSF3 foram previamente descritos na literatura como moduladores do splicing de RAC1B em cancro colorretal, uma vez que SRSF1 promove a inclusão do exão 3b e SRSF3 promove a sua exclusão. Foram também identificadas regiões no pré-mRNA do gene RAC1 que são necessárias à ligação destes fatores, o que permitiu conhecer melhor os mecanismos de regulação deste processo. Mais recentemente, várias outras proteínas têm sido descritas como sobreexpressas em diferentes tipos de cancro, bem como capazes de influenciar a expressão de RAC1B em vários tipos de células. Para este trabalho as proteínas RANBP2, PTBP1, ESRP1, DIS3L2 e hnRNP U foram selecionadas como objeto de estudo, sendo o primeiro objetivo deste trabalho a descrição da sua influência na inclusão ou exclusão do exão 3b de RAC1 em células colorretais. Com esta finalidade, procedeu-se a experiências de sobreexpressão destas proteínas, mas também à depleção da sua expressão endógena em duas linhas celulares colorretais, uma não tumorigénica (NCM460) e uma maligna com sobreexpressão de RAC1B (HT29). Os efeitos das referidas experiências foram verificados através de RT-PCR e Western blot, quantificando-se a expressão de RAC1B relativamente à expressão de RAC1 em cada uma das condições. A depleção da nucleoporina RANBP2 levou a um aumento da expressão de RAC1B relativamente a RAC1 em células NCM460, tanto ao nível do RNA como da proteína, tendo-se verificado também este aumento em células HT29, mas apenas em relação a expressão proteica. Estes resultados indicam que a RANBP2 provavelmente atua como inibidora da inclusão do exão 3b em RAC1. Contudo, não foi possível confirmar estas observações através das experiências de sobreexpressão, visto que esta não teve efeitos significativos na expressão de RAC1B, excetuando em NCM460 onde levou a um aumento ao nível da proteína, o que contradiz os resultados acima descritos. A sobreexpressão dos quatro fatores de splicing em estudo não permitiu retirar conclusões acerca do seu efeito na inclusão ou exclusão do exão 3b no mRNA maduro do gene RAC1, contudo as experiências de depleção tiveram maior sucesso. Relativamente a PTBP1, a sua depleção provocou uma diminuição da expressão de RAC1B relativamente a RAC1 em ambas as linhas celulares utilizadas, detetável tanto por RT-PCR como por Western blot, indicando que esta proteína atua como promotora da inclusão do exão 3b de RAC1. Para o fator de splicing ESRP1, após depleção em células NCM460 houve também diminuição dos níveis de RAC1B relativamente a RAC1 ao nível do transcrito. Tanto ao nível da proteína em NCM460, como nas mesmas experiências em HT29, os resultados obtidos mostraram seguir a tendência de diminuição da inclusão do exão 3b, contudo, não foram considerados estatisticamente significativos. Concluiu-se então que este fator possivelmente também atua como promotor de RAC1B. Em relação a DIS3L2, em NCM460, apesar de os resultados não serem estatisticamente significativos, verifica-se uma tendência para a diminuição da expressão de RAC1B, enquanto que em HT29 há um aumento significativo da expressão desta variante ao nível da proteína, sendo que ao nível do transcrito, apesar de haver uma variação menor, se confirma esta tendência. Neste caso, a DIS3L2 parece promover a inclusão do exão alternativo 3b em células NCM460, mas inibi-lo em células HT29. Finalmente, a depleção de hnRNP U levou a uma diminuição da expressão de RAC1B relativamente a RAC1 em ambas as linhas celulares, não sendo estatisticamente significativo apenas o resultado ao nível da proteína em NCM460, indicando que hnRNP U atua como promotor da expressão de RAC1B. O segundo objetivo deste trabalho consistia na identificação de locais de ligação dos fatores PTBP1 e ESRP1 ao pré-mRNA do gene RAC1. Para isto, procedeu-se à mutagénese de dois possíveis locais de ligação da proteína ESRP1, previamente descritos na literatura, num minigene contendo a região entre os exões 3 e 4 do gene em questão. A mutação dos locais pretendidos no intrão 3b do minigene foi confirmada através de sequenciação do DNA, mas não foi possível proceder à subclonagem dos fragmentos mutados no minigene original, de modo a prevenir a introdução de mutações indesejadas. No futuro deve proceder-se da mesma forma na introdução de mutações em possíveis locais de ligação do fator PTBP1, e poderá sequenciar-se os plasmídeos mutados, como estratégia alternativa à subclonagem, sendo que cada minigene mutado pode depois ser transfetado juntamente com o fator em estudo, ESRP1 ou PTBP1, de modo a investigar se a expressão de RAC1B nas células se altera em relação à transfeção de um minigene não mutado juntamente com o mesmo fator. Concluindo, com este trabalho foi possível demonstrar que as proteínas RANBP2, PTBP1, ESRP1, DIS3L2 e hnRNP U estão envolvidas na regulação do splicing alternativo de RAC1 em células colorretais. Resultados preliminares indicam que RANBP2 inibe a inclusão do exão 3b em RAC1, enquanto que PTBP1, ESRP1 e hnRNP U promovem a sua inclusão. Relativamente ao fator de splicing DIS3L2, parece ter diferentes efeitos dependendo da linha celular utilizada, podendo promover ou inibir a expressão de RAC1B. Estudos futuros deverão ser realizados, de modo a consolidar estes resultados, esclarecer as vias moleculares através das quais a nucleoporina RANBP2 afeta a expressão de RAC1B e definir locais de ligação dos fatores de splicing em estudo, no pré-mRNA do gene RAC1. Estes conhecimentos poderão ser úteis para o desenvolvimento de novas terapias para pacientes com este subtipo de cancro colorretal, que inibam especificamente as vias que afetam a inclusão do exão 3b, de modo a restaurar a normalidade da sinalização celular.

Drawing on a qualitative study on migrant men recently arrived in Portugal, this paper examines how the experience of migration leads to the rebuilding of masculinity. The experiences of discrimination and strategies of resistance are linked to the history of Portuguese colonialism and the ways men hailing from contrasting colonial and postcolonial geographies within the Portuguese Empire (Brazil, Mozambique and Cape Verde) discover their subordination in the Portuguese context. We advance two central ideas. Firstly, we engage in an active historicisation of transnationalism and defend the postcolonial character of migrant masculinities. Rather than neutral or a-historical, transnational experiences of migration are better interpreted through the lens of specific histories of colonialism and postcolonialism. Secondly, while recognising the centrality of the hegemonic model of masculinity, we argue that the conceptualisation of masculinity as a complex structure of material and symbolic capitals permits to avoid one-dimensional accounts of subordination and dominance. Furthermore, the notion of capital is helpful for tying together the micro-enactments of masculinity and the macro-historical dynamics of colonialism and postcolonialism. Expanding the notion of postcolonial masculinities implies working with renewed tools suited for analysing how subordination is perpetuated through colonial devaluation or contested via the mobilisation of certain capitals.

Dada a crescente complexificação das organizações educativas e, consequentemente, dos seus sistemas de informação, verifica-se a necessidade de encontrar uma resposta que permita assegurar uma política de informação cujos procedimentos, relacionados também com a criação dos documentos enquadradores, passam pela tomada de decisão sobre os custos da implementação da política definida e a melhor adequação às necessidades presentes e futuras da organização, preservando autenticidade, integridade, fidedignidade, inteligibilidade e usabilidade da informação criada ou gerida, considerando-se uma visão integrada do Sistema de Informação. A formulação da questão de investigação: De que forma o sistema de informação do Agrupamento de Escolas de Mem Martins (AEMM) pode acrescentar valor organizacional? fundamenta a definição dos objetivos que suportam o propósito deste estudo. Por um lado, como primeiro objetivo visa-se proceder à caracterização da unidade orgânica e, no momento sequencial, avaliar o contributo do sistema de informação para a valoração organizacional no contexto da modernização administrativa da unidade orgânica e unidades educativas que a integram. As questões contempladas são abordadas de modo sistémico, de acordo com uma análise crítica e reflexiva sobre o Sistema de Informação do AEMM, justificando a opção pelo método do estudo de caso (de modo a permitirá a confirmação das hipóteses formuladas sustentada na reunião de evidências e tratamento dos dados) complementado pelo enquadramento teórico baseado em diferentes abordagens de sistemas e de organizações (estudo orgânico-funcional), com a análise dos fluxos de informação, gestão documental e, com o fim último, do contributo para a definição da política de informação (e das subsequentes dimensões), que venha a ser mais um auxiliar para a melhoria na prestação de serviço informacional da organização. A apropriação do enquadramento teórico é acompanhada pela análise de documentos que fazem o respetivo enquadramento normativo produzido por entidades públicas, organismos e tutela na área da Educação com o objetivo de criar um instrumento de trabalho passível de ser aplicado posteriormente em casos que se detetem insuficiências na definição e/ou concretização de cada um dos níveis de execução anteriormente enunciados. Com a realização do presente estudo procura-se, dar um contributo para potenciar a eficácia e eficiência na gestão de um Sistema de Informação, que se verifica não estar formalmente organizado, suportado numa Gestão Documental que progressivamente introduza procedimentos que proporcionem a modernização dos serviços e a valorização de ambas as dimensões (eficácia e eficiência) para a constante melhoria no atendimento às necessidades dos clientes (alunos, encarregados de educação e, comunidade educativa), nomeadamente através da implementação de processos de negócio na gestão documental.