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A perda de sensibilidade na zona da pinça do primeiro e segundo dedos causa um importante deficit funcional com grande impacto na qualidade de vida do doente e capacidade de trabalho manual. As transferências nervosas sensitivas cada vez mais são utilizadas para “re-inervar” a face volar destes dedos, com resultados variáveis. Visando a otimização dos resultados e redução do tempo de reinervação, levantou-se a hipótese de se efetuar uma transferência do Ramo Superficial do Nervo Radial (RSNR) para os ramos sensitivos terminais do nervo mediano, distalmente na mão. Para verificar a compatibilidade entre os referidos nervos, foi levado a cabo um estudo de disseção e microdissecção detalhado dos ramos terminais do RSNR – SR1, SR2 e SR3, de dorsal para volar - num membro superior (amostra reduzida devido aos constrangimentos da pandemia COVID-19) e foram colhidas secções nervosas para análise histomorfométrica. A distância entre o Processo Estiloide do Rádio (PER) e o ponto de emergência do RSNR foi de 90 mm (42% do comprimento do antebraço) e entre o PER e a primeira divisão do RSNR de 69 mm (32% do comprimento do antebraço). Entre o PER e as bifurcações do tronco comum SR1-SR2 e do ramo SR2 foram medidos 0 e 20 mm (9% do comprimento da mão), respetivamente. As distâncias entre o PER e os ramos SR1, SR2 e SR3 foram de 0, 0 e 12 mm, respetivamente. As distâncias medidas entre o eixo do segundo osso metacárpico e os ramos SR1 e SR2 no ponto medio-diafisário foram de 1,9 e -3,3 mm. Não foi possível proceder à análise histomorfométrica. Devido ao reduzido tamanho da amostra, não é possível confirmar a exequibilidade da transferência nervosa no nível proposto, tomando como base as caraterísticas anatómicas e histomorfométricas dos nervos em questão.

O presente artigo de revisão pretende sensibilizar os profissionais de saúde, para que equacionem a Tuberculose (TB) laríngea nos seus diagnósticos diferenciais e, assim, possam prevenir o contágio e morbilidade associados ao frequente atraso diagnóstico e terapêutico. A TB laríngea é uma doença infecciosa, causada pelo Mycobacterium tuberculosis, muito rara, mas que tem vindo a aumentar de incidência. As suas características epidemiológicas e clínicas modificaram-se muito ao longo do século XX, graças à implementação dos antibacilares. Deste modo, um vasto número de médicos, hoje em dia, não está devidamente familiarizado com a sua nova forma de apresentação e o nível de sensibilidade para com esta entidade é reduzido. Os fatores de risco para esta doença são semelhantes aos da TB pulmonar. A clínica atual assenta, sobretudo, em alterações locais: disfonia com várias semanas de evolução e lesões laríngeas inespecíficas e variáveis na laringoscopia. O diagnóstico é, muitas vezes, difícil e requer um elevado grau de suspeição. O erro diagnóstico mais comum deve-se à semelhança clínica e endoscópica entre a TB laríngea e o carcinoma da laringe. Alguns exames complementares de diagnóstico, caso positivos, são uma boa ferramenta para direcionar o diagnóstico, nomeadamente testes imunológicos, radiografia simples de tórax e análises laboratoriais à expetoração. Um resultado negativo destes exames não exclui o diagnóstico. O diagnóstico é confirmado através da avaliação histopatológica das lesões laríngeas, sendo fundamental a biópsia das mesmas por via laringoscópica. O relatório anatomopatológico permite, ainda, excluir etiologia maligna. O tratamento é idêntico ao da TB pulmonar com habitual remissão completa do quadro, após terapêutica com antibacilares. Mais estudos e com maiores amostras devem ser feitos, de modo a caracterizar, mais fidedignamente, o padrão clínico desta entidade.

The disordered output from the basal ganglia to the pontine tegmentum nuclei is considered responsible for a number of abnormalities in brainstem reflexes in patients with Parkinson's disease. One of the most conspicuous of these abnormalities is the reduced inhibition of the blink reflex by a prepulse stimulus. The circuit of prepulse inhibition involves structures and fibre groups that can be reached by stimuli applied through the electrodes implanted in the subthalamic nucleus for deep brain stimulation (STNDBS). In seven Parkinson's disease patients we examined whether single STNDBS induced prepulse effects on the blink reflex and how they compared with the effects induced by single auditory and somatosensory stimuli. Prepulse inhibition was determined by measuring the percentage inhibition induced in the R2 component of the orbicularis oculi response to supraorbital nerve stimuli. The inter-stimuli intervals (ISI) between the prepulse and the supraorbital nerve stimuli were 0 to 30 ms and 100 ms for single STNDBS and 100 ms for auditory and somatosensory modalities. The results obtained with acoustic and somatosensory stimuli were compared with those obtained from a group of 20 age-matched healthy subjects. Single STNDBS induced significant inhibition of the R2 in all patients at ISIs between 10 and 30 ms, with a mean percentage inhibition of 94% at the ISI of 30 ms. On the contrary, significant inhibition by auditory or somatosensory stimuli was induced in only two out of the seven patients. The mean percentage inhibition at the ISI of 100 ms was 37% for auditory and 40% for somatosensory stimuli, well below reference limits for prepulse inhibition in control subjects (61%). Single STNDBS induces significant prepulse inhibition of the blink reflex in Parkinson's disease patients who have abnormally reduced auditory and somatosensory prepulse effects. This finding helps define the prepulse circuit in humans and the eventual site of its dysfunction in Parkinson's disease.

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Adenosine and gamma-aminobutyric acid (GABA) are both major inhibitory neuromodulators/neurotransmitters in the CNS. We now investigated if endogenous GABA modulates adenosine A(1)-mediated action on synaptic transmission in the hippocampus. Field excitatory postsynaptic potentials (fEPSP) were recorded from the CA(1) area of rat hippocampal slices. The adenosine analogue 2-chloroadenosine (0.15-1 microM) inhibited synaptic transmission with an EC(50) of 398 nM. Blocking GABA(A) receptors with the specific antagonists, bicuculline (10 microM) or picrotoxin (10 microM) potentiated the inhibitory effect of 2-chloroadenosine. The concentration-response curve for 2-chloroadenosine was displaced to the left by a factor of 2 (EC(50)=210 nM) in the presence of bicuculline (10 microM). GABA(A) receptor blockade also potentiated the action of N(6)-cyclopentyladenosine (CPA, 10 nM), a specific adenosine A(1) receptor agonist. Prevention of adenosine accumulation with adenosine deaminase (1 U/ml) did not influence bicuculline-induced potentiation of the effect of 2-chloroadenosine. The potentiation of adenosine A(1)-mediated response by bicuculline was abolished when nitric oxide (NO) synthase was inhibited with nitroarginine (100 microM), and when guanylyl cyclase was inhibited with 1H-[1,2,4]Oxadiazolo[4,3-a] quinoxalin-1-one (ODQ, 20 microM). The NO donors, (+/-)-S-nitroso-N-acetylpencillamine (SNAP, 300 microM) and diethylamine NONate diethylammonium salt (DEA/NO, 100 microM), significantly enhanced the inhibitory action of 2-chloroadenosine (150 nM). It is concluded that the blockade of GABA(A) receptors induces a potentiation of adenosine A(1) receptor-mediated inhibitory action, an effect that involves NO acting through guanylyl cyclase. Therefore, endogenous GABA might exert an inhibitory effect over adenosine A(1)-mediated responses in the hippocampus, which may represent a physiologic regulatory mechanism between the two inhibitory mediators.

Objective: To assess trends of food intake in Portugal. Design: Analysis of three cross-sectional studies: 1987, 1995-1996 and 1998-1999. Setting: Representative samples of free-living individuals. Subjects: 64 734 men and 71 282 women. Interventions: Food intake was assessed by questionnaires inquiring the number of meals and which foodstuffs (fish, meat, milk, rice/pasta/potatoes, soup, vegetables and fruit) had been consumed the day before. Results: Age-adjusted average number of meals decreased from 3.3+/-0.1 in 1987 to 2.9+/-0.1 in 1998-1999 in both genders (P<0.001). In men, the percentage of subjects consuming meat, milk and potatoes/rice/pasta increased from 73, 66 and 91% in 1987 to 83, 74 and 95% in 1998-1999, respectively. The percentage of subjects consuming soup and fish decreased from 70 and 56% in 1987 to 62 and 53% in 1998-1999, respectively. In women, the percentage of subjects consuming meat, milk, potatoes/rice/pasta and vegetable increased from 70, 66, 89 and 71% in 1987 to 78, 77, 93 and 83% in 1998-1999, respectively. The percentage of subjects consuming soup and fish decreased from 70 and 55% in 1987 to 64 and 53% in 1998-1999, respectively. These trends were more pronounced in the younger age, which also displayed a higher frequency of snacking. Multivariate analysis adjusting for age group, region and educational level showed that the consumption of meat, milk and vegetables increased and the consumption of soup, fish and fruit decreased in 1998-1999 relative to 1995-1996. Conclusions: Within a decade, the Portuguese dietary pattern has changed considerably, shifting from a traditional, south European to a more Westernized, protein-rich diet.

Grapevine is one of the most important fruit crops worldwide. In 2019, over 7.4 million hectares of the world cultivated area were dedicated to viticulture, resulting in the production of 77.8 million tonnes of grapes (International Organisation of Vine and Wine, 2020 report). However, the cultivated species Vitis vinifera L., widely used for berry and wine production, is highly susceptible to the pathogenic oomycete Plasmopara viticola (Berk. & M.A. Curtis) Berl. & De Toni, the causal agent of the grapevine downy mildew disease. This disease is one of the most devastating causing up to 75% of grape loss in one season and important economic losses. Nowadays, the method used to control P. viticola relies on multiple applications of chemical fungicides which have a negative impact on the environment as they accumulate in the soil and water. In Europe alone, 68 thousand tonnes of fungicides were used in 2003, but recently the European Union has established a goal to lower the usage of such chemicals in viticulture. Therefore, there is a need to develop new and more sustainable strategies to control downy mildew disease. The use of beneficial microorganisms with biocontrol capabilities, such as the arbuscular mycorrhizal fungi (AMF), has been pointed out as a viable alternative. With this study we intended to investigate the effect of AMF colonization on the expression of P. viticola effectors during infection of grapevine. Grapevine plants (V. vinifera cv Cabernet Sauvignon) were inoculated with the mycorrhizal fungus Rhizophagus irregularis and root AMF colonization rate and plant growth were assessed. The percentage of root colonization was 10% and mycorrhizal grapevine plants showed a significantly higher shoot biomass compared to non-mycorrhizal plants. Four months post-mycorrhizal inoculation, plants were infected with the pathogen P. viticola. Pathogenicity effectors genes belonging to the RxLR group were analysed and their expression was investigated during the first hours of infection using quantitative real time PCR analysis. Results showed that mycorrhizal inoculation altered the expression of several P. viticola effectors, namely PvRxLR28 and PvRxLR67 that presented an expression decrease in mycorrhizal plants at the two time points post-infection tested, and PvRxLR18 and PvAVH52 that presented an expression increase. These results suggest that the pre-inoculation of grapevine with AMF may interfere with pathogen capabilities to infect the plant by pathogenicity effectors expression modulation. These results further support the hypothesis that AMF can be used to promote more sustainable agriculture, particularly viticulture, practices.

As fibras de celulose regenerada, materiais seminaturais que constituem uma alternativa sustentável às fibras de base petroquímica, são produtos com estruturas celulares e propriedades gerais que propiciam uma enorme variabilidade de aplicações a nível funcional e tecnológico. A Caima - Indústria de Celulose, S.A., fundada em 1888, dedica-se à produção de pasta solúvel a partir do cozimento ao sulfito da madeira da espécie folhosa Eucalyptus globulus, seguido de uma sequência de branqueamento totalmente livre de cloro – TCF (Total Chlorine Free). Atualmente, a Caima fornece pasta solúvel maioritariamente para produtores têxteis de viscose localizados na Ásia. Porém, a necessidade de resposta a uma constante evolução socioeconómica, tecnológica e ambiental impõe uma abertura a novos mercados, nomeadamente ao fornecimento de pasta solúvel para produção de Lyocell. A importância deste produto prende-se, por um lado, pelo facto das fibras de Lyocell possuírem excelentes propriedades estéticas, mecânicas e de conforto, dando origem a uma enorme diversificação de aplicações, e, por outro, do processo Lyocell utilizar produtos químicos não tóxicos e envolver níveis de emissões de poluentes e de consumo de água substancialmente reduzidos. Este trabalho pretende avaliar uma pasta solúvel da Caima (CmL) para a produção de fibras Lyocell. Com esse fim, foi desenvolvido um estudo de comparação entre esta pasta e cinco pastas benchmarking, realizado por três vias: caracterização laboratorial, dissolução em sistema aquoso de NMMO (N-óxido de N-metilmorfolina) e análise por microscopia ótica. Verificou-se, através de ensaios de caracterização laboratorial, que a pasta CmL tem um índice de viscosidade limite de 464 mL·g-1, um teor de α-celulose de 92,8%, um conteúdo de 2,2% de pentosanas e um teor de 0,07% de cinzas. Estes resultados são profícuos para o objetivo em questão. Os valores obtidos de brancura (91,3%), de resistência alcalina com NaOH a 10 e a 18% (90,1 e 95,5%) e de teor de matéria solúvel em acetona (0,151%), são igualmente indicativos de uma pasta que cumpre os objetivos, podendo ainda assim ser alvo de otimização. No que se refere aos parâmetros de micro-Kappa (indicativo da extensão de deslenhificação), número de cobre (indicativo do número de grupos carbonilo) e teores de cálcio e cinzas insolúveis em ácido, encontram-se todos fora do que se consideram critérios adequados tendo em conta o estudo comparativo com as pastas benchmarking, devendo por isso ser reduzidos. O comportamento da pasta CmL em sistema aquoso de NMMO foi idêntico ao das restantes pastas em estudo, sendo que, microscopicamente, foi possível observar fibras de celulose não dissolvidas, fibras em processo de dissolução parcial ou incompleta, mas também fibras em dissolução por fragmentação, fibras em início de dissolução por fenómeno de swelling por ballooning e fibras dissolvidas após rebentamento de balões formados no fenómeno de swelling por ballooning. Resumidamente, pode concluir-se que, apesar de haver margem para otimização de algumas caraterísticas desta pasta da Caima, a mesma tem um bom potencial para aplicação à produção de fibras Lyocell.

As invasões biológicas são amplamente reconhecidas como uma das principais causas da perda de biodiversidade. A resposta mais eficiente e económica para o controlo de espécies invasoras é a erradicação enquanto o número de indivíduos é limitado. Deste modo, é possível prevenir possíveis impactos e evitar os custos de repetição do controlo. No entanto, apresenta um desafio duplo: em primeiro lugar, é difícil reduzir uma população até à erradicação e em segundo, devido à deteção ser imperfeita, é difícil saber se esta foi alcançada. Os riscos de assumir erroneamente o sucesso podem ser altos: a população pode recuperar e tornar a tentativa de erradicação inútil ou pode mesmo escapar da área delimitada. A deteção de espécies invasoras em baixas densidades é, portanto, um aspeto importante para o sucesso de um programa de erradicação. A deteção e a gestão de espécies e comunidades em habitats aquáticos podem ser facilitadas por novas técnicas moleculares. O ADN ambiental (eDNA) é baseado na amplificação de fragmentos de ADN provenientes da pele, pelo, muco ou gâmetas libertados por organismos na água, solo ou ar. Este método não invasivo tem sido aplicado em programas de gestão e erradicação de espécies invasoras de vários taxa, nomeadamente, em anfíbios. As invasões biológicas por anfíbios têm sido, principalmente, não intencionais em todo o mundo e ao longo da história humana, mas têm vindo a aumentar nos últimos anos. Atualmente, a nível global, as populações de anfíbios estão a diminuir e as espécies de anfíbios invasores são parcialmente causadoras destes declínios através de competição, hibridização e introdução de novos organismos patogénicos. Xenopus laevis é um anfíbio nativo da região afro-tropical e a sua distribuição abrange biomas temperados e subtropicais. Esta espécie ocupa, principalmente, águas estagnadas ou de corrente fraca numa variedade de corpos de água naturais e artificiais. Xenopus laevis tem sido usado mundialmente em laboratórios para testes de gravidez e como modelo em estudos de fisiologia e biologia do desenvolvimento. Deste modo, foi introduzida em vários países e populações invasoras estabeleceram-se na Ásia, América do Sul, América do Norte e Europa. Esta espécie possui um conjunto notável de características que a tornam uma invasora muito eficaz: longevidade; capacidade de colonizar uma variedade de ambientes aquáticos; migrações terrestres; alta tolerância à água salgada e condições anóxicas; capacidade de sobreviver à seca enterrando-se; sobreviver sem alimento até 12 meses; a sua reprodução permite o rápido aumento das populações locais. Os seus principais impactos são a transmissão de doenças, com petição e predação de espécies nativas. Houve algumas tentativas de erradicação de populações de X. laevis em vários países, mas a maioria não foi bem-sucedida. A erradicação desta espécie em regiões de clima mediterrânico é mais difícil e atualmente apenas uma operação de gestão e controlo está em vigor. Em Portugal, a espécie foi detetada pela primeira vez em março de 2006 na ribeira da Laje e em fevereiro de 2008 na ribeira de Barcarena, em ambos os casos no concelho de Oeiras. Embora grande parte do país seja climaticamente adequado para X. laevis, pensa-se que a sua distribuição foi limitada às duas ribeiras por quase 40 anos, tornando esta população uma candidata ideal para um programa de erradicação. Assim, desde 2010, os cursos de água e outros habitats em risco de invasão, quase exclusivamente no concelho de Oeiras, estão a ser monitorizados e a remoção desta rã está em curso. Após dez anos de ações de controlo, X. laevis está restrita às áreas a montante das bacias da Laje e Barcarena. A redução da distribuição da espécie e a sua baixa abundância em ambas as ribeiras sugerem eficácia das ações de controlo, embora a erradicação total ainda não tenha sido alcançada. Nesta fase do programa de erradicação, a identificação dos últimos locais onde X. laevis ainda existe é essencial para remoção de todos os espécimes e, consequentemente, uma erradicação bem-sucedida. Assim, este projeto surge da necessidade de comprovar o sucesso das intervenções e ações de controlo do programa de erradicação. Os principais objetivos deste estudo foram identificar os últimos locais onde X. laevis ainda está presente e verificar se o ADN ambiental é uma ferramenta viável para avaliar o sucesso do programa de erradicação de X. laevis em Portugal. Este estudo tem também objetivos secundários: comparar o sucesso das intervenções em habitats lóticos e lênticos com base nos resultados do eDNA; verificar a influência do micro-habitat lótico (pegos ou rápidos) na deteção e concentração de eDNA; avaliar como algumas variáveis ambientais e o histórico de invasão de cada local podem afetar a quantidade de eDNA recolhido. Foram amostrados quinze locais, maioritariamente, no concelho de Oeiras e alguns nos concelhos de Sintra e Cascais. Os locais foram escolhidos de acordo com dois critérios: a importância para a avaliação do programa de erradicação de X. laevis em Portugal e o tipo de habitat aquático. Para a análise de ADN ambiental em cada local, foi bombeada água (100 a 1850 mL) através de filtros de 0.45 µm usando uma bomba peristáltica. Foram também realizados controlos negativos ao filtrar 100 mL de água engarrafada. Após a filtragem, foram recolhidas as seguintes variáveis: temperatura, salinidade, pH, profundidade e velocidade da corrente no ponto de amostragem. Cada local foi também amostrado usando pesca elétrica em dois momentos distintos: após a recolha de água e, mais tarde, já informado pelos resultados obtidos com o ADN ambiental, durante a campanha de erradicação de 2020. As análises laboratoriais foram realizadas no CIBIO-InBIO, Campus de Vairão (Porto, Portugal). A extração do ADN dos filtros foi realizada seguindo um protocolo previamente testado. A técnica de PCR quantitativa em Tempo Real (qPCR) foi utilizada para a amplificação do ADN, seguindo um protocolo e primers já testados com sucesso para detetar ADN ambiental de X. laevis. A especificidade dos primers foi validada no contexto português realizando esta análise com ADN de todas as espécies potencialmente simpátricas de anfíbios. Foram também realizados controlos negativos durante a extração do ADN e qPCR. Dos quinze locais amostrados, cinco tiveram resultados positivos para o ADN ambiental de X. laevis: quatro locais lóticos e um local lêntico. O sucesso das ações de erradicação foi confirmado principalmente em habitas lênticos, mas também foram identificados 3 casos de insucesso. Num desses últimos locais uma amostragem posterior com pesca elétrica confirmou a presença de girinos, uma indicação da importância do ADN ambiental para a identificação dos últimos locais onde a espécie está presente. A deteção e a concentração de ADN ambiental de X. laevis não diferiram entre pegos e rápidos, mas variaram com outros fatores históricos (a abundância da espécie no local entre 2014 e 2019). A velocidade da corrente e a salinidade foram as variáveis que melhor explicaram a concentração de ADN ambiental de X. laevis obtido nos locais positivos. Os nossos resultados corroboram os estudos que recomendam a utilização do ADN ambiental como uma amostragem complementar a outros métodos tradicionais, assim como os que indicam a sua particular adequação na deteção de anfíbios invasores. São listados alguns dos locais onde deverão ser intensificadas as futuras ações de controlo. Para o sucesso do programa de controlo e erradicação de X. laevis em Portugal é importante aumentar a colaboração entre os Concelhos que abrangem as bacias das ribeiras da Laje e de Barcarena.

Parkinson’s Disease (PD) is the second most common neurodegenerative disorder. It is typically known for its motor features like bradykinesia and tremors. However, non-motor symptoms are also present in the disease such as constipation, hyposmia and depression. The principal hallmark of PD is the accumulation and aggregation of alpha-synuclein (aSyn) in the brain, triggering dopaminergic neuronal death. 90% of PD cases are of sporadic origin, and the molecular events that trigger the disease are still unknown. Currently, there is no effective therapeutics able to stop or delay the progression of this disease. Therefore, there is an unmet urgent medical need to identify novel therapeutic avenues that can modulate disease progression. The evaluation of how PD risk factors have an impact in the disease may allow for a better understanding of the molecular events underlying disease onset and progression. Notably, type II diabetes mellitus (T2DM) has been considered an important risk factor for PD. In fact, T2DM patients between 25-45 years old present 380% higher risk of developing PD. Insulin-degrading enzyme (IDE), which is typically known for the proteolytic degradation of insulin, is highly dysregulated in T2DM. It is a multifunctional enzyme, also playing heat-shock responses including chaperone and ubiquitin-activating enzyme activities. Recently, IDE was determined to interact with aSyn and suppress its aggregation in vitro in a non-proteolytic manner, and that IDE and aSyn levels are inversely correlated in human β-cells. Provided that the levels of IDE are decreased in T2DM patients’ pancreas, where aSyn is more oligomerized, it is important to understand if an IDE loss of function also occurs in the brain and if it has an impact in PD pathogenesis. Altogether, we hypothesize that IDE potentiation may protect from aSyn pathogenesis. To validate this hypothesis, we used H4 cells transfected with IDE WT or with a proteolytic inactive variant of IDE (E111Q) and evaluated their protective potential against aSyn cytotoxicity, accumulation and insolubility. A ~6-fold expression of IDE variants did not reduce cytotoxicity in both control cells (GFP) or aSyn expressing cells (aSyn+GFP). They also did not modulate aSyn levels, but both IDE variants were capable of reducing aSyn insolubility. For a lower expression level of the IDE variants, IDE WT but not E111Q was able to reduce the small toxicity induced by aSyn. To potentiate aSyn pathogenesis, we challenged cells to methylglyoxal. Both variants were able to decrease MGO-induced toxicity in both control and aSyn-expressing cells. In these conditions, IDE was not able to modulate both aSyn levels and insolubility. Our findings suggest that IDE may act as a chaperone or dead-end chaperone by suppressing amyloid formation, leading to a decrease on aSyn toxicity. Altogether, we conclude that IDE may play an important role in protecting against aSyn toxicity and aggregation in brain cellular models and it may represent a valid target able to modulate PD’s progression.

As Aquaporinas (AQPs) são uma família de 13 proteínas membranares, cuja principal função é promover o transporte passivo de água, através da célula, em resposta a gradientes osmóticos gerados pelo transporte ativo de solutos [1–3]. As AQPs podem ser divididas em dois grupos, de acordo com os materiais transportados: aquelas que transportam exclusivamente água, que é o caso do nosso objeto de estudo APQ - subtipo 1; e aquelas que para além de água podem transportar pequenos solutos, como por exemplo glicerol [4] - denominadas aquagliceroporinas. Estas proteínas, que possuem a capacidade de atravessar a membrana plasmática, apresentam uma estrutura na forma de um homotetrámero. Cada um dos monómeros inclui um vestíbulo extracelular e citoplasmático, que é conectado através de uma região central, anfipática, designada por poro, num arranjo em forma de barril [5]. Em contraste com a maioria dos canais iónicos, nas AQPs a região do poro não reside no eixo de simetria das quatro subunidades; em vez disso, cada um dos quatro monómeros contém o seu próprio poro [6]. Duas regiões do poro são essenciais para a função das AQPs: a região aromática-arginina, ou filtro de seletividade ar/R, e a região asparagina-prolina-alanina (Asn-Pro-Ala), ou motivo NPA [7]. Tanto o filtro de seletividade ar/R como o motivo NPA participam da exclusão de protões, uma vez que as cargas positivas dos seus resíduos ajudam a repelir a entrada destas partículas no poro da AQP. As AQPs são amplamente expressas em todo o reino animal e vegetal, estando localizadas na membrana plasmática e nos compartimentos citoplasmáticos, particularmente em tipos de células envolvidas no transporte de fluidos. Foi já comprovado que as AQPs desempenham papéis cruciais no desenvolvimento biológico de tumores, estando incluídas na sua histologia, proliferação, migração, angiogénese, e edema associado [8]. Esta correlação é devida ao facto de as AQPs serem sobre expressas nestes tecidos, em comparação com tecidos ditos normais. Consequentemente, as AQPs podem funcionar como potenciais alvos diagnósticos e terapêuticos no tratamento do cancro, uma vez que a sua inibição em células endoteliais e tumorais pode limitar o crescimento e a disseminação do tumor [2,4]. Infelizmente, a taxa de sucesso para a identificação de pequenas moléculas moduladoras de AQPs é muito baixa em comparação com outras proteínas membranares, e os poucos moduladores farmacológicos identificados carecem de especificidade ou acabam por revelar uma alta toxicidade [6]. Uma possível explicação para esta baixa “drogabilidade” é o reduzido tamanho do monómero funcional das AQPs e o pequeno diâmetro do seu poro. No entanto, o contínuo crescimento do conhecimento acerca da relação estrutura-função das AQPs, particularmente da geometria, a nível atómico, dos resíduos hidrofóbicos e hidrofílicos específicos da região dos poros, torna as AQPs um alvo terapêutico promissor para ser futuramente usado em campanhas de descoberta de novos fármacos [5]. Na sua vertente experimental, as campanhas de descoberta de fármacos são reconhecidas por serem muito demoradas, arriscadas, e caras [9]. Felizmente, com os constantes avanços na tecnologia e o aumento da compreensão dos princípios fundamentais das interações proteína-ligando, as etapas iniciais das campanhas de descoberta de fármacos estão agora mais focadas em previsões computacionais, nomeadamente abordagens baseadas no ligando (Ligand-based) e na estrutura (Structure-based). A abordagem baseada no ligando é um método fundamentado no conhecimento e informação, acerca de compostos ativos e inativos, relativamente a um alvo específico [10]. Este método indireto de desenvolvimento de novos fármacos baseia-se na compreensão da ligação de uma determinada molécula a um alvo de interesse. Essa molécula pode então ser usadas para derivar um modelo farmacóforo que determina as características estruturais mínimas indispensáveis que uma outra molécula deve reter para ser capaz de se ligar ao alvo em estudo [11]. O conceito baseado na estrutura é fundamentado na perceção da estrutura tridimensional do alvo biológico, obtida, por exemplo, através de métodos de cristalografia de raios-X [12]. Este método direto de desenvolvimento de fármacos é análogo ao screening de alto rendimento (HTS), onde o conheci mento da estrutura alvo e do ligando é imperativo [13]. Esta abordagem depende de uma filtragem automática de várias moléculas, na procura daquelas que evoquem a resposta biológica desejada. Uma das principais razões pelas quais os fármacos acabam por falhar nos ensaios clínicos é porque o efeito pretendido, no alvo desejado, não é produzido [14]. Desta forma, a identificação apropriada do alvo é uma etapa crucial no desenvolvimento de novos fármacos. Um bom alvo precisa de satisfazer vários critérios: ser eficaz; seguro; atender às necessidades clínicas e comerciais; e, acima de tudo, ser “drogável”. Um alvo “drogável” é acessível ao fármaco em teste e, após a sua ligação ao mesmo, evoca a resposta biológica desejada que é consistente tanto in vitro como in vivo [9]. Posteriormente ao processo de validação do alvo, os ensaios de screening de compostos são desenvolvidos durante a fase de identificação de hits [9]. Um composto pode ser descrito como um hit se mostrar a atividade desejada através de um screening do composto em questão, e se a sua atividade puder ser confirmada após um novo teste. Desta forma, os desafios significativos deste campo incluem a identificação de hits promissores e o desenvolvimento de leads de alta qualidade para um maior desenvolvimento em potenciais candidatos clínicos [10]. Infelizmente, ainda surgem vários desafios nesta área de estudo, incluindo os limites definidos pelas estruturas proteicas disponíveis, o reconhecimento de ligandos de referência para a proteína alvo, a identificação de resultados promissores, e o subsequente desenvolvi mento de compostos de alta qualidade, para melhorias adicionais, em candidatos clínicos. Dito isto, de forma a obter resultados satisfatórios e a superar estas limitações, novas e inovadoras abordagens e métodos computacionais devem ser desenvolvidos. Consequentemente, o trabalho apresentado nesta tese foi focado no desenvolvimento de um novo plano de trabalho computacional assente em vários métodos distintos que combinam abordagens inovadoras, baseadas no ligando e na estrutura, para identificar novos moduladores da AQP1. Na abordagem baseada no ligando, a identificação de novos moduladores da AQP1 foi realizada com base nas características químicas mais importantes descritas a partir de moduladores de AQPs já identificados. Essas mesmas características já foram previamente usadas em campanhas de screening virtual na procura de novos potenciais moduladores terapêuticos, mas com uma eficiência limitada. Para fortalecer a nossa triagem, aplicámos essa mesma abordagem a várias bases de dados, disponíveis comercialmente, para garantir a construção de uma base de dados global de compostos, com a mais ampla diversidade química possível. Juntamente com abordagens de screening virtual, uma combinação com Docking molecular permitiu a identificação de moduladores alternativos para a AQP1. Nesta abordagem, o foco foi na região dos poros da proteína, que é, até ao momento, a região mais importante e caracterizada como “drogável”. No entanto, e como abordagem alternativa, também foi feita a identificação de novas regiões sensíveis a influenciar a função da AQP1. Usando uma abordagem multiconformacional, com base em simulações de Dinâmica Molecular (MD) da AQP1, totalmente incorporada na bicamada fosfolipídica da membrana, tentámos identificar novas regiões-alvo na superfície da proteína. O uso de conformações adicionais de MD da proteína AQP1 é o que distingue o nosso trabalho de estudos previamente descritos nesta área de investigação, e o que nos dá uma vantagem na identificação de novos moduladores. Esta abordagem multi-conformacional foi seguida com o objetivo de encontrar as conformações mais prováveis para uso neste tipo de estudos, superando assim as limitações impostas por um sistema de proteína membranar com diferentes monómeros. Posteriormente, usámos estas regiões em novas campanhas de screening virtual, baseadas na estrutura, semelhantes ao que tem sido descrito anteriormente para a região dos poros. Após uma classificação de eficiência de ligação baseada na energia e caracterização estrutural obtidas a partir do screening baseado na estrutura, foi criada uma pequena lista dos moduladores mais promissores, para a AQP1. Esta lista foi então usada em novos ensaios de afinidade de ligação através de uma abordagem combinada de simulações de Dinâmica Molecular e cálculos MM/PBSA. Esta abordagem permitiu atribuir uma pontuação, e posterior classificação, mais precisas dos compostos mais eficientes que se ligam à AQP1, o que tornou possível a criação de uma pequena lista final de compostos cujo efeito sobre a função desta proteína será avaliado. Para garantir a validade dos resultados obtidos, todas as previsões computacionais realizadas terão, no futuro, a sua contrapartida experimental.

A fibrose quística é uma doença autossómica recessiva causada por mutações no gene que codifica a proteína CFTR, que é um canal iónico expresso em vários órgãos, com um grande espetro de sinais e sintomas. O tratamento tem sofrido alterações, passando de uma terapêutica sintomática para modificadora de doença. A terapêutica usada, lumacaftor-ivacaftor, consiste na combinação de um corretor com um potenciador, que permite aumentar a quantidade e função de CFTR na superfície celular, fornecendo uma melhoria da função pulmonar, da prova de suor e da evolução estaturo-ponderal. Estudou-se os efeitos deste fármaco em duas crianças com características semelhantes, apresentando resultados diferentes.

A Síndrome do Intestino Irritável é uma patologia intestinal funcional crónica com caráter debilitante e impacto individual, familiar e socioeconómico significativo. Estudos recentes demonstraram a importância do Stress no desenvolvimento da Síndrome do Intestino Irritável. O eixo hipotálamo-hipófise-suprarrenal possui um papel fundamental na génese desta patologia estabelecendo uma comunicação bidirecional entre o cérebro e o intestino. Este trabalho de revisão tem como objetivo analisar o papel do Stress na fisiopatologia e apresentação clínica da Síndrome do Intestino Irritável, esclarecendo os mecanismos pelos quais o eixo hipotálamo-hipófise-suprarrenal influi as manifestações clínicas e a evolução desta patologia. Estudos clínico e experimentais demonstraram o impacto que o stress tem na hipersensibilidade intestinal, na motilidade gastrointestinal, na permeabilidade da mucosa e secreção intestinal, assim como as alterações induzidas pelo stress no sistema nervoso central e autonómico e na microbiota intestinal. Os diferentes tipos de stress analisados neste trabalho, agudo ou crónico, ocorrido na infância ou já na vida adulta, têm influência e expressão diferentes na fisiopatologia e na apresentação clínica da Síndrome do Intestino Irritável. Uma melhor compreensão destes mecanismos é fundamental e conduzirá à descoberta de novos alvos terapêuticos e ao desenvolvimento de estratégias preventivas desta patologia.

Cross-national survey data shows that for a significant share of European citizens, corruption is acceptable. Notwithstanding the importance of prior knowledge on corruption extension and experience, research has made little progress in exploring why people condone it, especially in unsuspicious countries, with effective institutions and stable democratic rules and processes. The present study examines this gap in the literature by assessing the European Values Study (EVS) and the Special Eurobarometer (EB) attempts at measuring 'Tolerance towards Corruption' (TtC) in OECD countries in Europe during the same period (2017-2019). In the end, measurements proved to be constrained by the limited number of questions/items that try to capture TtC, which gave room to conclude that: (a) EVS and EB approaches do not measure the same TtC. The first measures it through social transgressions not exclusively related to corruption, while the second measures the willingness to accept a public-office corruption when dealing with the public sphere. (b) Lower ages combined with individual preferences/perceptions of less satisfaction with life, widespread corruption, and prior experiences with corruption proved to be more relevant to explain TtC, regardless of the country in which individuals were surveyed. (c) The type of TtC citizens display in advanced democracies proved to be mainly contingent on their age and on the way they interpret the extension of corruption and the prior contact they had with a public-office corruption in a given society.

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Esta tese avaliou suscetibilidade, exposição e vulnerabilidade aos ravinamentos na Cidade de Nacala em Moçambique. O levantamento das principais ocorrências permitiu a elaboração dum perfil de risco da cidade de Nacala. A análise da ocupação territorial conduziu a avaliação da exposição, e a vulnerabilidade social foi avaliada mediante a análise das caraterísticas da população em dois bairros amostrais. A avaliação da suscetibilidade aos ravinamentos foi baseada no método de Valor Informativo considerando o inventário completo das cabeceiras (modelo 1), metade das cabeceiras separadas em grupo A e grupo B e procedendo a validação independente cruzada (modelos 2 e 3) e o inventário completo de canais erosivos (modelo 4). O mapa de suscetibilidade final para a área de estudo (modelo 5) resulta da combinação da suscetibilidade à ocorrência de cabeceiras erosivas com a suscetibilidade de desenvolvimento de canais erosivos. A validação dos 4 modelos do Valor Informativo resultou em área abaixo das curvas de sucesso relativamente elevadas, entre 0,800 (modelo 4) e 0,851 (modelo 3). No entanto, a capacidade preditiva dos modelos validados de modo independente apresenta resultados mais modestos e mais realistas, avaliados pelas taxas de predição dos modelos 2 e 3 (0,663 e 0,777, respetivamente). A análise da relação entre a distribuição espacial das cabeceiras e ravinas na cidade de Nacala e dos seus fatores condicionantes mostrou que esta não é aleatória. O modelo 5 evidencia que os bairros mais antigos na envolvente do núcleo central da cidade são mais suscetíveis a erosão por ravinamento, em comparação com os bairros criados mais recentemente e considerados de expansão. O crescimento urbano recente da cidade de Nacala tem resultado num incremento da exposição, caracterizado pela ocupação de áreas perigosas para fins habitacionais. Este facto regista-se com mais incidência nos bairros mais antigos que envolvem o núcleo central da cidade, sendo menos marcado em bairros mais recentes. Por último, a análise comparada de dois bairros amostrais mostrou que as famílias com indicadores de vulnerabilidade social mais baixos residem no bairro com maior exposição ao risco de ravinamento, o que tenderá a agravar a sua condição de vulnerabilidade. Contudo, não é seguro que esta situação se verifique em toda a cidade de Nacala, sendo necessário o alargamento da análise aos restantes bairros da cidade, de modo a confirmar uma eventual segregação territorial, onde os mais vulneráveis social e economicamente ocupam as áreas mais perigosas do território na cidade de Nacala.

Objetivo: Determinar a taxa de incidência de morte súbita e inesperada na epilepsia (SUDEP) em doentes tratados com estimulação do nervo vago (VNS) e compará-la com a taxa descrita em outras populações de pacientes com epilepsia refratária. Métodos: Realizámos uma pesquisa sistemática das bases de dados PubMed MEDLINE e Cochrane Library com palavras-chave relacionadas com os termos SUDEP, VNS e epilepsy. Artigos que reportassem o seguimento clínico de doentes com VNS ou a ocorrência de SUDEP foram selecionados. Esta pesquisa gerou 29 estudos. A informação relevante de cada artigo foi extraída e agregada de forma a calcular a taxa de incidência combinada de SUDEP total, incluindo as definitivas, prováveis e possíveis, e a taxa de SUDEP definitiva/provável, usando um modelo de efeito randomizado com uma correção de continuidade de 0,25. Resultados: Um total de 289657,97 anos de doente, 3779 mortes e 673 eventos SUDEP (129 dos quais considerados definitivos ou prováveis) foram analisados. Uma taxa de incidência combinada de SUDEP total de 2,27/1000py (95% CI 2,10-2,44) foi calculada. A taxa de incidência combinada de SUDEP definitiva e provável foi de 0,37/1000py (95% CI 0,30-0,44), e de 1,27/1000py (95% CI 0,60-1,96) quando excluído o estudo mais heterogéneo. Conclusões: A incidência de SUDEP em doentes com epilepsia refratária tratados com VNS é inferior à de doentes com epilepsia refratária referenciados para cirurgia e semelhante à observada em outras abordagens de neuroestimulação para doentes com epilepsia refratária, como a estimulação cerebral profunda do núcleo anterior do tálamo ou neuroestimulação responsiva. A terapêutica com VNS deve ser considerada nestes doentes não só pela sua eficácia comprovada no controlo de crises, mas também pelo seu impacto na taxa de incidência de SUDEP.

S. Miguel is constituted by several volcanic structures, considering this island, in spite of its current quiescence, one of the most eruptive poles of the Atlantic. This is the fundamental characteristic from which other hazards, such as CO2 emission from fumaroles, volcanic and tectonic earthquakes as well as mass movements associated with both episodes of intense precipitation and seismic activity, were developed. An exploratory study was developed to evaluate the coexistence of populations with the stated risks. Using a methodology of measurement, the application of a survey to a population sample, it is verified the low perception of the volcanic risk, both by the populations and by the institutions and authorities in the communication of the risk. However, it is noted that the population surveyed seeming to underestimate this threat, as if the memory of previous eruptions constituted only a historical heritage and, at the same time, they have a high/average perception of the other risks associated, namely seismic and hydrological risks (this includes the consequences of intense precipitation, that is, mass movements). Also, it was noted that this survey relies differently on the authorities and institutions responsible for risk communication and risk management.

This article aims to analyse teachers’ perceptions of school failure and dropout through a gender perspective in the Portuguese context. The statistical data show that, in most OECD countries, the rates of school failure and dropout are higher for boys than for girls. In Portugal, the difference in the school failure and dropout rates for boys and girls is quite significant, and there is a considerable lack of research. This study used a mixed methods design with both quantitative and qualitative data collection. We used a questionnaire and interviews to explore the teachers’ perceptions of school failure and dropout through a gender perspective. The study was based on a performative model, which considers the construction of gender as a continuous and changing process as a result of social interaction in all spaces and at all times of life. We consider that school is a space where gender construction takes place, particularly in the relationships between pupils, and between pupils and teachers, which can have an impact on the pupils’ educational achievement. The data collected show that most teachers are not aware of gender differences in school failure and dropout. When confronted with the national statistics, the teachers do not recognise that the phenomenon is taking place in their schools. The teachers consider that gender differences in school failure and dropout result from personal and family factors, external to school and reveal gender stereotypes based on hegemonic masculinity.

O conjunto da terra sigillata do Sector C de Monte Molião (Lagos) é composto por produções itálicas, sudgálicas, hispânicas e africanas, onde se incluem vasos lisos e decorados. Um número muito diminuto apresenta marca de oleiro. Através da sua análise foi possível atestar que as primeiras importações itálicas surgem neste sector no reinado de Augusto, ainda que de forma pouco substancial. As importações sudgálicas são de longe as mais relevantes, tendo o seu início no reinado de Tibério. O seu apogeu, contudo, pode ser colocado na dinastia Flávia, época reconhecida como de grande prosperidade e desenvolvimento não só em Monte Molião, mas também na província da Lusitânia em geral. A hegemonia das produções sudgálicas sobre as hispânicas até ao final do século I é similar à observada nos outros centros de consumo algarvios, evidenciando a importância do abastecimento por via marítima. No entanto, a sua superioridade em relação às produções hispânicas e africanas até meados do século II é surpreendente, não espelhando o panorama regional.