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Abstract Aims: To identify environmental and anthropogenic drivers of alpha-and beta-diversity for native and alien plant species. Location: Río de la Plata grasslands, South America (Argentina, Brazil and Uruguay; 27.3–39.1° S, 50.1–66.5° W). Methods: We assembled a data set of 597 vegetation plots distributed across the Río de la Plata grasslands. To assess the drivers of native and alien alpha-diversity (species richness), we performed a generalized least-squares regression using environmental and anthropogenic predictors. We evaluated differences in beta-diversity using Simpson's pairwise dissimilarity between pairs of plots and used multiple regression on distance matrixes to investigate environmental and anthropogenic drivers on compositional dissimilarity for both native and alien plant species. Results: Native species richness was higher in sites with less demanding environmental conditions, such as lower precipitation seasonality and soils with higher cation exchange capacity. Numbers of alien species were positively related to soil pH, cropland density and road density and negatively to precipitation seasonality, mean temperatures and soil cation exchange capacity. The compositional dissimilarity was similar for native and alien species assemblages (mean ± SD: 0.64 ± 0.16 and 0.64 ± 0.35 respectively). Areas having similar climates and being geographically close shared more taxonomically similar assemblages, for both native and alien assemblages, while soil had disparate effects. Compositional dissimilarity of alien plants decreased with increasing road density. Conclusions: Our results highlight a grassland ecosystem where native species richness is still shaped only by environmental factors, but both sets of factors influence its composition. On the other hand, alien plants carry a strong signal of both environmental and human factors. As time progresses the number of alien species tend to increase, eroding the patterns of native biodiversity. To avoid this, efforts should be made to reduce road encroachment and the conversion of natural grasslands into croplands.

In Europe, regional climate change prospects indicate the urgency of adapting to extreme weather events. While increasing temperature trends have already been detected, in the last decades, the adoption of a European heatwave (HW) early-warning index is not yet consensual, partially due to the significant number of alternative algorithms, in some cases adjusted to the measurement of sector-specific impacts (as per the Expert Team on Climate Risk and Sector-specific Indices (ET-SCI)). In particular, the Excess Heat Factor (EHF) has been shown to accurately predict heat-related human health outcomes, in mid-latitude climates, provided that local summer exposure to excess heat is mostly driven by extreme air temperatures, with a lower contribution from relative humidity. Here, annual summaries of EHF-based HW detection were calculated for the European region, using daily maximum and minimum temperatures from the homogenised version of the E-OBS gridded dataset. Annual HW frequencies, duration, mean magnitude, maximum amplitude, and severity were subject to climatology and trend analysis across the European biogeographical regions, considering the 1961–1990 period as the baseline reference for anomaly detection in the more recent (1991–2018) decades. As HW-dependent morbidity/mortality affects mostly the elderly, an EHF-based HW Exposure Index was also calculated, by multiplying the recent probability of severe events per the number of people aged 65, or more, in the European Functional Urban Areas (FUAs). Results show that recent historical EHF-based patterns diverge across European Biogeographical regions, with a clear latitudinal gradient. Both the historical mean and recent trends point towards the greater exposure in the southern European Mediterranean region, driven by the significant increase of HW frequency, duration and maximum severity, especially in the last 3 decades; conversely, annual maximum EHF intensities (i.e., greatest deviations from the local 90th daily mean temperature) are mostly found in the northern and/or high altitude Boreal, Alpine and Continental regions, as a consequence of the latitudinal effect of local climatology on the HWM/HWA indices (this also translates into greater magnitudes of change, in this regions). Nonetheless, by simultaneously considering the probability of Severe HW occurrence in the last three decades, together with the log transformation of people aged 65 or more, results show that greater HW Exposure Indices affect FUAs across the whole Europe, irrespective of its regional climate, suggesting that more meaningful vulnerability assessments, early warning and adaptation measures should be prioritized accordingly.

The book provides a global perspective of local government response towards the COVID-19 pandemic through the analysis of a sample of countries in all continents. It examines the responses of local government, as well as the responses local government developed in articulation with other tiers of government and with civil society organizations, and explores the social, economic and policy impacts of the pandemic. The book offers an innovative contribution on the role of local government during the pandemic and discusses lessons for the future. The COVID-19 pandemic had a global impact on public health, in the well-being of citizens, in the economy, on civic life, in the provision of public services, and in the governance of cities and other human settlements, although in an uneven form across countries, cities and local communities. Cities and local governments have been acting decisively to apply the policy measures defined at national level to the specific local conditions. COVID-19 has exposed the inadequacy of the crisis response infrastructures and policies at both national and local levels in these countries as well as in many others across the world. But it also exposed much broader and deeper weaknesses that result from how societies are organized, namely the insecure life a substantial proportion of citizens have, as a result of economic and social policies followed in previous decades, which accentuated the impacts of the lockdown measures on employment, income, housing, among a myriad of other social dimensions. Besides the analysis of how governments, and local government, responded to the public health issues raised by the spread of the virus, the book deals also with the diversity of responses local governments have adopted and implemented in the countries, regions, cities and metropolitan areas. The analysis of these policy responses indicates that previously unthinkable policies can surprisingly be implemented at both national and local levels.

The chapter examines the role of Local Government, within the framework of the response to the COVID-19 pandemic in Portugal, during the first year of the pandemic. It addresses the following research questions: a) What was the impact of the COVID-19 pandemic in the local governance system, in central–local relations, and to what extent did Central Government decentralize the response to the pandemic and to its social and economic impacts in Portugal?; and b) What sort of policies were implemented to address the issues raised by the pandemic? Despite the constraints on the research process, due to the restrictions on the working conditions, the results presented in the chapter shed light on the role played by the Portuguese municipalities in the response to the COVID-19 pandemic and in the recovery plans.

O futebol tem uma forte ligação à sociedade portuguesa, sendo pertinente analisar as relações geográficas existentes entre os principais clubes formadores de jogadores em Portugal e o território nacional, para perceber as ligações entre território e clubes, alimentada através dos jovens jogadores que ingressam nos escalões de formação destas equipas. Este trabalho propõe-se a analisar a geografia da captação dos jovens jogadores de futebol, ao nível dos três principais clubes portugueses para perceber a sua origem, nos últimos 15 anos, recorrendo métodos de analise de redes e elipses de dispersão, na procura da existência de algum padrão.

Esta tese concentrar-se-á, de modo geral, numa série de problemas de interpretação que têm a ver com argumentos e modos de construir argumentos. Serão descritos trêsargumentos que foram consensuais, e hegemónicos, para a teoria literária do século XX. Estesargumentos serão questionados individualmente, e agrupados depois numa família deexplicações acerca da natureza da interpretação literária e, por inerência, da literatura. Seráproposto que esse ponto de vista é desadequado, e tentar-se-á demonstrar que existe uma alternativa mais útil.

O ser humano criou, ao longo da sua existência terrena, objectos tecnológicos que o ajudaram a sobreviver num mundo hostil. Alguns deles, as próteses, aumentaram ou substituíram capacidades naturais, formando parte do imaginário mitológico e artístico. Mas nunca o corpo foi tão forçado a abrir-se a objectos e ligações exteriores como na actualidade, após um desenvolvimento estrondoso da tecnologia. Neste âmbito, o presente trabalho procura analisar esta nova condição do corpo, ilustrando-a com a obra do artista Stelarc, que desenvolve projectos representativos da abordagem pós-humanista do ser humano.

O consenso entre modelos de adequabilidade para a presença do mosquito-tigre na Europa foi analisado, utilizando 7 modelos representando condições atuais e 5 com projeções climáticas futuras. A partir da harmonização e conversão dos resultados dos modelos, foram definidas três classes: elevada adequabilidade, baixa adequabilidade e incerteza, tendo em conta o número de modelos com nível de adequabilidade equivalente. A análise foi depois aplicada especificamente em 65 áreas urbanas. Atualmente, 47% do território apresenta elevada adequabilidade, em particular no sul e oeste. No futuro, estima-se uma expansão da adequabilidade elevada para a Europa central e do Norte, incluindo 83% das áreas urbanas analisadas.

A freguesia de Alvares foi gravemente afetada em 2017, tendo ardido cerca de 70% da sua área, tornando-se necessário melhorar a sua capacidade de resposta. Para isso, foram aplicadas duas metodologias: com recurso a ferramentas SIG (cost path e cost distance) e com o Pedestrian Evacuation Analyst Tool (PEAT). Comparando ambas as abordagens, a população em 47% das povoações demora menos de 20 minutos a chegar ao abrigo. Estes resultados demonstram que ambas as metodologias são facilmente replicáveis, contribuindo para a definição de medidas de prevenção e mitigação de incêndios mais adequadas às características locais.

Num contexto de sociedades reflexivas contemporâneas e intensamente marcadas pela difusão massiva das tecnologias digitais de informação e comunicação (TIC), este é um estudo sobre o quotidiano de mulheres na sociedade digital, em dois países do Sul da Europa (Portugal e Itália). Pretende-se descrever e compreender práticas e representações, em duas esferas de actividade (profissional, doméstica) de mulheres activas, entre os 25 e os 49 anos, com diferentes profissões e níveis de escolaridade, que vivem em conjugalidade e têm filhos. O trabalho de campo permitiu a construção de dois Grupos de mulheres para realização de entrevistas, com base no nível de escolaridade e no tipo de profissão: Grupo A – profissionais liberais-científicas e Grupo B – empregadas de serviços pessoais, comércio e escritório. Os estudos mais tradicionais focam o conceito da “conciliação” entre trabalho e vida privada das mulheres e os factores que as impedem de aceder a um real equilíbrio entre as diferentes actividades do seu quotidiano. Entretanto, a difusão massiva das tecnologias digitais vem perturbar categorias estabelecidas (por exemplo, entre esfera privada e esfera pública), pelo que trazer esta questão para a investigação permite enriquecer a abordagem com outras perspectivas. Assim, num cenário de desenvolvimento tecnológico dentro da família, torna-se interessante para a sociologia estudar o quotidiano das mulheres na sociedade digital. Como é que acedem e se apropriam das TIC no seu dia-a-dia? De que forma estas práticas esbatem as fronteiras público-privadas e perturbam o tradicional discurso sobre a “conciliação” entre vida privada e profissional? Que significados lhes atribuem? O uso das TIC facilita as actividades domésticas e os cuidados dos filhos? A presença das TIC no espaço doméstico suscita maior fragmentação ou maior agregação nas relações familiares? Eis algumas das questões a que queremos responder, contribuindo para o estudo do acesso e dos modos de utilização das TIC, por parte das mulheres, na sociedade contemporânea. Optou-se por uma metodologia qualitativa, através da realização de 44 entrevistas semi estruturadas, entre março e junho de 2017, a mulheres residentes nas áreas metropolitanas de Lisboa e Roma. O tratamento da informação é suportado pelo software MaxQda®. Na seção final, são ilustrados 4 perfis-tipo de mulheres portuguesas e italianas com base na relação que se estabelece entre práticas e representações das TIC no quotidiano.

The objective of this dissertation was to develop an algorithm that can determine the configuration of photovoltaic modules in a given area and which optimises annual energy production. For this purpose, geometric models were created that can determine the geometric parameters of the solar collector fields, shading parameters and the guidelines for the use of this algorithm. To test the functionality of this model, the algorithm was applied to three different terrains, thus entry criteria were modified for each terrain to assess the impact in the final result of the optimisation. Simulation results were also compared with the results obtained using the PvSyst 2.7.9 software. The results obtained show an enormous potential of the algorithm, in terms of both optimisation of the configuration as well as the algorithm serving as a tool for comparison. Therefore, many photovoltaic sizing software that exist in the market may benefit from such added functions. Throughout this dissertation various aspects were discussed, some of which were related to the limitations of the algorithm, while others looked at how to tackle the problem of optimisation. Due to the limitations of the algorithm presented in this dissertation, it can be concluded that it is best to apply the algorithm as a tool for geometric optimisation, rather than a tool to calculate the generated energy. For the latter purpose, it would be necessary to reformulate the shading criteria and to take into account the electric parameters within the modules and other componentes.

A difusão do novo coronavírus tem importantes associações com a mobilidade da população. Recorrendo a modelos de regressão linear múltipla, com informação epidemiológica da Direção-Geral da Saúde (DGS) e dados de mobilidade disponibilizados pela Google, captura-se a relação causal existente entre alterações na mobilidade e a tendência de incidência de COVID-19 para várias escalas em Portugal, demonstrando-se que maior mobilidade está associada a maior número de novos casos. Com base nesta premissa e recorrendo aos padrões de mobilidade da população é possível desenvolver um modelo de previsão do número de infeções futuras, com pelo menos 14 dias de antecedência.

Dementia is an overall term that describes a group of symptoms associated with a decline in memory or other thinking skills severe enough to reduce a person’s ability to perform everyday activities. Reminiscence therapy is used to counsel and support older people with dementia. It shows results in an initial stage and is a treatment that tries to use all five senses — sight, touch, taste, smell and hearing, but most of the time is focused on sight (images) and hearing (music) — to help individuals with dementia remember events, people and places from their lives. The few existing technological platforms that support reminiscence therapy produce a collection of data that remains unchanged throughout time, sometimes only based on a set of generic pictures, where their acquisition is made in a non dynamic way. Our goal with this work is to build a digital platform that will help with the reminiscence therapy. It will allow caregivers to upload pictures to be used in sessions, gather generic pictures based on patients personal information, keep track of the patients evolution, as well as of their emotional reactions over time. It is important to keep track of those emotions to improve a session, since different images have different effects on the patient. Preventing from showing an image that provokes a bad reaction will not only help the person with dementia but the caregiver, by reducing the chance of irritability or even aggressiveness from the patient with dementia towards the caregiver. In this project we developed a digital platform, called RTPatient, to support PwD and their caregivers. With RTPatient we are able to insert or edit patients information, share the responsibility of gathering information, start a reminiscence therapy session or consult previous sessions. The platform has a login for each Caregiver, where they can see their list of patients and their details. The Caregiver can be a family member or a formal carer. After finishing our platform we did Usability tests, used the System Usability Scale (SUS) to measure the overall usability of the solution and asked for feedback to help us understand if the platform was easy to use and if it had all the needed functionalities. After analysing all the data and checking our SUS average score of 91.4, we can conclude that our platform was considered easy to use. Regarding the feedback we identified some small improvements to be done in future work, like a better positioning of some buttons. Another suggestion was the addition of a new functionality to add a list for the caregiver to see all the patients he used to take care of.

Web applications are the building blocks of many services, from social networks to banks. Network security threats have remained a permanent concern since the advent of data communication. Not withstanding, security breaches are still a serious problem since web applications incorporate both company information and private client data. Traditional Intrusion Detection Systems (IDS) inspect the payload of the packets looking for known intrusion signatures or deviations from nor mal behavior. However, this Deep Packet Inspection (DPI) approach cannot inspect encrypted network traffic of Hypertext Transfer Protocol Secure (HTTPS), a protocol that has been widely adopted nowadays to protect data communication. We are interested in web application attacks, and to accurately detect them, we must access the payload. Network flows are able to aggregate flows of traffic with common properties, so they can be employed for inspecting large amounts of traffic. The main objective of this thesis is to develop a system to discover anomalous HTTPS traffic and confirm that the payloads included in it contains web applications attacks. We propose a new reliable method and system to identify traffic that may include web application attacks by analysing HTTPS network flows (netflows) and discovering payload content similarities. We resort to unsupervised machine learning algorithms to cluster netflows and identify anomalous traffic and to Locality Sensitive Hashing (LSH) algorithms to create a Similarity Search Engine (SSE) capable of correctly identifying the presence of known web applications attacks over this traffic. We involve the system in a continuous improvement process to keep a reliable detection as new web applications attacks are discovered. We evaluated the system, which showed that it could detect anomalous traffic, the SSE was able to confirm the presence of web attacks into that anomalous traffic, and the continuous improvement process was able to increase the accuracy of the SSE.

O Maciço Granítico de Segura e o campo aplito-pegmatítico rico em Li e Sn que se supõe derivar da sua instalação representam objetos geológicos de grande interesse científico devido ao seu possível potencial metalogenético. A génese destes corpos intrusivos tem associada a si episódios de metassomatismo que se traduzem em modificações mineralógicas e químicas nas rochas metapelíticas encaixantes e cujas características são importantes na compreensão da história evolutiva. Por sua vez, as mineralizações de Sn-W em veios de quartzo mineralizado que existem próximas do Maciço ainda não têm origem e fonte de metais bem definidas. A presença abundante de óxidos de Ti e a sua afinidade geoquímica com elementos de interesse (nomeadamente Sn, W, Nb e Ta) permitiu averiguar se estas fases minerais (mais especificamente, polimorfos de TiO2) poderão funcionar enquanto indicadores mineralizantes para Sn (±W). Os resultados iniciais mostram que o rútilo tem potencial enquanto indicador mineralizante para Sn(±W), uma vez que incorpora estes elementos de forma significativa quando próximo de mineralizações. A ilmenite, presente no Maciço de Segura e nas rochas metapelíticas encaixantes, não incorpora estes elementos na sua estrutura da mesma forma que o rútilo, verificando se, porém, enriquecimentos em Zn (na ilmenite dos metapelitos). O metassomatismo nas rochas metapelíticas está bem evidenciado pela turmalinização junto ao contacto com filões de quartzo. Nos aplito-pegmatitos, a mineralogia acessória e crítica corresponde a ambligonite-montebrasite, cassiterite e columbite-tantalite, contendo também micas enriquecidas em Li. A abundância relativa de fosfatos nas amostras estudadas poderá indicar a coexistência local de diferentes tipos de pegmatitos ou relações espácio-temporais, uma vez que está documentada a existência de pegmatitos de subtipo lepidolite na mesma zona. Por sua vez, a cassiterite e columbite-tantalite poderão ser importantes para aprofundar o conhecimento acerca da petrogénese e origem destes aplito-pegmatitos, podendo eventualmente contribuir para a definição de critérios de prospeção.

Vários processos-chave contribuiem para a regulação da expressão genética, essencial para a sobrevivência e adaptação das células às suas necessidades. Um desses processos consiste na tradução do RNA mensageiro (mRNA), um mecanismo que permite à célula responder rapidamente a condições de stress através de modificações na sua maquinaria básica ou através da manutenção da tradução de certos mRNAs em detrimento de outros. Existem vários elementos presentes na região 5’ não traduzida [do inglês, 5’ untraslated region (5’UTR)] do mRNA que são fundamentais para a regulação da sua tradução, tais como as grelhas de leitura abertas a montante da grelha de leitura principal [do inglês, upstream open reading frames (uORFs)], que estão amplamente difundidas pelo genoma, sendo que a sua inserção ou deleção pode levar ao desenvolvimento de doenças. A eritropoietina humana (EPO) é uma hormona glicoproteica envolvida na indução da eritropoiese em condições de hipóxia. Além de desempenhar um papel fundamental na eritropoiese, a EPO também desempenha outros papéis não hematopoiéticos como consequência da sua expressão noutros tecidos para além do rim (onde ocorre ~90% da sua produção) como nos músculos e também no coração e no cérebro, apresentando propriedades de cardio e neuroproteção. Sabe-se que a regulação da expressão do gene da EPO ocorre ao nível da transcrição e do processamento do mRNA, mas também se sabe que ocorre ao nível da tradução através de uma pequena uORF composta por 14 codões. Tal como deduzido através da comparação dos níveis de mRNA e de proteína em estudos anteriores, esta uORF funciona como um inibidor da tradução da grelha de leitura principal [do inglês, open reading frame (ORF)] da EPO sob condições normais. Isto acontece porque o codão de iniciação (AUG) da uORF é reconhecido pela maquinaria de tradução, impedindo que a mesma reconheça e traduza a ORF principal, tratando-se assim, de um regulador negativo da expressão génica. No entanto, em resposta à hipóxia, esta repressão da tradução da ORF é significativamente aliviada, através de um aumento do leaky scanning do AUG da uORF nestas condições. Em concordância, foi demonstrado que em condições de stress, como a hipóxia, ocorre um aumento significativo da síntese da proteína EPO. Tendo em conta todo este conhecimento, neste projeto, avaliámos se a uORF da EPO reprime a tradução da sua ORF principal em células musculares, cardíacas e neuronais e estudámos o efeito da hipoxia neste mecanismo de regulação da tradução. Pudemos observar que em condições normais, a uORF da EPO reprime de facto a tradução da sua ORF principal nas células musculares e cardíacas e que, com a aplicação do stress da hipóxia, ocorre um alívio significativo da repressão da tradução da uORF principal nestas duas linhas celulares. No caso das células neuronais, verificámos que existe uma tendência para que o mesmo se verifique, no entanto, definimos que deverá ocorrer repetição futura das experiências devido a constrangimentos experimentais derivados da linha celular utilizada, não permitindo a obtenção de valores estatisticamente significativos. Assim, o conhecimento gerado neste projeto pode ser usado para entender melhor a regulação da EPO ao nível da tradução e a sua implicação na resposta das células a condições de stress, mais especificamente, à hipóxia, condição essa que ocorre aquando de eventos de isquemia do coração e do cérebro, ou seja, infartos agudos do miocárdio (IAM) e acidentes vasculares cerebrais isquémicos (AVCs).

A regeneração é um processo conservativo de desenvolvimento pós-embrionário que ocorre nas células somáticas e sucede em indivíduos no estado larval, jovens e adultos. Envolve a reparação e reposição de células, tecidos e órgãos, ou até mesmo a substituição de partes corporais inteiras com a mesma estrutura, forma e polaridade. Este mecanismo é despoletado após uma lesão traumática ou amputação devido a predação, ou quando o próprio organismo realiza autotomia como mecanismo de defesa à predação ou como mecanismo de reprodução assexuada. No entanto, a capacidade de regeneração é diversa para as várias espécies. Em particular, os mamíferos apresentam uma ineficiente regeneração ao nível do Sistema Nervoso Central (SNC) após lesão traumática, o que resulta na perda ou deficiências de atividade motora. Por outro lado, a regeneração do SNC, assim como a regeneração de outros tecidos, órgãos e membros corporais, tem elevada expressão nos equinodermes. Tornando-se por isso, fundamental estudar o processo de regeneração nos equinodermes, com o objetivo de compreender a evolução e os mecanismos do SNC nos humanos, assim como perceber as causas deste processo não estar ativo em certos sistemas anatómicos, apresentando-se as estrelas-do-mar como relevante modelo de estudo. Nestes organismos a regeneração pós-traumática e pós-autotomia do braço tem sido recorrentemente alvo de investigação, ao passo que a regeneração do SNC não tem colhido tanto interesse pela comunidade científica. Por estes motivos, este projeto destinou-se a estudar a fase inicial do processo de regeneração pós-traumática do Cordão Nervoso Radial (RNC) da estrela-do-mar da espécie Marthasterias glacialis. Esta espécie, denominada comumente como estrela-do-mar de espinhos derivado do seu corpo ser coberto por espinhos, detém de uma extraordinária capacidade para regenerar partes do corpo, possui o RNC numa posição anatómica exterior e apresenta uma elevada abundância nas praias da costa portuguesa, sendo por isso largamente utilizada como organismo modelo nos estudos de regeneração. Desta forma, com o objetivo de investigar os processos celulares e moleculares que lhe estão associados foi estudada a histologia do tecido nervoso em regeneração e as dinâmicas das populações celulares e das proteínas circulantes no fluído celómico. O processo regenerativo desencadeado pela amputação de uma porção do RNC na parte distal da ponta do braço da estrela-do-mar foi estudado em três pontos-temporais (1 dia, 7 dias e 14 dias após excisão parcial do nervo). Relativamente ao estudo das proteínas solubilizadas no fluído celómico livre de células (CFF), foi efetuada a sua quantificação total pelo método espectrofotométrico de BCA depois de removida a porção celular do fluído celómico (celomócitos). Verificaram-se diferenças significativas na quantidade de proteína total no CFF entre o dia 1 pós-amputação do nervo (p.a.) e o dia 14 p.a., e entre todos os pontos temporais e o grupo controlo. No entanto, foram também encontradas diferenças significativas em amostras de CFF de animais controlo recolhidas em dias diferentes. O que implicará a realização de novos ensaios usando grupos controlo para cada dia de recolha de fluído coelómico. Para o estudo das populações celulares circulantes no fluído celómico, foi usada marcação com DRAQ5 de forma a caracterizar as células vivas, e obter valores de side scatter, forward scatter, incorporação de DRAQ5 e determinar a percentagem de eventos celulares por citometria de fluxo (CF). Com base em ensaios de CF tinham sido descritas em Andrade et al. (2021), duas populações celulares em animais não amputados (P1 e P2). P2 apresentou valores de incorporação de DRAQ5 e de side scatter superiores aos valores medidos para P1. As mesmas duas populações foram observadas no grupo controlo usado neste estudo. Verificou-se que as percentagens de eventos celulares para estas duas populações não apresentam diferenças significativas durante o processo de regeneração. No entanto, destaca-se a observação de uma nova população de celomócitos, aqui designada P3. Esta população surge na maioria das amostras a partir do dia 7 p.a. e ganha maior evidência no dia 14 p.a. Em concordância, foram registadas diferenças significativas na sua abundância entre o grupo controlo e os dias 7 e 14 p.a, e entre o dia 1 p.a e os dias 7 e 14 p.a. Esta população celular (P3) apresenta valores de side scatter que podem ser associados à medição da sua complexidade morfológica, similares aos das células da população P1. Enquanto os níveis de incorporação de DRAQ5 da população P3 são similares aos da população P2. O estudo morfológico dos padrões tecidulares e celulares do nervo em regeneração foi efetuado através de técnicas histológicas, com recurso ao método de coloração tricromática e visualização dos tecidos por microscopia ótica. Nesta análise evidencia-se uma rápida regeneração do tecido nervoso amputado e uma mudança gradual na sua conformação ao longo do tempo de regeneração. No dia 1 p.a ainda não é possível visualizar a reposição da ligação do cordão nervoso no local onde ocorreu a sua excisão parcial. No dia 7 p.a. já é possível verificar a existência de tecido nervoso a ligar as duas extremidades lesionadas, porém com reduzida espessura, especialmente na zona do neuropilo. No dia 14 p.a este tecido em regeneração apresenta maior espessura com dimensões e estrutura semelhantes ao tecido original. Com a particularidade de presumivelmente a zona somática do epitélio ectoneural, que é constituída pelos corpos celulares dos neurónios e das células gliais radiais, ser a primeira a ser regenerada, só depois seguida pela zona do neuropilo. Em concordância com o processo morfaláctico, verifica-se ainda hipertrofia do seio hiponeural, do canal vascular aquífero e do canal hemal, possivelmente em consequência do fluxo de fatores moleculares e/ou a migração de células que poderão coadjuvar no processo regenerativo. Adicionalmente, também é possível visualizar nos três pontos temporais a retração dos pés ambulacrários na região de amputação do nervo, presumivelmente como mecanismo comportamental de defesa e de proteção da região lesionada. Previamente à realização dos ensaios acima descritos, e com o propósito de controlar a variabilidade biológica encontrada em estudos anteriores, avaliou-se um conjunto de parâmetros de fácil determinação sem recurso a processos invasivos que permitissem distinguir entre machos e fêmeas. A sua futura utilização iria permitir separar os animais em função do género e, consequentemente a realização dos ensaios de regeneração para cada um dos géneros, anulando a eventual contribuição deste fator nestes estudos. De modo a cumprir este objetivo, as estrelas-do-mar foram caracterizadas através de medidas biométricas tais como, o diâmetro do disco central, o peso, o comprimento e a largura dos braços, assim como as razões entre cada uma destas medidas. Foi ainda determinada a quantidade total de proteína no CFF e avaliada a sua correlação com as medidas biométricas. Concluiu-se que estes parâmetros não permitem criar um modelo preditivo do sexo de novos espécimes, não tendo sido possível fazer a separação dos animais em função do género nos ensaios de regeneração descritos. Apesar de não ter sido possível concluir sobre a influência do sexo na regeneração devido ao reduzido poder estatístico, os resultados obtidos não sugerem que esta seja a causa das diferenças encontradas nestes estudos. Por fim, foi também realizada a distinção com base em parâmetros morfológicos e pelas determinações efetuadas por citometria de fluxo de imagem (CFI) das subpopulações de celomócitos de cada uma das duas populações anteriormente caracterizadas em Andrade et al. (2021). As imagens obtidas por CFI foram associadas a três subpopulações da população P1, uma subpopulação a mais do que tinha sido caracterizado anteriormente, e aqui designada como P1B, e a 4 subpopulações da população P2. Cada par de subpopulações entre cada população foi sujeito a um algoritmo de inteligência artificial, a partir do qual obteve-se os parâmetros que permitem uma melhor discriminação. Onde, consequentemente, foi possível obter uma boa distinção entre cada par das três subpopulações da P1 através de parâmetros de textura, e das quatro subpopulações da P4 em termos de textura, forma ou tamanho celular. Estes parâmetros serão usados em futuros estudos das dinâmicas das células circulantes após a indução de regeneração.

Dono de uma legitimidade dúbia, chegado ao poder pela força das armas, Henrique VII herda um reino acabado de sair de um difícil século de quatrocentos. A sua acção governativa, reformadora e centralizadora, encontra dificuldades de afirmação na Europa diplomática e política, onde forças ancestrais se digladiam. A sua atenção vira-se então para formas inovadoras de afirmação; entre estas, avulta a entrada no jogo do descobrimento e conquista além-mar, de que conhecia os feitos – estava bem informado – e invejava os efeitos. A sua cidade de Bristol participava havia muito das inovações técnicas, culturais e comerciais de um Atlântico pleno de potencialidades. Antecedendo a aceitação, pelos Reis Católicos, da proposta de Colombo, foi ao Monarca Inglês apresentado o mesmo plano pelo irmão Bartolomeu, enviado a Inglaterra; a proposta, escorada numa argumentação que realça o papel de Portugal no conhecimento de um novo mundo, foi aceite pelo Tudor. Foi apenas gorado o ensejo pela concretização do apoio espanhol ao futuro Almirante. Mas surge Cabot – com um plano e uma aprendizagem similares a Colombo. Com ele, o Rei, apoiado nos saberes portugueses e nas aspirações de Bristol, inicia a Inglaterra nas demandas de outras paragens. Se o sucesso de 1497 não teve seguimento imediato, a reformas navais de Henrique VII e o feito do veneziano ajudaram a lançar as bases da futura Inglaterra: comercial, marítima, expansionista.

Aquaporins (AQPs) are a family of membrane intrinsic proteins that facilitate the diffusion of water, glycerol, and other small solutes across cell membranes. This protein family is composed of 13 members in humans (AQP0-12), which are grouped into three different subgroups according to their permeability profile and sequence homology. Due to their biological importance and widespread distribution, AQPs dysregulation can induce functional changes in different systems/tissues, causing the development of several dis eases, including carcinogenesis. The relationship between AQPs and cancer has been extensively studied, concluding that some AQPs such as AQP5, are overexpressed in a wide variety of tumor cells. Therefore, the discovery of efficient and selective modulators of AQPs has been considered as a promising alternative anticancer treatments. In this project, we proposed to identify and validate functionally promising inhibitors of AQP5 through a multidisciplinary approach that gathered molecular dynamics simulations, molecular docking, Molecular Mechanics Poisson-Boltzmann surface area (MM-PBSA) calculations, and stopped-flow spectroscopy. Using a multi-conformational approach on AQP5 structure, we have enrolled a structure-based virtual screening campaign using the LOPAC and Myria databases from Sigma-Aldrich company, to identify promising modulators of AQP5 permeability. The most promising compounds were then purchased and experimentally tested to evaluate their function modulatory effect on human aquaporin-5. Although we could not identify efficient modulators of the AQP5 function, we were able to gather a high amount of knowledge that will be used in additional studies, always focused on the identification of promising therapeutic anticancer agents targeting AQP5.

Este trabalho teve como objetivo avaliar e sugerir possíveis otimizações para o processo de transição da produção de uma tetraciclina de 3ª geração do setor 395 para o setor 325. Com esta transferência pretendia-se duplicar as quantidades produzidas e, simultaneamente, implementar sistemas de automação e melhorar as condições tanto a nível de processo como de segurança pessoal. O processo de produção desta tetraciclina de 3ª geração envolve três passos. No primeiro passo, verificou-se que fixando o tempo de dissolução da matéria-prima é possível reduzir a formação do produto indesejado, mantendo as quantidades dos componentes envolvidos na síntese do produto final. Observou-se ainda uma grande dependência do tempo de ciclo no tempo de secagem dos intermediários. No segundo passo, melhorou-se o tempo de ciclo e aumentou-se a percentagem de produto final fixando o tempo e velocidade de agitação na precipitação do subproduto e do produto final. No entanto, este passo deve continuar a ser monitorizado, de modo a regularizar os tempos de ciclo e das operações. No terceiro passo, observou-se a influencia do tempo de filtração e do volume de HCl na percentagem de impurezas no pó final. Verificou-se ainda que o tempo de centrifugação influencia o tempo de secagem e, consequentemente, o tempo de ciclo. Futuramente, é essencial monitorizar e regularizar os tempos de filtração e de secagem, para reduzir o tempo de ciclo. Por fim, demonstram-se as melhorias no processo de produção da tetraciclina produzida no setor 395 face ao setor 325, nomeadamente, melhorias nos tempos de ciclo, na qualidade do produto final e na operacionalização do processo de fabrico. Contudo, concluiu-se que este processo tem de ser monitorizado continuamente, pois nalguns passos, a informação recolhida apresenta alguma ambiguidade, sendo necessário manter o acompanhamento do processo para estender a sua otimização.